1例CSFV、PCV2和PRRSV混合感染的流行病学调查

Epidemiological investigation of a case of mixed infection of CSFV, PCV2, and PRRSV

摘要

目的 为确诊广西柳州某商品代育肥猪的发病原因并控制疫情。 方法 通过现场调研、观察临床症状和解剖，采集病死猪的脾、肺、肾、淋巴组织、粪便和环境棉拭子进行实验室荧光RT-PCR/PCR检测，并进行流行病学调查与分析。 结果 通过现场调研、临床症状观察及剖解初步判断该商品代育肥猪场感染了猪圆环病毒2型（PCV2）和猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV），实验室荧光RT-PCR/PCR检测该商品代育肥猪感染了PRRSV、PCV2型和猪瘟病毒（CSFV）。发病的主要原因为不规范引种、饲养管理不当、环境卫生差、生物安全管理不到位，采取综合防控措施后猪只死亡率降低至0%，腹泻、喘气、呼吸困难等临床症状缓解，疫情得到有效控制。 结论 猪病防控需加强引种把关、定期监测、疫苗防控及生物安全管理等综合性防控措施。

Abstract

Objectives The cause of a disease in a farm of commercial fattening pigs in Liuzhou, Guangxi Province was diagnosed to control its epidemic. Methods On-site investigation, observation of clinical symptoms, and anatomy were conducted. The spleen, lung, kidney, lymphoid tissue, feces, and environmental cotton swabs from dead pigs were collected for fluorescent RT-PCR/PCR detection in laboratory. Epidemiological investigation and analyses were conducted. Results The results of on-site investigation, observation of clinical symptom, and anatomy showed that the farm of commercial fattening pigs was infected with porcine circovirus type 2 (PCV2) and porcine reproductive and respiratory syndrome virus (PRRSV). The results of fluorescent RT-PCR/PCR detection in laboratory showed that the commercial fattening pig was infected with PRRSV, PCV2 and classical swine fever virus (CSFV). The main causes of the disease were non-standard introduction, improper feeding and management, poor environmental hygiene, and inadequate management of biosafety. The mortality rate of pigs was reduced to 0 %, and clinical symptoms including diarrhea, wheezing, and dyspnea were alleviated, and the epidemic situation was effectively controlled after comprehensive measures of prevention and control were taken. Conclusions Comprehensive measures of prevention and control including controlled introduction, regular monitoring, prevention and control with vaccine, and the management of biosafety should be strengthened in the prevention and control of swine diseases.

Graphical abstract

关键词

流行病学调查 / 混合感染 / 疫苗防控 / 猪瘟 / 猪圆环病毒2型 / 猪繁殖与呼吸综合征

Key words

epidemiological investigation / mixed infection / vaccine prevention and control / classical swine fever virus (CSFV) / porcine circovirus type 2 (PCV2) / porcine reproductive and respiratory syndrome virus (PRRSV)

非洲猪瘟疫情后，柳州市生猪养殖产业规模化、标准化及集约化进程显著加速，规模化养殖企业以“公司+合同代养育肥场”的模式向外扩张。然而，该模式衍生的高频次跨区域生猪调运行为，导致非洲猪瘟（african swine fever，ASF）、猪繁殖与呼吸道综合征(porcine reproductive and respiratory syndrome，PRRS）、猪瘟（classical swine fever，CSF）和猪圆环病毒（porcine circovirus，PCV）等多种猪传染性疫病交叉传播的风险呈指数级上升，这对区域生猪养殖业造成系统性生物安全威胁，直接经济损失评估达亿元量级，严重制约产业可持续发展^[1]。

猪繁殖与呼吸综合征俗称猪“蓝耳病”，是我国《动物防疫法》明确规定防控和净化的重要动物疫病之一^[2]。该病可通过鼻、眼分泌物、公猪精液等方式进行水平或垂直传播，呈地方性流行，猪只易感性不同，生长猪和育肥猪感染较为温和，主要表现呼吸困难，易引起猪瘟、猪圆环病毒2型、副猪嗜血杆菌病、猪链球菌等病的继发感染，难以鉴别和诊断，严重危害生猪养殖^[3]。

