牛结核病是由结核分枝杆菌引起的一种慢性传染病
[1]，不仅给养殖业带来巨大的经济损失，更因其人兽共患的特性，还对人类健康构成潜在威胁。随着全球畜牧业的不断发展和人们对食品安全、公共卫生的日益关注，牛结核病的诊断与预防工作显得尤为重要。准确、及时的诊断是有效防控牛结核病的前提，只有明确了疾病的感染程度，才能采取针对性的防控措施。本文围绕牛结核病的诊断方法和预防控制策略展开深入探讨，旨在为牛结核病的科学防控提供参考。
1 流行病学
1.1 病 原
分枝杆菌属于分枝杆菌科，其成员包含牛分枝杆菌、禽分枝杆菌以及结核分枝杆菌
[2]。其中，牛分枝杆菌是最常见的传播源，它不仅会对人造成伤害，而且还会影响50多种温血脊椎哺乳动物（如猪、鹿、大象等）及20多种禽类，甚至会威胁到人们的生命安全。据报道
[3]，每年因牛分枝杆菌而患上结核病的患者数量高达5%~10%。牛分枝杆菌属于革兰氏阳性菌，具有棒状的特征，无法产生芽孢或荚膜，无法移动。一般使用妻-尼氏抗酸染色法进行染色，而使用其他染色技术着色则比较困难。要想获得牛分枝杆菌，需要将其放置于37.5 ℃的环境中，且pH值介于5.9~6.9，这样才可以使它们迅速成长。牛分枝杆菌具备丰富的类脂及蜡脂成分，从而使其具备极高的耐受性，即使处于极端的环境，如干旱条件，它们仍可以保持10个月的生命周期。即使是受损的细胞仍可以保持2~7个月的生命周期。此外，它们还可以在粪便、土壤等污染源中生长。牛分枝杆菌是一种有毒细菌，它的存在对人体的健康构成威胁。通过巴氏消毒，需要60 ℃和0.5 h的热处理，几个小时后便会使其消失
[4]。
1.2 流行特征
结核病的主要传染源是结核病牛，特别是开放性结核——肺结核的传播更为严重。结核病菌可通过患牛呼出的气溶胶、口腔唾液、咳嗽的黏稠物、奶、粪、尿、精液等传播，还可能会通过受污染的食品、水、空气传播。结核杆菌有多种不同的传播渠道，主要以消化道和呼吸道为主
[5]，飞沫传播、媒介传播最为常见。此外，通过交配活动也可感染。牛结核病最易感者以奶牛为主，再者是水牛、黄牛和牦牛。此外，人类也可能受到影响，经常与患有结核病牛接触的人员（例如兽医人员、检疫、检测人员、挤奶工、饲养人员等）容易被感染此病。
2 临床症状及病理变化
2.1 临床症状
结核病的传播速度各异，通常在10~45 d，但在某些情况下，它的传播速度甚至会延缓数月甚至数年。在临床实践中，结核病通常表现出缓解的特征。结核病的类型很多，最常见的4种是肺结核
[6]、乳房结核、肠结核、淋巴结核等症状。
肺结核初期症状较轻微，可能表现为咳嗽，多为干咳，随着病情发展，咳嗽加重且频繁，有时为湿咳。病牛逐渐消瘦，体况变差，被毛粗乱无光，呼吸频率加快，严重时出现呼吸困难，尤其在运动或劳累后更为明显。乳房结核，当牛感染该病，乳房淋巴结肿大，触摸可感觉到硬结。泌乳量下降，乳汁发生变化，可能变稀薄，有时会出现凝乳块，而且会导致患处的乳房萎缩，使它们的乳头变形，并且位置也会发生改变。肠结核多发生在犊牛身上，它的症状包括：消化道功能障碍、食欲下降、易疲劳，腹泻和便秘交替发生。随着疾病的进一步恶化，会产生难以治愈的持续性腹泻，进一步波及其他内脏，如肝、肠，通过直肠检查可以做出诊断。
淋巴结核通常发生在身体的各个部位，如肩膀、股前、腹股沟、下颌、咽和颈部淋巴结，表现为局部肿胀变形，有时会破裂，形成不易愈合的溃疡面。还包括其他结核，生殖结核偶有发生、胸膜结核和脑结核不多见。生殖结核主要使牛的性功能受到严重影响，导致它们的繁殖力下降。例如，母牛发情频繁，导致流产，阴道和子宫中流出脓性分泌物。公牛的附睾和睾丸会变得肿胀，并且会有结节形成或发生糜烂。
2.2 病理变化
