2020—2022年贵州玉屏县某规模养殖场生猪乙型脑炎免疫抗体监测

Monitoring immune antibodies against Japanese encephalitis in pigs from a large-scale farm in Yuping County, Guizhou Province from 2020 to 2022

摘要

目的 掌握贵州省玉屏县某规模养殖场猪乙型脑炎的免疫情况，为规模养殖场乙型脑炎防控提供参考。 方法 2020—2022年随机采集已筛除乙型脑炎野毒感染再接种乙型脑炎疫苗猪群的3 960份猪血清样品，采用ELISA抗体检测试剂盒进行乙型脑炎抗体检测。 结果 该场2020—2022年乙型脑炎平均免疫合格率分别为97.20%、98.33%、98.56%，总体免疫合格率为98.03%。第一季度抗体水平较低，平均免疫合格率为96.36%，三季度抗体水平最高，为99.60%；公猪和哺乳母猪抗体水平较高，免疫合格率分别为98.89%、98.26%，妊娠母猪最低，为97.73%。 结论 该猪场乙型脑炎免疫水平整体较好，但存在一定的时间和畜群差异，需加强饲养管理和免疫监测等工作。

关键词

乙型脑炎 / 检测 / 公猪 / 母猪 / 抗体水平

Key words

Japanese encephalitis (JE) / detection / boars / sows / the level of antibody

乙型脑炎（Japanese encephalitis，JE）简称乙脑，是由乙型脑炎病毒（Japanese encephalitis virus，JEV）感染引起的一种人兽共患传染病，JEV主要的传播媒介为三带喙库蚊，长期宿主为鸟类和蝙蝠^[1]。JEV可感染多种动物和人类，其中猪、马及人类会出现明显症状，其他动物症状不明显。JEV感染可引起妊娠母猪流产、死胎、木乃伊胎；公猪出现睾丸炎和附睾炎等症状，影响公猪性能；仔猪以四肢不协调等神经症状为主，对养猪业危害极大^[2-3]。青少年和儿童阶段易感染IEV，可引发严重的中枢神经系统疾病甚至急性致死性脑炎，发病率和病死率较高，约30%的患者治愈后会有后遗症^[4]。

贵州省是乙型脑炎的高发地区，自2004年实施乙型脑炎免疫以来，发病率有所下降，但仍比全国发病水平高^[5]。JE有明显的季节性和地域性，经蚊虫传播，主要在亚洲和太平洋地区流行。每年7—9月发病率最高，此时蚊类大量滋生，加之猪感染后病毒血症时间较长，血液中JEV含量较高，且猪在JEV的传播过程中起贮存和增殖作用，使JEV容易通过“猪-蚊-猪”的途径进行循环传播^[6-7]。

目前，尚无治疗JE的特效方法，疫苗免疫仍是预防JE的主要方式之一。一般选择在JE流行季节前对生猪进行免疫，以此预防乙脑的流行，降低生猪的带毒率。本试验对2020—2022年贵州省玉屏县某规模养殖场猪乙型脑炎免疫抗体进行监测，以期为预防和控制乙型脑炎提供参考。

1 材料与方法

1.1 血清样品

2020—2022年随机采集已筛除乙型脑炎野毒感染再接种乙型脑炎疫苗猪群的3 960份血液（玉屏温氏畜牧有限公司），待静置析出血清，－20 ℃保存备用。

1.2 主要试剂

猪乙型脑炎病毒ELISA抗体检测试剂盒（武汉科前生物股份有限公司）。

1.3 主要仪器

台式离心机（上海安亭科学仪器厂）、恒温箱（上海申贤恒温设备厂）和酶标仪（北京普朗新技术有限公司）。

1.4 免疫抗体检测

按照试剂盒说明书进行操作。试验成立条件：阳性对照平均Ｄ_{630 nm}≥0.5，阴性对照平均Ｄ_{630 nm}＜0.3。S为样品Ｄ_{630 nm}值，P为阳性对照Ｄ_{630 nm}值，S/P值≥0.21，样品判为阳性；S/P值＜0.21，样品判为阴性。

2 结果与分析

2.1 不同季度JEV抗体检测结果

按一季度（1—3月）、二季度（4—6月）、三季度（7—9月）和四季度（10—12月）对乙型脑炎病毒免疫抗体进行监测。结果显示（表1）：一季度免疫抗体水平最低，平均抗体合格率为96.36%，一、二、三季度免疫抗体合格率呈上升趋势，四季度免疫抗体合格率有所下降，三季度免疫抗体合格率较一、二、四季度分别高3.24、2.23、0.81百分点。

2.2 不同猪群JEV抗体检测结果

对不同猪群3 960份血清样品进行乙型脑炎病毒免疫抗体检测。结果显示（表2）：该规模猪场猪群乙型脑炎免疫水平整体较好，免疫抗体合格率为98.03%。送检血清中公猪免疫抗体水平最高，抗体合格率达98.89%，其次是哺乳母猪，为98.26%，而妊娠母猪最低，为97.73%。

