HER2特异性的驼源纳米抗体制备与筛选

黄贞魁; 李村院; 李晓悦; 韩林; 倪伟; 胡圣伟

doi:10.16853/j.cnki.1009-3575.2026.04.008

内蒙古农业大学学报（自然科学版） ›› 2026, Vol. 47 ›› Issue (4) : 63 -71. DOI: 10.16853/j.cnki.1009-3575.2026.04.008

HER2特异性的驼源纳米抗体制备与筛选

黄贞魁, 李村院, 李晓悦, 韩林, 倪伟, 胡圣伟

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摘要

制备HER2的特异性纳米抗体，为HER2阳性肿瘤的靶向治疗提供新型候选分子。通过生物信息学方法预测HER2胞外Ⅱ区的疏水性、信号肽、跨膜结构以及蛋白的二三级结构；从239T细胞中提取RNA，通过RT-PCR克隆出该区域基因，构建原核表达载体并使用纯化后的蛋白免疫骆驼。从已免疫的骆驼血中提取RNA，直接对抗体的VHH基因进行高通量测序。采用Elisa和SDS-PAGE技术检验纳米抗体，并将大小符合的胶块进行蛋白质质谱测序。基于质谱结果筛选出前5个高丰度的纳米抗体并进行分子对接分析。成功克隆并表达HER2胞外Ⅱ区重组蛋白，且免疫后的骆驼血清效价高达1∶640 000。在高通量测序后，结合质谱结果筛选出5个高丰度纳米抗体（OUT-2334、OUT-8933、OUT-4166、OUT-2966、OUT-2853），其分子对接显示这些纳米抗体均能够与HER2胞外Ⅱ区的关键氨基酸残基结合。成功为HER2阳性肿瘤的靶向治疗提供了新的候选分子，也为纳米抗体的高效筛选提供了方法。