患病牛常见肺脏病理变化，可见大小不一的结节，初期结节呈灰白色半透明状，质地坚实，突出于肺表面。随着病情发展，结节中心会发生干酪样坏死，颜色逐渐变黄，质地变松软，类似豆腐渣样。周围肺组织常伴有炎症反应，呈现充血、水肿，肺泡间隔增厚等表现，肺组织质地变硬，弹性降低，切面可见多个散在的结节和空洞，严重时可导致肺脏的正常组织结构和功能被破坏。乳房病理变化，乳房组织中有大小不等的结节形成，结节多为局限性，初期结节界限清晰，呈灰白色，质地硬实；之后结节中心逐渐发生干酪样坏死，触感变软，有时可见乳汁呈黄色脓性，有干酪样凝块。乳腺小叶间结缔组织增生，使乳房质地变硬，弹性降低，病变严重的乳房体积缩小，变形，乳腺组织的分泌功能受到严重影响。胸膜病理变化，胸膜上出现大量的纤维素渗出，初期呈灰白色的絮状，使胸膜表面变得粗糙，失去原有的光滑性，在胸膜上也可见散在的结核结节，结节中心发生干酪样坏死，有的可融合形成较大的坏死灶，胸膜腔内可有少量淡黄色的渗出液积聚，内含淋巴细胞、纤维素等成分，长期的胸膜炎可引发慢性呼吸困难和胸痛等症状，降低病牛的生活质量和生产性能。
3 诊断方法
3.1 临床诊断
该疾病通常是缓慢的，而且没有明显的特征，因此很难判断。如果发现动物逐渐消瘦、咳嗽、肺部检查变化异常、皮下淋巴结有慢性肿大，就可能是这种疾病发生的早期信号。然而，由于这种疾病的特征和它的主要部位是密切相关的，并且它的症状也和许多其他疾病类似，因此需要鉴别区分
[7]。要想确诊，通过实验室检测是必不可少的。主要的检测方法通常包括结核菌素试验、ELISA法、γ-干扰素检测、聚合酶链式反应（PCR）等技术。
3.2 实验室诊断
1）结核菌素试验。目前应用最广泛的诊断方法之一。将结核菌素注射到牛的皮内，一定时间后观察注射部位的反应。如果出现局部肿胀、硬结等反应，则提示可能感染了结核病。但该方法存在一定的假阳性和假阴性，例如与其他分枝杆菌存在交叉反应可能导致假阳性，而在感染早期或免疫功能低下时可能出现假阴性。
2）免疫学诊断法。除了结核菌素试验外，ELISA法、γ-干扰素检测、免疫胶体金诊断是目前最常见的检测牛结核病的免疫学手段
[8]。其中，ELISA法的灵敏度高、特异性强，免疫胶体金法简便快捷，试验结果易保存，不需要特别精密的仪器设备，通常将这2种方法结合作为诊断依据。γ-干扰素检测操作比较繁琐，需要对采集的血液样品进行培养—致敏，才能进行下一步试验，需要的时间比较长，在兽医实验室可以推广应用。
3）分子生物学诊断法。随着科学技术的飞速发展，PCR技术已经被广泛用于牛结核病的诊断，聚合酶链反应（PCR）技术可以快速、准确地检测出结核分枝杆菌的核酸，具有较高的敏感性和特异性，基于核酸序列分析的方法，如基因芯片技术等，可以同时检测多种病原体，可以准确地检测出结核分枝杆菌和非典型结核分枝杆菌。随着核酸探针、噬菌体测定和菌体成分检测技术的不断进步，分子生物学在结核病诊断中将会发挥越来越重要的作用，从而为临床提供更加准确可靠的结果。
4 防控措施
4.1 加强饲养管理
选择优质的粗饲料，如青贮料、干草等，可为牛提供丰富的纤维素，促进胃肠蠕动，维持消化系统的正常功能。搭配合理的精饲料，精饲料应根据牛的不同生长阶段和生产需求进行科学配比，例如，对于生长育肥牛，可适当提高蛋白质和能量的比例；对于泌乳牛，则需增加钙、磷等矿物质和维生素的含量，以满足其产奶的营养需求
[9]。制定科学的饲喂计划，每天按照固定的时间和数量进行饲喂，使牛形成良好的采食习惯，有助于提高饲料的消化吸收率。一般情况下，成年牛每天可分2~3次饲喂，犊牛可适当增加饲喂次数。牛床应舒适、干燥，可采用垫草或橡胶垫等材料，减少牛的肢蹄疾病发生。牛舍内的湿度应保持在适宜的范围内，一般为50%~70%。过高的湿度容易导致细菌和霉菌滋生，增加牛患病的风险。
4.2 严格卫生防疫措施
