规模化猪场猪圆环病毒3型的检疫及防控

摘要

猪圆环病毒3型是近年来在规模化猪场中逐渐受到关注的一种病毒。本文详细介绍了规模化猪场猪圆环病毒3型的流行特征、临床症状及与其他疾病的关联，重点探讨了针对该病毒的检疫及防控措施，检疫方面涵盖了各种检测技术的应用，如血清学检测、RT-PCR和测序技术及其优缺点；防控方面强调了加强卫生管理、建立监测体系，加强病源追溯等多方面综合策略，以有效降低猪圆环病毒3型在规模化猪场中的传播风险，保障生猪健康和养猪产业的稳定发展。

关键词

规模化猪场 / 猪圆环病毒3型 / 检疫 / 防控

在现代养猪业中，规模化猪场占据着重要地位，然而，各种疫病的威胁严重影响生猪养殖业的发展，其中猪圆环病毒3型(porcine circovirus type 3, PCV3)，近年来在全球范围内不断发生，并广泛感染家猪。PCV3病毒是一种DNA病毒，具有独特的病原学特征，病毒结构和遗传特性都区别于其他圆环病毒类型。它在猪群中的传播和流行呈现出一定的特点和规律，它会导致猪只生长发育迟缓、免疫力下降，增加了对其他疫病的易感性；在育肥猪中可能引发呼吸道疾病和消化系统问题，影响猪场的经济效益；母猪感染后可能出现繁殖障碍，如流产、死胎等，给猪场的生产带来重大损失。对猪的免疫系统和器官组织均有影响，表现为呼吸道和泌尿生殖系统疾病，其主要病征为出现瘀斑，严重时可使染病猪群死亡率高达50%。同时，PCV3还可能与其他疫病相互作用，进一步加重病情，使疫病防控形势更为复杂^[1]。因此，对PCV3病毒进行精准检疫和有效控制，对于保障养猪业的发展和猪群健康至关重要。

1 流行特征

1.1 病原学

PCV3是一种无囊膜的单链DNA病毒，呈二十面体，直径13~25 nm，由60个蛋白质亚基组成病毒衣壳；PCV3的基因组是共价闭合环状单链DNA，全长约为2 000 kd^[2]。主要包括3个开放性阅读框（ORF），ORF1编码与病毒复制相关的Rep蛋白，是最保守的区域；ORF2编码Cap蛋白，是病毒的主要结构蛋白，与病毒的感染和免疫有较强的相关性，也是制备疫苗的理想靶抗原；ORF3编码一种非结构蛋白，具有引发感染细胞凋亡的作用。

1.2 流行特征

PCV3可通过多种途径传播，如猪的唾液、鼻腔分泌物、粪便、初乳和公猪精液等，家猪和野猪是其主要宿主，表现出广泛的宿主范围，具有较强的易感性^[3]，各阶段猪均可感染，对育肥猪、后备母猪的危害最为严重，该病毒存在较高的感染率，表明其传播能力强。

2 临床症状及与其他疾病的关联

2.1 临床症状

不同生长阶段的猪只感染猪圆环病毒3型（PCV3）后会产生不同的临床症状，对于仔猪感染PCV3后，可能出现消瘦、腹泻、呼吸困难等症状，部分仔猪还可能出现关节肿胀、腿部肿胀、面部水肿等问题^[4]。严重感染的仔猪可能会在出生后第1周内死亡；育肥猪感染PCV3后，可能出现生长缓慢、饲料转化率降低等问题，部分育肥猪可能会出现发热、鼻涕、咳嗽、皮炎等症状；母猪感染PCV3后，可能出现繁殖障碍，如产死胎、木乃伊胎、流产等。

2.2 与其他疾病的关联

猪圆环病毒3型（PCV3）与其他猪病原的关联性是猪病防控中的一个重要方面。①猪圆环病毒2型（PCV2），PCV3与PCV2在基因组结构上具有相似性，但它们引起的疾病可能有所不同，PCV3可能与PCV2共同感染，导致更严重的临床症状和更高的死亡率；②猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV），PCV3和PRRSV的共同感染可能导致更严重的呼吸系统疾病，加剧猪只的免疫抑制，增加继发感染的风险；③猪流行性腹泻病毒（PEDV），PCV3感染可能加剧PEDV引起的腹泻症状，特别是在仔猪中导致更高的死亡率和更严重的肠道损伤^[5]；④猪细小病毒（PPV），PCV3和PPV的混合感染可能对猪繁殖性能产生负面影响，如流产和死胎；⑤细菌性病原体，PCV3感染可能导致猪只免疫系统受损，增加细菌性感染的风险，如大肠杆菌、沙门氏菌等。

