犊牛大肠杆菌病的诊断与防治

摘要

牛大肠杆菌病是一种由致病性大肠杆菌感染引起的急性传染病，多发于犊牛，根据疾病表现不同，临床分为败血型、中毒型和肠炎型3种，均会导致病牛出现严重的临床症状，造成较为严重的经济损失。该病多因饲养管理方式不当而使牛群感染致病性大肠杆菌，并在肠道中大量繁殖及产生毒素，从而引起发病。落实对妊娠母牛接种疫苗能最大程度降低犊牛感染率，同时加强对妊娠母牛和新生犊牛的饲养管理，并保持良好的饲养环境，必要时进行药物预防，可有效预防犊牛大肠杆菌病的发生；治疗以抗菌消炎为原则，同时辅助补液、增强机体抵抗力可显著缩短病程，抗菌药物以筛选高效敏感药物为最佳。

关键词

犊牛 / 大肠杆菌病 / 诊断 / 敏感药物 / 防治

犊牛大肠杆菌病以败血症、严重腹泻、脱水为主要临床特征，可导致犊牛发育不良或大量死亡，严重影响养殖经济效益。大肠杆菌在动物肠道内也大量存在，其中一部分具有条件性致病的发病特点，当犊牛肠道菌群环境处于稳态时，则其保持正常状态，而当犊牛处于饲养环境较差、营养调控不当、受到各种应激刺激等不良饲养因素下，引起肠道菌群内环境发生紊乱，导致致病性大肠杆菌在肠道内大量繁殖并产生毒素^[1]，从而诱发大肠杆菌病。

犊牛大肠杆菌病既可通过消化道感染，又可以经子宫和脐带感染，多见于10日龄内犊牛，特别是1～3日龄的犊牛最易感^[2]，10日龄以上的犊牛极少发生该病，其发生并没有明显的季节性，但以寒冷秋冬或早春时节发病率较高，且主要呈地方流行性或散发性。临床极易混合或继发性感染其他病原微生物，导致临床诊治难度增加，使得犊牛死亡率升高，在养殖环境恶劣的养牛场，大肠杆菌病因传染性较强可呈现小范围流行，严重影响犊牛的正常生长发育。本案例对辖区内某养牛场发生的1例犊牛大肠杆菌病进行诊断，并采取了中西医联合防治措施，取得了良好的临床效果。

1 发病情况

2022年1月，贵州省德江县某肉牛养殖场突然暴发了以新生犊牛严重腹泻为主要临床症状的疾病，患牛起初主要表现为精神沉郁、食欲废绝，随后出现黄色水样状腹泻，且均为3~10日龄犊牛，发病率达40%，其中1头患牛在发病后3 d发生死亡，且其将尸体进行掩埋。经了解得知，该养殖户在日常养殖过程中按照科学免疫程序对肉牛进行牛瘟、口蹄疫、布鲁氏杆菌病等基础性重大疾病的疫苗免疫，且养殖场近几年并未发生重大疫情。同时，出现发病情况后，养殖户使用青霉素、安乃近等抗生素类药物进行了治疗，但临床治疗效果并不理想。

2 病因分析

该病主要是由于饲养环境卫生较差和饲养管理方式不当而引起，观察饲养环境发现该养殖场整体环境较为干净，养殖设备较为完善，并未存在粪便堆积、污水横流的脏乱现象，且定期实施消毒措施，初步排除饲养环境卫生的问题。经询问观察得知，发病犊牛的生产母牛均年龄较大，生产之后存在泌乳量不足的问题，养殖户结合饲喂奶粉的措施为其补充营养成分，且部分犊牛在出生后未能保证其吮吸足量的母乳，导致犊牛机体免疫抵抗力较差，同时在寒冷环境下产房保温措施未能做到位，导致产房环境温度较低，从而诱发犊牛发生大肠杆菌病。

3 临床症状

根据患牛临床症状表现不同，可分为败血型、中毒型和肠炎型3种^[3]。经分析得知此案例中出现败血型和肠炎型2种病例，并未出现中毒型案例。败血型患牛体温突然升高至40 ℃以上，且在进行人工喂奶时出现吮吸能力下降而无法正常吮奶，排出淡黄色或灰白色粥样粪便，散发腥臭味，且常于病后1~3 d内发生死亡。肠炎型多发生于3~10日龄的犊牛，体温升高至40 ℃，精神不振，食欲减退，常卧地不起，然后发生腹泻，初期粪便呈淡黄色粥样状，后期粪便呈灰白色水样状，且夹杂着未消化完全的凝乳块或血液和泡沫^[4]，病程持续时间较长则出现严重的脱水现象。

4 剖检变化

解剖败血型病死患牛发现其内脏器官未发生明显病变，若肠炎型患牛病症较重而发生死亡，其胃肠道出现明显的病理变化，胃肠黏膜发生肿大、充血或出血，肠系膜淋巴结肿大并出现不同程度地充血，小肠呈现明显的急性卡他性炎症。

5 诊断

5.1 细菌分离培养

收集患牛腹泻样本并在无菌环境下接种于普通琼脂培养基和麦康凯琼脂培养基上，37 ℃恒温培养箱中培养24 h后可发现2种培养基上均生长出良好菌落。麦康凯培养基上生长出凸起湿润、边缘整齐的粉红色圆形菌落^[5]，普通琼脂培养基上长出圆形菌落，且其边缘整齐光滑、呈非透明黄乳白色（图1）。

