鸡坏死性肠炎的发病原因与防治

摘要

鸡坏死性肠炎是对养鸡场危害严重的1种细菌性肠道疾病。本病临床特征主要表现为病鸡食欲减退、腹泻，严重时可排出带有恶臭的红色或黑褐色稀便，并导致高死亡率。实验室诊断可通过细菌分离培养、生化鉴定等方法进行确诊。在防治方面，可采用敏感抗菌药物或中草药方剂进行治疗。本文全面概述了鸡坏死性肠炎的病原学、临床症状、诊断方法及防控措施，以期为养殖场提供科学参考，降低该病的经济损失。

关键词

鸡坏死性肠炎 / 产气荚膜梭菌 / 流行病学 / 病理变化 / 诊断方法 / 防治措施

鸡坏死性肠炎（necrotic enteritis, NE）是1种由产气荚膜梭菌（Clostridium perfringens）引起的细菌性肠道疾病，对养鸡业造成严重危害。鸡坏死性肠炎严重危害家禽养殖业的健康发展，近年发病率在全球范围内呈升高趋势，其造成的经济损失每年将近60亿美元^[1]。鸡坏死性肠炎临床症状为发病鸡群生长迟缓、死亡率增加，还会出现亚临床状态^[2]，导致鸡肠道微生物的失调和饲料的转化率下降^[3]，但不会引起明显的症状和死亡，而这种形式造成的经济损失更为严重。随着集约化养殖模式的推广和养殖业抗生素使用限制的升级，需要通过在日常养殖过程中提升饲养水平和加强生物安全措施等做好对鸡坏死性肠炎的防控，避免发生疾病造成经济损失。本文综述鸡坏死性肠炎的发病原因及防控措施，旨在为养殖场提供科学的防控指导，促进家禽养殖业的健康发展。

1 病原简介

鸡坏死性肠炎的病原是产气荚膜梭菌，1种厌氧菌，属于梭菌属，革兰氏染色后呈阳性，菌体两端钝圆的大杆菌，不生有鞭毛，导致其不能运动，生长速度快。产气荚膜梭菌能够在不同的环境中长期存活，对环境适应能力强，尤其是在温暖潮湿的土壤、生活和养殖污水以及饲料中存在，在死亡病鸡的肠道中也可以长期存活，且具有感染性。产气荚膜梭菌的类型分为A、B、C、D、E 5种，而引起本病的2种类型为A型和C型 ^[4]。A型和C型产气荚膜梭菌在其生长繁殖过程中均能够产生α毒素，C型还产生β毒素。这些毒素共同作用会引起肠道黏膜的坏死性炎症，导致严重的肠道功能障碍。

本病原菌在环境中存活时间短，容易被常规的消毒剂所杀灭，在高温的环境中或者暴露于日光下也会很快死亡。

2 流行病学

发病鸡和隐性感染鸡为本病的传染源，这些鸡在饲养过程中能够将病原排出体外，污染环境。传播途径主要包括水平传播和垂直传播，其中以经消化道的水平传播途径为主。产气荚膜梭菌还可通过种蛋垂直传播给雏鸡。鸡坏死性肠炎对肉鸡的危害主要是处于2~6周龄之间的群体，尤其是快速生长的品种^[5]，其他品种和年龄的鸡群也对本病具有易感性，尤其是处于雏鸡和育成鸡阶段。3~6月龄的鸡群在感染本病后仍然会出现明显的临床症状，该病在全球范围内广泛分布，在集约化养殖场中尤为常见。发病率在不同地区和养殖场间差异较大，通常在6%~38%，死亡率可达6%^[6]。

