大自然中霉菌种类很多,能产生毒素的霉菌有几十种,其中能让动物中毒致病的超过十余种
[1],黄曲霉菌是其中的一类。黄曲霉菌在曲霉菌属中属于致病性强且常见的病原菌之一,能产生1种毒性极强的剧毒物质——黄曲霉毒素,不仅污染饲料和环境,还通过呼吸道、消化道传播,降低猪的免疫力,引起猪的肺、肝功能下降,从而中毒死亡,给养殖业造成极大危害。大豆、玉米、稻谷、花生、大小麦、草料等饲料中都可寄生霉菌,当环境中的温湿度达到合适的条件,霉菌便可在上述饲料中快速生长代谢出毒素。当猪采食有毒饲料或接触污染的垫草便可发病,临床病症的主要特点是呼吸困难,以肝脏受损、肝硬化、肝癌疾患为主,其他脏器出血水肿、中枢神经机能紊乱。
1 病因及流行病学特点
1.1 发病原因
黄曲霉毒素是黄曲霉和寄生曲霉的代谢产物,极具毒性,能破坏猪正常肝脏组织,严重时,可引起猪中毒死亡。黄曲霉菌所产生的毒素为二呋喃氮朵邻酮的衍生物,包含了黄曲霉毒素B
1,B
2,G
1,G2,M
1,M
2,P
1,Q
1,H
1,GM和毒醇等十余种结构相似的化合物的混合物
[2],其中最重要和毒性最大的是黄曲霉毒素B
1,在紫外线下毒素有很强的荧光性,低浓度的毒素易被紫外线破坏。黄曲霉菌产毒最适宜的温度为24~30 ℃,最适宜的相对湿度在80%,适于在油料作物和谷物的种子及加工产品如玉米、花生饼、红薯干、木薯干等谷物,以及鱼粉和肉类制品中生长,其中花生和玉米最容易污染。因此,在粮食收获、加工、贮藏时,若处理不当,上述饲料可发霉变质,猪吃了发霉饲料导致中毒。
1.2 流行特点
在气候转变,夏末与秋冬季节、阴雨连绵时常暴发该病。据调查
[2],猪食用发霉的玉米饲料导致中毒发病,死亡率可达66%。在同槽饲喂的猪群中,幼猪和公猪比较容易发病。
2 临床症状
黄曲霉毒素中毒的病症因猪只的不同发育阶段、抵抗力强弱、营养状况、个体免疫水平、摄入霉变饲料的数量和中毒时间长短的不同,临床症状会表现出不同的变化。通常猪饲喂了含有黄曲霉菌的饲料5~15 d发病死亡。临床上多为群发性,生长期相同的猪往往同时发作,主要症状为精神沉郁、采食量下降、大量饮水、生长发育缓慢、皮肤表面充出血、粪便有血块,随着病程发展,病猪表现出神经症状,如全身抖动抽搐、精神紧张、走路摇晃、站立不稳以及角弓反张等症状。最急性型,1 h内死亡,症状为口吐白沫,口腔鼻孔流血,全身肌肉颤动,继而衰竭致死;急性型,1 d内死亡,主要为贫血和出血,表现为精神委顿,不食,体温正常,后躯衰弱,黏膜苍白,有的出现独自站立在角落或用头抵触墙等神经症状,有的会上吐下泻,母猪甚至早产、流产,剖检可见皮下的脂肪在身体不同位置呈现深浅不一的黄色以及直肠出血等症状;亚急性和慢性型,病程长,发病初期,神态不安,精神低沉,走路僵硬,离群独处,低头弓背卷腹,食欲减退,会出现异食癖,渴感增加,多饮水,咳嗽,打喷嚏,病情加剧后食欲废绝,呼吸加快,嘴唇、眼结膜发绀,鼻腔内流出脓性浆液性鼻水,耳后部、腿内侧和肚皮下的皮肤大量充血,甚至有出血斑,排出的粪便结块并且带有血,发病时间长的猪呼吸不畅、皮肤黄染、体表黏膜充血,身体各项机能衰败直至死亡
[3]。
3 剖检病变
剖检可见,可视黏膜及皮下脂肪黄染;血凝不全,全身黏膜、皮下、肌肉有出血点和出血斑;肝脏呈淡棕色或黄色,质脆肿大,有的肝表面出现坏死灶,如密集的粟粒大小或灰黄色的绿豆大小;心包腔黄色积液,心肌松软,心冠脂肪黄色胶冻样,心内外膜有出血点;肺表面凹凸不平,充血、水肿,肺间质加宽,有斑块状实质性的病变,严重的呈现胰变,切开肺部有米粒或黄豆大小的灰白色豆腐渣状病变;有时脾脏可见出血性梗死,胆囊壁严重水肿,肠系膜的淋巴结肿大、充血,并且分布大量的白色豆腐渣样干酪物;胃弥漫性出血和游离血块;肾脏呈弥漫性点状出血;膀胱内会有深黄色尿液;盲肠、结肠的肠壁变薄、黏膜脱落、严重出血;大脑实质出血、水肿、脑膜血管明显扩张。亚急性病例的特征病变部位主要是肝脏严重变性、坏死、肿大、发黄、质脆。
4 诊断方法
1)病变组织镜检。剪取少许发病猪的病变组织结节于载玻片上,压碎病料加入1~2滴生理盐水,盖上盖玻片放在显微镜下观察,可见菌丝体、孢子。
