过表达yfiA、rmf和hpf对大肠杆菌DNA复制起始的影响

张树军

doi:10.14045/j.cnki.15-1220.2025.04.002

内蒙古民族大学学报（自然科学版） ›› 2025, Vol. 40 ›› Issue (4) : 10 -15. DOI: 10.14045/j.cnki.15-1220.2025.04.002

过表达yfiA、rmf和hpf对大肠杆菌DNA复制起始的影响

张树军

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摘要

通过检测核糖体休眠因子yfiA、rmf和hpf基因缺失突变体（ΔyfiA、Δrmf和Δhpf）中过表达相应基因后的细胞表型变化，研究yfiA、rmf和hpf过表达对大肠杆菌DNA复制起始的影响。使用中度拷贝质粒pACYC177构建pACYC177-yfiA、pACYC177-rmf和pACYC177-hpf重组质粒，分别转入ΔyfiA、Δrmf和Δhpf突变体，pACYC177空载质粒作为对照，观察缺失基因过表达后细菌的表型变化，包括DNA复制式样、细胞倍增时间、细胞大小、细胞内总蛋白和DnaA蛋白含量变化。结果显示，与对照BW25113/pACYC177(WT/pACYC177)相比，ΔyfiA、Δrmf和Δhpf突变体相应基因过表达后出现轻度的DNA复制起始的提前发生，细胞倍增时间相同或缩短，细胞体积仍然减小，细胞内总蛋白的相对含量为95%、90%和92%,DnaA蛋白的相对含量为98%、93%和110%。表明突变体内过表达缺失的基因后，DNA复制式样、细胞倍增时间、细胞内总蛋白和DnaA蛋白含量向野生型恢复，但细胞大小没有向野生型恢复，原因可能是缺失基因过表达后，细胞内的总蛋白仍然低于野生型导致。