制定养殖场消毒制度，确定消毒范围：包括牛舍、运动场、饲料储存区、兽医室、办公区等所有与牛养殖相关的区域。根据不同的消毒对象和目的，选择高效、低毒、无残留的消毒剂。常见的消毒剂有氢氧化钠、过氧乙酸、戊二醛、碘伏等。每天清扫牛舍，清除粪便、杂物等污染物，定期用消毒剂对牛舍地面、墙壁、栏杆等进行喷雾消毒，每周至少2~3次，对牛床可采用火焰消毒或撒生石灰等方法进行消毒。新引进的牛只在进入养殖场前，采用喷雾消毒、药浴等方法，对牛只全身进行消毒。养殖场发生牛结核病或其他传染病时，应立即采取紧急消毒措施
[10]。对发病牛所在的牛舍、运动场等进行全面消毒，每天至少1次，直至疫情得到控制，定期对养殖场周围的环境进行消毒，如道路、水沟、垃圾堆放区等，防止病原体的传播。工作期间，严格遵守养殖场的卫生防疫制度，不得随意接触牛只以外的动物，不得将外来物品带入养殖场。
4.3 疫苗接种
目前用于牛结核病预防的疫苗主要有卡介苗（BCG）等。卡介苗是一种减毒活疫苗，在预防牛结核病方面有一定的作用。它可以刺激机体产生免疫反应，增强牛对结核分枝杆菌的抵抗力。卡介苗的优点是使用较为广泛，成本相对较低，并且在一定程度上能够降低牛结核病的发病率。接种后要对牛进行观察，一般观察24~48 h，观察牛的食欲、精神状态、体温等是否正常。保持牛舍的清洁卫生，提供充足的饮水和优质的饲料，增强牛的免疫力。记录疫苗的接种信息，包括疫苗名称、生产厂家、批号、接种日期、接种剂量、接种牛只数量等，以便追溯和管理。
4.4 监测与检疫
根据养殖场的规模、养殖密度、周边疫情情况等因素，制定合理的监测频率。一般来说，大型养殖场可以每季度进行1次监测，中小养殖场可以每半年进行1次。对于疫情高风险地区的养殖场，应适当增加监测频率。采用多种监测方法相结合，提高监测的准确性。包括临床检查、实验室检测等。对每次监测结果进行详细记录，包括监测时间、监测方法、监测对象、检测结果等信息。在牛只出售、运输或转移前，必须进行产地检疫。产地检疫由当地动物卫生监督机构负责，检疫内容包括临床检查、实验室检测等。经检疫合格的牛只，出具动物检疫合格证明；不合格的牛只按照规定进行处理。在牛只运输过程中，要加强运输检疫。到达目的地后，及时向当地动物卫生监督机构申报检疫，经检疫合格后方可入场。在牛只屠宰前，必须进行屠宰检疫。屠宰检疫由定点屠宰场的动物卫生监督人员负责，检疫内容包括临床检查、实验室检测等。经检疫合格的牛只，方可进行屠宰；不合格的牛只，按照规定进行处理。
4.5 阳性牛的处理
一旦发现阳性牛只，应立即进行隔离。隔离场所应远离其他牛群，通风良好，卫生条件良好。隔离期间，要对阳性牛只进行密切观察，记录其临床症状和病情变化。目前，牛结核病尚无特效治疗药物。对于阳性牛只以及同群中检测为阳性的牛只，应及时进行扑杀
[11]。扑杀应在动物卫生监督机构的监督下进行，扑杀后的牛只应进行无害化处理。常用的无害化处理方法有焚烧、深埋、化制等。当养殖场发生牛结核病疫情时，应立即向当地动物卫生监督机构报告，并按照规定采取封锁措施。封锁范围包括发病养殖场、周边一定范围内的养殖场和交易市场等。封锁期间，禁止牛只出入封锁区域，对封锁区域内的牛只进行全面监测和排查。在疫情得到有效控制后，经动物卫生监督机构评估合格，可以解除封锁。解除封锁的条件包括：疫情发生后经过一定的潜伏期无新发病例；对所有牛只进行了全面监测和排查，未发现阳性牛只；对封锁区域进行了彻底消毒。
5 结 语
牛结核病作为一种严重的人兽共患传染病，给畜牧业发展和公共卫生安全带来了巨大挑战。通过对牛结核病的诊断方法和预防控制策略的深入探讨，深刻认识到准确诊断是有效控制疾病的前提，而全面的预防控制措施是遏制其传播的关键。在诊断方面，临床诊断结合实验室诊断和分子生物学诊断技术，能够提高诊断的准确性和及时性，为疾病的早期发现和治疗提供有力支持。在预防控制方面，加强饲养管理、严格卫生防疫措施、科学进行疫苗接种以及实施有效的监测与检疫，能够最大程度地降低牛结核病的发生风险，保障畜牧业健康发展和公共卫生安全。
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