内生菌产红青霉SF-08对核桃幼苗定殖能力的影响

梁琦; 余雅雯; 郝晟喆; 热孜万古丽·吐尔孙; 李淼淼; 陈小飞

doi:10.13925/j.cnki.gsxb.20250502

果树学报 ›› 2026, Vol. 43 ›› Issue (5) : 1247 -1261. DOI: 10.13925/j.cnki.gsxb.20250502

内生菌产红青霉SF-08对核桃幼苗定殖能力的影响

梁琦, 余雅雯, 郝晟喆, 热孜万古丽·吐尔孙, 李淼淼, 陈小飞

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摘要

【目的】明确拮抗真菌产红青霉SF-08（Penicillium rubens SF-08）在核桃幼苗中的内生定殖特征及其动态变化。【方法】采用PEG介导的原生质体转化法构建GFP标记SF-08转化子；利用激光共聚焦显微镜观察其在核桃幼苗根、茎、叶中的分布；以野生型SF-08孢子悬液接种核桃幼苗，采用荧光定量PCR检测其在不同组织中的定殖密度变化。【结果】筛选获得1株表型和遗传性状稳定的GFP标记转化子SF08gfpF-2，其荧光信号稳定，菌落形态和拮抗活性与野生型无明显差异，该转化子较好地保持了野生型的主要生物学特性。该转化子可内生并系统定殖于核桃幼苗根、茎、叶，在根部主要分布于表皮、皮层和维管束，在叶部主要位于细胞间隙。建立的qPCR检测方法扩增效率高（>98%）、线性关系良好(1.5×10～3～1.5×10～9copies·g^-1DNA,R²>0.99)。动态定量结果表明，SF-08先在根部大量定殖，后向茎、叶扩散，并在接种14～21 d后菌体载量显著增加，随后趋于稳定或缓慢下降。【结论】SF-08具有在核桃幼苗体内内生和系统定殖的能力，根部为其主要定殖部位。