当发病鸡采食高蛋白饲料、受到应激和球虫感染时^[7]，肠道黏膜受到破坏，肠道内菌群失调，容易导致病原菌的侵袭并迅速增殖。

3 临床症状

鸡坏死性肠炎可以表现为临床形式和亚临床形式，其中临床形式又可以分为急性型和慢性型。

3.1 急性型

鸡坏死性肠炎的临床表现可表现为突然死亡，死亡率急剧上升，有时病鸡甚至不会表现出临床症状，病程稍长的病例则表现为食欲减退甚至完全废绝、精神不振、羽毛蓬乱、生长迟缓和腹泻，腹泻时排出的粪便呈暗红色、巧克力色或者黑褐色，粪便不成型，稀软，有时在粪便中还可见含有大量的没有消化完全的饲料颗粒。有的病鸡还会出现神经症状，表现为双翅麻痹和俯卧地面。病程较长的病鸡会出现贫血症状，可见鸡冠和肉髯变得苍白。

3.2 慢性型

病鸡精神状态较差，生长发育受阻，体重明显低于同龄健康鸡，表现为消瘦、贫血，鸡冠苍白、皱缩，羽毛缺乏光泽、易折断，整体外观呈现营养不良的状态。病鸡还出现间歇性下痢，粪便呈灰黄色或灰白色，粪便稀软，有时可见粪便上覆盖有少量血液或黏液，有恶臭味。产蛋鸡产蛋率下降，产软壳蛋、薄壳蛋或畸形蛋的比例增加，蛋的品质下降，蛋清稀薄，蛋黄颜色变浅。病程较长，可持续数周，病鸡逐渐衰弱，但死亡率相对急性型较低。若未得到及时有效的治疗，部分病鸡可能因衰竭而死亡，或成为僵鸡，失去饲养价值。

3.3 亚临床型

目前家禽养殖业中，有着动物大量感染坏死性肠炎(亚临床型)的情况。亚临床型的病鸡通常没有明显的临床症状，仅表现为生长发育迟缓、饲料的转化率低下。陈鑫^[8]研究发现，鸡患亚临床型坏死性肠炎会造成生长性能的降低,炎性因子上升，以及血清抗氧化功能的降低，同时也会造成雏鸡肠道各类屏障功能下降。

4 病理变化

对病死鸡进行剖检后可见病变主要集中于肠道，尤其是空肠和回肠，表现为肠道的肠壁充血和水肿，在肠腔内有大量气体和血样内容物。肠黏膜的坏死性炎症，可见黏膜表面覆盖1层假膜，呈黄绿色或灰白色，严重时表现为肠壁穿孔。早期病变为肠绒毛顶端上皮细胞的变性、坏死，随后病变向深层发展，累及整个黏膜层。在超微结构层面，可见肠上皮细胞微绒毛脱落、细胞间连接破坏、线粒体肿胀等改变。可见视野中分布着大量炎性细胞，主要是巨噬细胞以及中性粒细胞。严重病例可出现黏膜下层水肿、出血，甚至肌层坏死。其他组织器官病变不明显，病程较长的鸡可表现出肝脏肿大、胆囊充盈等病变。

5 诊断方法

鸡坏死性肠炎仅通过对临床症状和病理变化的观察难以确诊，需要配合进行实验室检测，在实验室可以进行细菌分离培养、生化鉴定、PCR检测和ELISA等。

5.1 细菌分离培养

这是本病的传统的诊断方法，从病变肠道组织和粪便中分离病原菌，并通过生化试验和毒素检测确定其类型。通常是从发病鸡的粪便或者小肠黏膜上采样进行涂片染色镜检，在视野中出现紫色的大杆菌。在鲜血琼脂平板上对病原进行24 h培养，能够在平板上长出表面呈白色、光滑的菌落，边缘整齐，有明显的溶血现象。在肉汤培养基中接种病原，经24 h培养，培养基浑浊；经过生化鉴定，该菌可以对蔗糖、果糖和葡萄糖进行发酵，并产酸产气，但不能对甘露醇进行发酵，可以确诊本病。