3 讨论

3.1 免疫水平

从2020—2022年不同季度的JEV血清学监测结果发现，第一季度免疫抗体水平最低，第一、二、三季度乙型脑炎免疫抗体水平呈上升趋势，且在第三季度达到最高，这可能与该猪场3月份进行了乙型脑炎免疫有关，且因夏季是乙型脑炎的流行季节，再次感染几率较大，病毒感染后产生的抗体水平也随之升高，这一结果与杨克礼等^[8]报道的结果基本相符。在该规模养猪场的3 960份猪血清样品的乙型脑炎抗体检测中，免疫抗体阳性数为3 882份，免疫抗体合格率为98.02%，整体免疫抗体水平较高。在对不同猪群血清抗体检测中，公猪、哺乳母猪、妊娠母猪的免疫抗体合格率分别为98.89%、98.26%、97.73%，说明种猪群乙型脑炎免疫效果良好，而公猪免疫抗体合格率最高，这可能与检测样本量小有一定的关系。2020—2022年猪场免疫抗体合格率逐年增高，这可能与该猪场开展疫病净化、进一步规范猪场管理有关。

3.2 防控策略

据报道^[9]，乙型脑炎疫苗接种覆盖率达87%左右，会显著影响乙脑发病率，但由于乙型脑炎是由三带喙库蚊等蚊虫传播的人兽共患病，没有接种或没有产生乙型脑炎抗体的猪群仍有发病的风险，要有效控制乙型脑炎的发生与传播，应坚持以疫苗预防为主，并做好综合性预防等措施。

1）加强饲养管理。积极推进规模猪场动物疫病净化和无规定小区建设，采取封闭饲养、全进全出等饲养管理制度。限制外部人员拜访次数，严格控制本场人员外出频率，严格遵守进出场相关操作规定。及时完善消毒通道、出猪间（台）等防疫设施设备清洗消毒，严格执行消毒隔离程序，减少病原传入途径，预防病原传入。引种场的数量要尽可能单一，在引种前仔细评估猪群的健康状态，引种后进行有效隔离，在隔离期密切关注猪群的健康状态，并做好疫病监测工作，确认健康后再混群饲养。

2）加强传播媒介管理。JE主要经蚊虫传播，且具有明显的季节性传播，开展驱虫灭蚊是控制乙脑流行的重要措施，因此养殖场需要做好防虫灭蚊，各猪舍应安装纱网，在猪舍及周边区域喷洒驱蚊剂，注意在蚊虫大量繁殖的夏秋季节，应在各猪舍安装灭蚊灯，并对养殖场周边低洼积水地带使用杀虫剂进行全面喷洒^[10-11]。

3）加强环境卫生管理。JEV暴露在外界环境中抵抗能力较弱，高温、酸性、碱性环境均易使其灭活，养殖场可采用2%火碱、5%来苏溶液对圈舍进行消毒，做好通风换气，每天清扫猪舍卫生，保持猪舍干净，并注意营养均衡，提高猪群免疫力，有效降低生猪疾病发生率。养殖管理用具可用2%～3%氢氧化钠溶液、3%～5%苯酚溶液、70%～75%医用乙醇进行消毒^[12]。对病死猪要及时按照相关规定进行无害化处理，同时对被病死猪污染的环境进行消毒，注意消毒药交替使用，严禁随意处理病死猪，避免病原扩大传播。

4）加强免疫监测。目前，疫苗免疫仍是预防该病的主要方法，需根据JE流行情况和养殖场实际情况制定免疫计划，并按时接种疫苗，需要注意的是猪群初次免疫应该在乙脑流行季节前1～2个月^[13]。免疫接种后，要及时开展免疫抗体效果监测，并根据监测情况及时对免疫效果不理想的猪群进行第2次免疫接种。为保障后备母猪、妊娠母猪和种公猪的免疫效果，可选择在第1年接种2次弱毒疫苗，为保证接种效果第2次接种时间间隔14 d左右，可有效增强猪群对乙型脑炎的免疫力^[14]。防疫人员、技术人员、驻场兽医师、实验室人员等接触病畜或污染物时，需按相关要求穿戴防护装备，做好个人防护，并对使用后的防护装备进行清洗消毒，一次性物品做好无害化处理。

5）加强宣传教育。应积极地开展宣教工作，指导养殖场（户）相关人员形成正确的防疫意识。一方面，加强乙型脑炎防控宣传工作，向养殖场（户）、农户发放乙脑防控技术宣传单、排查手册等宣传资料。对规模养猪场、散养户等防控重点环节开展多次督查及技术指导，帮助养殖户、农户了解乙型脑炎临床症状和危害；另一方面，加强防疫人员及养殖场（户）的培训，开展乙型脑炎防控及应急技术培训，强化乙型脑炎相关知识及防控能力，提升防疫人员的综合能力水平，如果发现猪不明原因患病或者死亡的情况，要立即向当地畜牧兽医相关部门上报。一旦发生疫情，划定疫点疫区，并限制疫区内的猪只调运，紧急隔离未发病猪群，对未发病猪群进行紧急免疫，对患病猪采取扑杀并进行无害化处理，猪场、污染场所、用具用品等也需采取消毒处理，防止乙型脑炎疫情扩散。

参考文献

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