DANCR通过调节DANCR-MLL3轴促进胰腺癌进展的机制

摘要

目的：探究长链非编码RNA分化拮抗非蛋白编码RNA(DANCR)及通过调控DANCR-混合谱系白血病3(MLL3)轴影响胰腺癌进展的分子机制。方法：收集泰安市中心医院2019年1月—2022年12月收治的120例胰腺癌患者的肿瘤组织及配对癌旁组织，检测DANCR表达量，分析其与临床病理参数及预后的关联；在胰腺癌细胞系（MIA PaCa-2、PANC-1）中敲低DANCR，通过CCK-8、划痕实验、Transwell实验评估其对细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响。采用双荧光素酶报告基因实验验证DANCR对MLL3启动子活性的调控作用。通过蛋白质印迹法检测MLL3、H3K4me3及p57的蛋白表达，并使用MLL3抑制剂MI-503进行回复实验，验证DANCR-MLL3-p57信号轴的功能。结果：胰腺癌组织中DANCR mRNA表达显著高于癌旁组织（P<0.01）；胰腺癌细胞系中DANCR mRNA表达显著高于正常胰腺导管上皮细胞（P<0.01）,MLL3 mRNA表达则显著降低（P<0.01），且胰腺癌细胞系中两者表达呈显著负相关（r=-0.808,P<0.01）;DANCR高表达与胰腺癌淋巴结转移、低分化相关（P<0.01），且高表达患者总生存期显著缩短（P<0.01）；敲低DANCR后，MIA PaCa-2、PANC-1细胞增殖活力、划痕迁移率、Transwell迁移及侵袭细胞数均显著降低（P<0.01）；双荧光素酶报告基因实验证实DANCR可抑制MLL3启动子活性（P<0.01）；敲低DANCR可上调MLL3、H3K4me3、p57蛋白表达（P<0.01），而加入MI-503可逆转上述蛋白表达变化及细胞功能抑制效应（P<0.01）。结论：DANCR通过调节DANCR-MLL3轴促进胰腺癌的恶性进展，可能成为胰腺癌潜在的预后生物标志物和治疗靶点。

关键词

胰腺肿瘤 / 分化拮抗非蛋白编码RNA / 混合谱系白血病3 / 增殖 / 侵袭