2)分离培养。无菌剪取病变结节,接种在马铃薯培养基或其他真菌培养基上,菌落生长迅速、平坦或略有辐射状皱纹,初期呈黄色,之后逐渐变成黄绿色,老熟后颜色变暗,镜检可见菌丝体、孢子。
3)毒素检测。发霉饲料、病猪胃肠内容物处理后通过各种化学检测手段和仪器设备,采用金标试纸法、薄层分析法、荧光光度法、液相色谱仪法、毛细管电泳法、酶联免疫法等多种方法检测黄曲霉毒素。不同的检测方法有其各自的优势处,可根据检测目的、用途、样品数量等进行选择。
4)动物接种试验。将病猪的胃肠内物、发霉饲料的浸出液喂给1日龄雏鸭,若半数以上雏鸭死亡,且剖检病症主要在肝脏,即可诊断为黄曲霉毒素中毒。
5 预防措施
5.1 切断传染源
在养殖生产中一定要严格禁止投喂发霉饲料,可采用多种防霉的方法。防霉的关键是控制饲料水分和环境温度,采取低温、干燥、除氧和化学药剂等方法来保存饲料,可以有效防止黄曲霉的生长和产毒。生产中收获的饲料谷物在加工好后应尽快进行干燥处理,并且放在低温、干燥的地方存贮,使用低温干燥措施能够有效抑制饲料贮藏室的霉菌。还可以用1‰~5‰的尿素与谷物籽粒混合,在相对湿度高的条件下也能安全贮藏1~2个月
[4]。
若遇到发霉的情况,可尝试使用去毒的方法。当饲料仓贮间已经被污染,可以根据存贮间的面积大小使用甲醛、高锰酸钾、水混合液(三者的比例2∶1∶1)进行熏蒸,或用5%过氧乙酸溶液喷雾。若少量饲料已经发霉可采用以下方法:用二氧化氯浸泡霉变的玉米30~60 min,能有效地去毒;提高加工精度,将稻谷去皮、去糠,可降低黄曲霉素在饲料中的残留量;拣除花生中的霉变、破损、长芽、皱皮及变色花生粒,毒素含量将大大降低;采用高温高压的方法处理,能使黄曲霉毒素转变为无毒的化合物
[5];黄曲霉毒素在紫外光照射下不稳定,可用紫外光照射去除;用碱液处理后黄曲霉毒素内酯环即可被破坏,形成香豆素钠盐,再用清水多次浸泡,可去毒;还可使用微生物降解法、氧化降解法、有机溶剂萃取法等去毒。经过处理的饲料必须限量、间断地喂给动物。
5.2 改善饲养条件、加强营养平衡
猪舍内设置合理的通风换气设备,严禁开门窗直接通风,日温差不应过大,做到逐步合理降温;适当提高日粮中的蛋白水平,添加硒和维生素,降低猪对霉菌毒素中毒的易感程度,减缓霉菌毒素对猪发育的影响;在日粮中添加苯丙氨酸或甲硫氨酸,从而提高猪的抗体水平,增强抵抗力,减少霉菌毒素的影响;添加一些抗氧化物质,如酵母硒、维生素E、维生素A、维生素C等,用于清除体内自由基,保护生物膜免遭毒素的侵害;添加能够吸附黄曲霉毒素等多种毒素的吸附剂,如活化酵母、硅铝酸盐、蒙脱石等
[6],却不会吸附饲料中蛋白质、微量元素、维生素等多种营养成分,从而有利于提高猪体免疫力并且保护肝脏不受损。在春秋转换季节,大部分的猪群,除了哺乳小猪外,都可以添加霉菌毒素吸附剂,效果稳定。
6 治疗措施
立即停止投喂发霉饲料,更换成青嫩、易于消化、含碳水化合物的优质饲料,并且根据临床症状和病理组织变化,采用对症处理和支持疗法。另外,治疗中应注意体内的电解质平衡和防止继发感染的发生,确保猪的各项身体机能正常。
根据发病猪的症状严重程度,可采用解毒、保肝、止血、平衡电解质等疗法。发生急性中毒的猪采用洗胃灌肠的方式(药物如弱碱液或0.1%高锰酸钾溶液),然后投喂健胃缓释剂,如口服盐类泻药硫酸钠50 g,加速胃肠物排出,配合使用陈皮酊和促进胃肠蠕动的药物;出现骚动不安、神经症状的病猪,可按照中毒性脑病作相应处理,给予镇静止痉剂,如2 mg/kg氯丙嗪,或10%安钠加5~10 mL等强心剂
[7];病情严重者,静注25%~50%葡萄糖、维生素C、维生素A。酌情使用青霉素和链霉素,防止并发症。
7 结语
温度和水分是影响黄曲霉毒素产生的重要环境因素,谷物含水分18%左右,花生含水分10%左右,在通风状态下,黄曲霉能够快速生长和产生毒素,因此,在存储饲料时应采取干燥、低温、除氧和化学药剂等方法,可有效防止黄曲霉的生长和产毒。多种动物均能感染该病,而且黄曲霉素有很强的急性毒性和显著的慢性毒性,给养殖业带来严重的经济损失。因此,在养殖过程中饲料加工和存贮、生产饲养、场所消毒等环节都应制定全面、严密的防范措施并严格执行。