5.2 革兰氏染色镜检

挑取单个菌落进行涂片和革兰氏染色后进行镜检，显微镜下可观察到长短不一、两端钝圆的杆状革兰氏阴性粉红色菌体（图2）。

5.3 生化试验

将分离菌株接种于生化常规微量鉴定管中，37 ℃恒温箱中培养24~48 h，结果显示：葡萄糖、乳糖、氰化钾、硫化氢、甘露醇及蛋白胨水试验结果为阳性，其余试验结果为阴性，符合大肠杆菌的生化特性（表1）。

5.4 PCR鉴定

挑取单个菌落并使用16S rRNA通用型鉴定引物进行PCR扩增和琼脂糖凝胶电泳。结果表明（图3），PCR扩增片段与预期片段大小一致，进一步确定该养殖场犊牛因感染大肠杆菌而发病。

6 药敏试验

选择14种常用药物的药敏纸片进行药敏试验，结果（表2）表明，该养殖场分离的大肠杆菌对头孢噻肟、庆大霉素、阿米卡星、多黏菌素较为敏感，可以作为后续治疗参考药物。

7 防治方法

7.1 紧急隔离并消毒

首先将患病犊牛及时进行隔离，然后及时清扫犊牛所在产房，保持地面清洁干燥，并立即采取消毒措施，以防止病原菌进一步扩散。最后清理地面后，使用2% NaOH溶液或10%石灰乳消毒地面，使用过氧乙酸或过硫酸氢钾复合物粉进行200倍稀释后进行带牛喷洒消毒，料槽等饲喂用具使用过氧乙酸或葵甲溴铵等消毒剂等进行喷雾或浸泡消毒，交替使用消毒剂，每天消毒1~2次。

7.2 控制产房环境温度

首先适当增加犊牛保温灯数量，然后牛舍迎风面改用帆布进行遮挡、适当将垫草增厚，并在每天消毒后封闭1~2 h再打开窗户进行定时适量通风，最后养殖人员应时刻监测产房温度，将其温度维持在（14±2） ℃。

7.3 中西医结合治疗

该病主要是由于细菌感染而导致机体发生炎症反应，从而产生以腹泻为主的临床症状，采用中西医结合治疗的方式可达到标本兼治的作用，因此在治疗时，西医应遵循抗菌消炎、及时止泻、缓解脱水、调理胃肠道功能的原则，中医则以涩肠止泻、健脾燥湿、益气补血为治疗原则。

在抗菌消炎方面，可根据药敏结果选择肌肉注射1 mg/kg硫酸头孢喹肟+2 mg/kg庆大霉素注射液，1次/d，连续用药3~5 d，同时每间隔6 h肌肉注射2~4 mL头硫酸小檗碱^[6]，连续用药2 d；在止泻并修复肠黏膜方面，选择内服5 g/头次硝酸铋+15 g/头活性炭，每天早晚各1次，连续用药3~5 d；在缓解脱水症状方面，选择静脉注射500~2 000 mL 5%葡萄糖生理盐水+100~150 mL 5%碳酸氢钠注射液+10 mL维生素B₁₂注射液+10 mL 10%维生素C注射液进行有效补液和增强机体抵抗力，1次/d，连续用药3 d；在调节胃肠道功能方面，选择在病情好转后口服益生菌制品，连续投喂5~7 d，可有效稳定肠道微生态环境。

本次采用白头翁20 g，诃子、陈皮、苍术、神曲、黄芪、泽泻、茯苓各10 g，金银花、厚朴各8 g，黄连、当归、甘草、青皮、赤芍、郁金、党参、木香各5 g组成的中药方剂，加水煎煮灌服，2次/d，连续灌服3~5 d。

7.4 加强妊娠母牛饲养管理

对妊娠母牛加强饲养管理可有效降低犊牛大肠杆菌病的发生：①应首先保证妊娠母牛摄取足够的营养成分，加强其补饲工作，合理搭配日粮结构，注重合理适当的精粗饲料比例、蛋白质能量比例、矿物质和维生素含量，为其提供全价营养；②落实疫苗免疫接种工作，根据养殖所在地区大肠杆菌病流行情况，制定免疫接种方案，可选择大肠杆菌K99疫苗或灭活疫苗在产前5~10周进行接种^[7]，从而使犊牛通过吮乳途径获得较强的母源抗体；③保持妊娠母牛在产后乳房的清洁，在哺乳前可选择温水和消毒剂对母牛乳房进行清洗和擦拭处理，清除乳房周围的污秽物和病原菌。

7.5 加强新生犊牛护理工作

妊娠母牛在分娩时应注重犊牛的接产工作，犊牛出生后及时用消毒后的干净毛巾擦干全身，并清除干净其口鼻内的黏液，断脐使用的剪刀必须经过消毒处理，距腹部5~6 cm处断脐^[8]，且断口处使用5%~10%碘酊进行涂抹消毒。保证犊牛在出生后尽早吮吸初乳，最晚应不超过6 h，且摄入初乳量应足够，保证犊牛吸收足量的免疫球蛋白，获得较高的被动免疫抗体，从而提高机体抵抗力，同时应做好产房的环境卫生、严格消毒、防寒保暖等基础性护理工作。

8 结语

犊牛大肠杆菌病作为一种急性传染病，对犊牛的危害巨大，且经常与其他疾病发生混合感染，从而造成严重的养殖经济损失。该病多由于临床饲养管理方式不当而诱发，预防该病的关键在于保持良好饲养环境的同时加强对妊娠母牛和新生犊牛的饲养管理，做到及时发现病例，及时进行针对性治疗，可实现犊牛大肠杆菌病的有效防治。

参考文献

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