3 规模化猪场猪圆环病毒3型的检疫

3.1 血清学检测

在规模化猪场中，猪圆环病毒3型（PCV3）的检疫是一个重要的环节，用于识别和控制病毒的传播。血清学检测是检疫中常用的方法之一，它通过检测猪血清中针对PCV3的抗体来评估猪只的感染情况。血清学检测基于检测猪血清中是否存在针对PCV3的特异性抗体，如IgG、IgM等^[6]。常用的血清学检测方法是酶联免疫吸附测定（ELISA），可以定量或定性地检测血清中的抗体水平，如有研究^[7]将PCV3 Cap蛋白截去核定位序列（NLS）后对应的dCap基因克隆至pET28-a(+)并转入大肠杆菌BL21(DE3)，得到重组菌后进行蛋白表达。采用镍离子亲和层析纯化dCap蛋白。将纯化的dCap蛋白作为抗原进行包被，建立检测PCV3抗体的间接ELISA的方法，该方法有良好的敏感性和特异性，且与PCV2、CSFV、PRV和PRRSV阳性血清无交叉反应。通常采集猪只的血液样本，分离血清进行检测，根据所选方法的具体操作步骤进行，包括样本稀释、抗体与抗原的结合、洗涤、显色或荧光检测等，结果可以是定量的OD值（ELISA）、荧光强度（IFAT）或特定蛋白条带（Western blot），选择血清学检测可以快速评估大量样本，适合大规模筛查，可以提供猪只免疫状态的信息，有助于制定疫苗接种计划，但不能区分疫苗免疫和自然感染产生的抗体，可能存在交叉反应，导致假阳性结果。

3.2 RT-PCR检测

逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）检测是分子生物学技术，用于检测病毒的核酸。通过逆转录酶将病毒RNA转录为cDNA，然后设计特异性引物针对PCV3的保守区域进行PCR扩增特定的cDNA片段后凝胶电泳，观察特定DNA条带是否出现，以检测病毒的存在，该方法可以检测到非常低水平的病毒核酸，适合早期感染的诊断，特异性强，可以通过设计特异性引物准确区分PCV3和其他病原体，检测速度快，结果可在数小时内得到，有相关研究建立多重荧光定量PCR检测PCV2、PCV3和PCV4，将人工合成目的基因与质粒连接，构建阳性质粒PCV2-ORF2、PCV3-ORF2和PCV4-ORF2^[8]。通过条件优化、敏感性、特异性、重复性试验及临床运用有较好的检测效果，可用于PCV的快速分型检测，为PCV的临床诊断和流行病学调查提供了检测工具。但需要专业的实验室设备和技术，而且样品中的PCR抑制物可能影响结果的准确性。同时，可采用实时定量RT-PCR（qRT-PCR）方法，用于更精确的病毒载量测定。

3.3 基因测序检测

测序检测是重要的分子生物学技术，用于确定病毒的确切基因序列，通过测定PCV3病毒核酸的完整或部分序列来识别病毒的基因型、变异和进化关系，通过PCR后，将PCR产物进行测序，可以是传统的Sanger测序或新一代高通量测序技术，该方法精确度高，能够提供病毒的精确基因序列信息，而且有助于识别病毒的基因型和变异株，也可以用于研究病毒的进化和传播路径，但需要专业的实验室设备和技术，成本相对较高，不适合大规模筛查，而且需要较长的分析时间。而测序检测常与RT-PCR结合使用，先通过RT-PCR确定病毒存在，再通过测序进行详细分析。

