卵清蛋白诱导的特应性皮炎小鼠模型中白细胞介素-25的作用及其调控意义

摘要

目的：探讨白细胞介素-25（interleukin-25,IL-25）对卵清蛋白（ovalbumin, OVA）诱导的特应性皮炎小鼠模型的影响，以及调控IL-25的意义。方法：将90只健康雄性6周龄无特定病原体（specific pathogen free, SPF）级BALB/c小鼠分为6组（每组15只）,分别为：（1）皮下注射磷酸盐缓冲液（phosphate buffered saline, PBS）组（正常对照组）;（2）皮下注射小鼠IL-25组（IL-25组）;（3）皮下注射抗小鼠IL-25单克隆抗体组（anti-IL-25组）,每日皮下注射1次×1周，间隔2周，重复每日皮下注射1次×1周，间隔2周，再重复每日皮下注射1次×1周，总共7周；（4） OVA致敏组（模型组）;（5） OVA致敏及IL-25皮下注射组（IL-25干预致敏组）;（6） OVA致敏及anti-IL-25注射组（anti-IL-25干预致敏组）。（5）(6)组在致敏过程中给予IL-25或anti-IL-25的方式同（2）(3)组。致敏期间观察比较小鼠的搔抓行为和皮肤表现，致敏结束24 h后由小鼠心脏取血，分离血清，采用酶联免疫吸附试验（enzyme linked immunosorbent assay, ELISA）检测总IgE、IL-4、IL-5、IL-13等。取致敏部位的皮肤进行苏木精-伊红（hematoxylin-eosin, HE）染色、免疫组织化学、实时PCR（real-time PCR）及Western blot检测。采用单因素（ANOVA）方差分析比较各组间各项指标的差异。结果：实验小鼠末次处理24 h后，IL-25干预致敏组的搔抓次数高于模型组，anti-IL-25干预致敏组的搔抓行为显著低于模型组；IL-25干预致敏组特应性皮炎表现、表皮增厚及真皮炎细胞浸润程度均明显重于模型组及anti-IL-25干预致敏组；IL-25干预致敏组血清IgE、IL-4、IL-5、IL-13水平显著高于模型组及anti-IL-25干预致敏组；IL-25干预致敏组CD4⁺ T细胞在真皮层较anti-IL-25干预致敏组显著增多；IL-25干预致敏组的丝聚蛋白（filaggrin）及防御素β2（defensin β2）蛋白水平明显低于模型组或anti-IL-25干预致敏组。结论：在OVA诱导的皮炎模型中，IL-25能够明显促进小鼠表皮屏障功能损害，加重OVA诱导的皮炎损害，拮抗IL-25可一定程度上缓解OVA诱导的皮炎损害。

关键词

特应性皮炎 / 白细胞介素-25 / 卵清蛋白 / 动物疾病模型