水通道蛋白5对干燥综合征大鼠TLR4/MyD88/NF-κB信号的影响

摘要

目的：探讨水通道蛋白5(aquaporin 5,AQP5)对干燥综合征(Sj9gren syndrome, SS)大鼠Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)/髓样分化因子88(myeloid differentiation factor 88,MyD88)/核因子κB(nuclear factorκB,NF-κB)信号的影响。方法：从基因表达综合数据库(Gene Expression Omnibus, GEO)中提取SS基因表达数据集GSE406611和GSE84844,使用R软件分析AQP5的mRNA表达。构建大鼠SS模型，将造模成功的大鼠随机分为SS组、SS+NC组和SS+pc组，每组各10只；取10只正常大鼠作为Normal组。SS+NC组大鼠于颌下腺位置每日一次皮下注射10μg的rno-pcDNA3.1-AQP5-NC,SS+pc组大鼠于颌下腺位置每日一次皮下注射10μg的rno-pcDNA3.1-AQP5,连续注射28 d。采用酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)试剂盒检测大鼠血清中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)的含量，采用高通量测序确定靶点基因，采用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)和Western blot检测大鼠颌下腺组织中AQP5、TLR4、MyD88、NF-κB的mRNA水平和蛋白表达情况。结果：在SS数据集GSE406611和GSE84844中，AQP5的mRNA表达明显降低。与Normal组相比，SS组大鼠血清中TNF-α和IL-1β的含量明显升高，TLR4、MyD88、NF-κB的mRNA和蛋白表达明显升高，AQP5的mRNA和蛋白表达明显降低；过表达AQP5后，SS+pc组大鼠血清中TNF-α和IL-1β的含量明显降低，TLR4、MyD88、NF-κB的mRNA和蛋白表达明显降低，AQP5的mRNA和蛋白表达明显升高，差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论：AQP5参与SS的进展，AQP5的表达升高能明显抑制炎症性应激，减轻颌下腺组织病理损伤，这可能与抑制TLR4/MyD88/NF-κB信号的传导有关。

关键词

水通道蛋白质5 / 干燥综合征 / Toll样受体4 / 髓样分化因子88 / NF-κB / 信号通路