5.2 分子生物学方法

分子生物学方法是当前最常见的诊断方法，其中最常应用且最方便的是PCR方法，能够快速检测出产气荚膜梭菌的保守基因序列和毒素基因的序列，具有非常高的特异性和灵敏度。

无菌采集病死鸡的肠道病变组织后使用DNA提取试剂盒提取样本中的基因组DNA。根据魏氏梭菌等与鸡坏死性肠炎相关病原菌的保守基因序列设计特异性引物。设置PCR反应体系与条件，对PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳，电泳结束后，观察条带变化。如果与目的条带大小相符的位置出现明亮的条带，则判定为阳性结果，表明样本中存在产气荚膜梭菌。

5.3 血清学方法

血清学方法应用广泛，其中最常用的是ELISA方法，通过对血清中特异性抗体的检测，有助于评估鸡群的感染状况和免疫状态。应用ELISA方法检测本病，具有高度的特异性和灵敏度，快捷方便。

采集鸡的静脉血，以3 000~4 000 r/min离心15 min，分离出上层血清，将血清转移至新的无菌离心管中，-20 ℃保存备用。取适量肠道病变组织，加入生理盐水，用组织匀浆器匀浆，制成10%~20%的组织匀浆液。然后以3 000~4 000 r/min 离心 10~15 min，取上清液作为检测样本，-20 ℃保存。

选择针对鸡坏死性肠炎相关病原菌的特异性抗体或毒素的ELISA检测试剂盒，将浓缩洗涤液用蒸馏水稀释成工作液，将酶标抗体等试剂进行适当稀释，标准品应按照不同浓度梯度进行稀释，制备标准曲线。经过包被、洗板、加样、加酶标抗体、显色与终止后在酶标仪在特定波长下（如450 nm）测定各孔的吸光度（OD值），以标准品的浓度为横坐标，对应的OD值为纵坐标，绘制标准曲线。根据样本的OD值，在标准曲线上查找对应的浓度值，若样本浓度高于试剂盒设定的临界值，则判定为阳性；若低于临界值，则为阴性。

6 防治措施

6.1 预防措施

鸡坏死性肠炎的预防措施通常是通过提升饲养管理技术和进行疫苗接种。

养殖过程中鸡群的饲料具有丰富的营养，且无霉变和清洁的饮水。要确保饲料含有恰当比例的能量和蛋白质，如果饲料中含有的蛋白质较高，特别是小麦和大麦类的饲料原料含量较高，或者饲料的颗粒过小，已经被证实与坏死性肠炎的发病率具有相关性^[7]。肠道内的菌群也对本病的发生具有相关性，因此可以通过在饲料中添加微生物菌群和各种营养物质组成微生态制剂，每吨饲料中添加200~400 g，可增加肠道中有益菌数量，具有保护肠道健康和内环境的作用^[9]。

在养殖过程中，还需要对霉菌毒素进行控制，否则就会导致消化道问题，出现肌胃炎和肠炎等，还会导致其脱落和出血等病变^[10]。饲料保存时要避免发霉变质，可以在饲料中添加一些脱霉剂，还可以给鸡群饮用0.05%的硫酸铜水溶液。

良好的管理包括保持鸡舍内适宜的温度、湿度和通风，避免过度拥挤。

在肠道内有寄生虫会破坏肠道上皮细胞，从而导致产气荚膜梭菌的感染率上升，需要对养殖过程中容易感染的球虫等常见的寄生虫进行预防和控制，并且要提升饲养管理环境，加强消毒和卫生管理，减少球虫的虫卵。

生物安全措施可以控制病原菌的传入和传播，养鸡场避免从场外引种，否则可能会将病原引入，即使需要引种，也应避免从疫区引种，而且引种后通常需要经过30 d的隔离饲养后方可以混群饲养。养殖场要严格消毒，可以选用0.5%的过氧乙酸溶液对环境进行喷雾消毒，要定期进行轮换使用，通常每月都要轮换，轮换药物有2%福尔马林、5%氢氧化钠以及2%来苏儿，每周消毒1~2次^[11]，采用交替使用不同类型消毒药剂的方式，可有效预防长期单一用药导致的病原菌耐药性问题。非场区工作人员应尽量避免进入养殖区域，若必须进入须严格执行消毒流程。所有外来车辆及物品入场前均需进行全面卫生处理，人员需在专用消毒通道内完成全身消毒，并更换经过专业清洗消毒的工作服，车辆需通过场区入口处的消毒池对轮胎进行杀菌处理，车身及驾驶室等部位则采用高压喷雾方式完成消毒。在养殖场内还需要控制啮齿动物。

