基于工程菌EcN表达抗菌免疫肽Scy及其应用

Expression of the antimicrobial immunopeptide Scy based on the engineered bacteria EcN and its application

摘要

目的 利用大肠杆菌Nissle 1917（EcN）表达抗菌免疫肽Scygonadin（Scy），并评估EcN-Scy缓解结肠炎的作用，为研发新型抗生素替代品提供理论依据。 方法 用PCR扩增载体pnirBMisl（pnir）与抗菌免疫肽Scy目的基因，通过同源重组获得重组载体EcN-Scy。选用20只8周龄雌性BALB/c小鼠，平均分为4组（对照组、DSS组、DSS+EcN组和DSS+EcN-Scy组），每2 d分别灌胃小鼠PBS、EcN菌液或EcN-Scy菌液并记录其体质量，试验期14 d。其中除对照组外，其他3组第0~7天通过在饮水中添加3% DSS诱导结肠炎。第14天麻醉后处死小鼠并采集血清和结肠组织样本进行检测。 结果 与DSS组相比，EcN-Scy处理显著缓解了小鼠体质量下降（P<0.05）和由DSS引起的结肠缩短的症状（P<0.05），明显改善了结肠绒毛结构。与DSS组相比，DSS+EcN-Scy组血清中ALP和Urea水平分别显著升高28.6 U/L、1.35 mol/L（P<0.05）；TBil和LDH水平有降低趋势（P>0.05）。与DSS组相比，DSS+EcN-Scy组血清中的促炎因子TNF-α、MCP1和IL-1β水平分别显著降低18.9%、50.9%和8.9%（P<0.05），结肠中MCP1和IL-6分别降低了40.4%和21.9%（P<0.05）。 结论 成功利用工程菌EcN表达抗菌免疫肽Scy，具有显著缓解小鼠结肠炎的效果，能够改善DSS诱导的小鼠体质量下降、结肠缩短及形态破损，并降低血清和结肠炎症因子水平。

关键词

大肠杆菌Nissle 1917 / 抗菌免疫肽Scy / 重组表达 / 结肠炎 / 抗生素替代品研发

Key words

Escherichia coli Nissle 1917 (EcN) / antimicrobial immune peptide Scygonadin (Scy) / recombinant expression / colitis / research and development of substitutes for antibiotic

基金资助

国家重点研发计划(2023YFD1301101)

国家生猪产业体系(CARS-35)

浙江“领雁”研发攻关计划(2024C02004)

山东泰山产业领军人才工程