发根农杆菌介导的蓝莓遗传转化体系的建立

邬婷婷; 刘凉琴; 姜燕琴; 葛春峰; 田亮亮; 刘梦溪; 曾其龙; 於虹

doi:10.13925/j.cnki.gsxb.20250077

果树学报 ›› 2025, Vol. 42 ›› Issue (8) : 1897 -1904. DOI: 10.13925/j.cnki.gsxb.20250077

发根农杆菌介导的蓝莓遗传转化体系的建立

邬婷婷, 刘凉琴, 姜燕琴, 葛春峰, 田亮亮, 刘梦溪, 曾其龙, 於虹

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摘要

【目的】建立蓝莓（Vaccinium corymbosum）简单、快速、经济的发根农杆菌转化体系。【方法】以蓝美1号蓝莓地栽植株当年生绿枝的茎段为外植体，使用携带GFP过表达质粒的发根农杆菌K599，在不同菌液浓度及不同添加剂组合（乙酰丁香酮和表面活性剂）的筛选条件下，通过注射蓝莓茎段的芽点及两端切口进行侵染，利用GFP荧光检测和DNA检测进行转基因株系验证。【结果】GFP荧光检测发现茎段芽点及下端切口处分别产生表达荧光信号的侧芽及毛状根；在菌液OD₆₀₀值为0.5～1.5的浓度区间，OD₆₀₀值为1.0时诱导率最高达42.31%；不同添加剂组合对诱导率具有较大影响，200μmol·L^-1乙酰丁香酮加0.05%表面活性剂的添加剂组合中诱导率最高达42.50%；最早在培养45 d时取材鉴定蓝莓遗传转化株系，从20个随机样本中测得14株转化植株，预期最高转化率为29.75%。【结论】建立了简单、快速的发根农杆菌介导的蓝美1号蓝莓遗传转化体系，为蓝莓的基因功能研究和良种选育提供技术支持。