疫苗接种可以用于预防鸡坏死性肠炎。目前已有多种商品化疫苗可供选择，包括灭活疫苗、类毒素疫苗和基因工程疫苗等。疫苗接种方案应根据当地流行病学情况和养殖场具体条件制定，通常建议在雏鸡1~2周龄时进行首免，2~3周后加强免疫。

6.2 治疗措施

随着全球禁抗趋势不断深入，抗生素已经不可作为饲料添加剂防治鸡坏死性肠炎,中草药方剂作为抗生素替代品被广泛应用于坏死性肠炎的防控。有报道显示不同中药提取物复配使用可提高抗菌效力。取黄柏和黄连各100 g，大黄50 g，加入1.5 L水，加热进行煎熬，直至药液剩余1 L时倒出，而后再加入1 L水后继续煎熬，直至药液剩余0.5 L，将2次药液混合后加入10倍量的水，供1 000只鸡饮用，每天用药1次，连续用药5~9 d可以取得良好的效果^[6]。或者选用乌梅15 g，苍术、葛根、厚朴各12 g，甘草、柴胡、茯苓、白术、黄芪和黄芩各10 g，混合后拌入饲料中。对于粪便中带有血液的情况，还需要在方剂中添加仙鹤草和白头翁，连续用药4 d^[3]。山苍子油可以有效抑制产气荚膜梭菌Ⅳ型菌毛系统的生物学功能，发挥抗产气荚膜梭菌感染作用^[1]。陈科宇^[12]采用甘草提取物1 mg/m L、黄芩提取物0.5 mg/mL进行复配时即可抑制产气荚膜梭菌的生长，减缓炎症反应，改善腹泻症状，维持肠道健康水平。应用中草药治疗效果虽然较慢，但有利于整体提升病鸡机体的免疫力。

此外，针对本病，还可以应用一些其他的治疗新产品。氧化锌量子点(Zn O QDs)目前已经被使用于养殖生产，不仅能提高对锌元素的生物利用度，还能提高家禽的生产性能以及免疫能力。陈鑫^[8]研究发现在日粮中按照80 mg/kg的量添加氧化锌量子点，可以缓解亚临床型坏死性肠炎。目前，也有较多采用益生菌作为饲料添加剂改善坏死性肠炎发生的报道。吕振松^[13]给鸡群饲料中添加凝结芽孢杆菌BC168制剂，对鸡产气荚膜梭菌有一定的体外抑制作用，能够有效预防坏死性肠炎。楚玉婷等^[14]研究表明，日粮中添加枯草芽孢杆菌复合微生物制剂可以改善坏死性肠炎鸡的生长发育、提高肉鸡抗氧化能力以及肠道紧密连接蛋白基因表达量，且枯草芽孢杆菌复合微生物制剂对鸡坏死性肠炎有较好的预防作用。

7 结 语

鸡坏死性肠炎是1种对鸡群危害严重的疾病，其防控需要采取综合措施，要及时发现、尽早治疗，避免病程过长，导致病鸡死亡。在对发病鸡群进行治疗时，可以选用敏感的抗菌药物，如盐霉素、林可霉素等，也可以应用一些中草药组成方剂，来对症治疗。未来，随着新型疫苗、替代抗生素产品和精准诊断技术的不断发展，鸡坏死性肠炎的防控将更加高效。养殖业者应密切关注行业动态，及时更新防控知识和技术，以保障家禽健康。

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