4 防控

4.1 加强饲养管理

规模化猪场中加强饲养管理以防控猪圆环病毒3型。首先，要确保猪舍环境清洁卫生，定期清理粪便和污物，控制饲养密度，每头猪应保证有至少1.5 m²的生活空间，避免过度拥挤，降低病毒传播风险；注重饲料的质量和营养均衡，粗蛋白含量应保持在合理范围，如16%~18%，以增强猪只的免疫力。每天的饲料投喂量要精确控制，根据不同生长阶段的猪只体质量进行调整，如保育猪每天可投喂0.5~0.8 kg饲料，增强猪只的免疫力和抵抗力；加强猪只的日常观察，及时发现有异常症状的猪只并进行隔离诊断，防止病情扩散；保证温湿度，猪舍的温度要严格控制，产房温度宜保持在20~23 ℃，保育舍温度18~20 ℃，育肥舍温度16~18 ℃；湿度控制在60%~70%。

4.2 强化生物安全

强化规模化猪场生物安全，建立严格的猪场隔离带，防止外界动物随意进入猪场范围；在猪场入口设置消毒池和消毒通道，对进入人员、车辆等进行全面消毒；对猪只运输车辆进行严格消毒，包括车厢内外的彻底清洗和消毒；加强猪场内部的卫生消毒工作，定期对猪舍、用具、设备等进行消毒，每周至少进行2次，粪便等排泄物要及时清理，每月对猪舍进行1~2次全面消毒，可选用有效的消毒剂，如戊二醛、过氧乙酸等；重视灭鼠、灭蝇、灭虫等工作，减少动物传播病毒的风险^[9]；规范病死猪的处理，采取安全、环保的方式进行无害化处理，如焚烧、深埋等，避免病毒传播；对引种严格把关，隔离时间不少于2周，确保引进的猪只来自健康无疫病的猪场，并进行严格的隔离检疫；定期对猪群进行健康检查和监测，及时掌握猪群的健康状况，以便采取针对性的防控措施。

4.3 科学预防

选择合适的疫苗，制定合理的免疫程序。一般来说，仔猪可在2~3周龄时进行首免，每头注射1 mL，间隔3~4周后进行二免，剂量可适当增加至1.5 mL。母猪可在产前4周进行免疫，每头2 mL，常用的疫苗有猪圆环3型病毒灭活疫苗；定期对猪群进行抗体检测，若抗体阳性率低于70%，则考虑优化免疫方案；定期对猪群进行病毒检测，及时发现和处置疫情；加强对引种猪只的检测，防止引入病源；制定针对猪圆环病毒3型疫情的应急预案，明确责任和措施，确保在疫情发生时能够迅速、有效地进行处理。

5 结语

规模化猪场猪圆环病毒3型的检疫及防控是一个复杂而长期的过程，通过加强饲养管理、强化生物安全、科学免疫等措施，可以有效降低猪圆环病毒3型的感染风险，保障猪场的健康稳定发展。同时，猪圆环病毒3型的研究仍在不断深入，防控措施也需要不断地完善和更新，规模化猪场需要密切关注行业动态和科研进展，及时调整防控策略，保障养殖场的健康发展。

参考文献

[1] 钱平, 刘祥祖. 猪圆环病毒病流行现状、新型疫苗与防控措施[J]. 猪业科学, 2024, 41(4):44-46.

[2] 胡建成. 猪圆环病毒3型的流行病学及致病机制研究进展[J]. 中国猪业, 2023, 18(3): 76-78, 84.

[3] 王一琼. 猪圆环病毒3型的流行和病理特点[J]. 新农业, 2024(1): 54.

[4] 谭映, 姜银菊. 猪圆环病毒病特点及综合防控[J]. 中国畜牧业, 2023(23): 67-68.

[5] 杨玲. 1例猪圆环病毒2型和3型混合感染的诊治[J]. 养殖与饲料, 2023, 22(6): 68-70.

[6] 方勇. 规模化猪场猪圆环病毒3型的检疫及防控[J]. 畜禽业, 2024, 35(2): 79-81.

[7] 谢怡灵. PCV3抗体的间接ELISA检测方法建立及湖南省PCV3流行病学初步调查[D]. 长沙: 湖南农业大学, 2021.

[8] 韩勇, 刘玉洁, 吕桂霞, TaqMan-MGB多重荧光定量PCR检测PCV2、PCV3和PCV4方法的建立和应用[J]. 中国兽医杂志, 2023, 59(8): 29-34.

[9] 王琳琳. 猪圆环病毒病的诊断与预防[J]. 养殖与饲料, 2022, 21(5): 77-79.