猪瘟(CSF)是我国口岸检疫重点防范的二类动物疫病，野猪和家猪均易感，传播途径可通过直接或间接途径传播，临床表现根据毒株毒力的强弱及感染猪群免疫状态的差异表现为最急性型、急性型、慢性型和温和型，也是我国《动物防疫法》明确规定防控和净化的重要动物疫病之一^[4]。

2007年我国对CSF实施强制免疫，2017年取消CSF的强制免疫，实行差别化免疫策略。据陈忠伟等^[5]、王翠等^[1]的研究结果表明，2017－2023年CSF的个体抗原阳性率为0.10%～1.11%，说明在政策调整后，部分缺乏科学养殖管理的中小型散养户猪场还存在一定程度的显性及隐性感染，存在疫情散发风险。若不加强CSF的监测和防控会使CSF在猪场中散发与流行，给猪场造成巨大的经济损失^[1,5]。猪圆环病毒2型是一种经济消耗性疫病，在猪群中普遍存在，能隐性和持续性感染，临床症状表现为引起断奶仔猪多系统性衰竭综合征、中大猪的皮炎与肾病综合征以及心肌炎等多种症状的消瘦型病猪，导致仔猪的生长性能下降、种猪的繁殖效率下降、继发或并发其他传染性疫病，死亡率上升，饲料报酬降低，养殖成本和防控难度加大^[6-7]。

广西柳州某商品代猪场饲养新购进的育肥猪1 000头，出现采食量下降、皮炎、咳嗽、腹泻、喘气、消瘦、呼吸困难等症状，发病死亡60头，5 d死亡率高达6%，怀疑猪只感染PRRS和PCV。因此，本研究采集死亡猪只的脾、肺、肾、淋巴组织、粪便和环境棉拭子进行实验室确诊，旨在查明育肥场猪只的发病原因。

1 材料与方法

1.1 主要器材

防疫应急工作箱、采样箱、采样器、防护服等应急防疫物资；实验室检测用的磁珠法病毒DNA/RNA提取试剂盒购于天隆公司和杭州博日科技有限公司，荧光PCR仪罗氏Roche公司；PRRSV、PRRSV（Nsp2 1594-1680变异株）、FMDV、CSFV、PCV2和PCV3检测试剂盒购于北京世纪元亨公司，ASFV检测试剂盒购置于青岛立见生物科技有限公司。

1.2 发病情况和病史调查

通过与商品代育肥场场主和饲养人员采用询问和实地调查相结合的方式，了解该场的猪只来源、饲养情况、发病情况、免疫情况和观察场地情况。

1.3 临床症状及剖解

观察育肥猪的临床症状，对病死猪进行剖解并采集病料，记录临床症状及剖解情况。

1.4 实验室检测

采集病死猪的脾、肺、肾、淋巴组织4份和1份粪便及1份环境棉拭子，使用实时荧光PCR/RT-PCR检测，具体步骤和结果判定详见操作说明书。

2 结果与分析

2.1 现场调研情况

现场调查发现，柳州某商品代猪场毗邻乡村小路，工作人员为场主1人、饲养员1人，周围未见居民区，养殖环境差，消毒池里无消毒水。养殖外围区无防蚊防虫防鼠的生物安全防控措施。

笔者问询情况后得知：2023年3月初新购进21日龄的断奶猪只1 000头，饲料为某饲料厂购买，3月底该猪场猪只出现皮炎、精神沉郁、食欲不振、消瘦、腹泻、咳嗽、呼吸困难等临床症状，4月1日临床症状严重的猪只死亡，购买中和购买后未检测非洲猪瘟以外的其他猪疫病，未接种任何疫苗，污道与净道未分开，日常较少消毒。场主对发病猪的观察初步怀疑是PRRS，使用Vc+泰乐菌素治疗，有效果但仍有猪只死亡，5 d发病死亡60头，死亡率高达6%。

2.2 临床症状及剖检变化

临床表现为采食不佳，被毛脏乱无光泽、精神沉郁、消瘦、腹泻、呼吸困难等症状，病死猪消瘦、皮炎、眼睑和舌头呈蓝紫色（图1）；剖检可见肺部出现白斑肺呈间质性肺炎，肝脏表面有白色斑点和淤血，肠道部分胀气弥漫性出血（图2），根据现场询问及剖检结果初步判断该商品代育肥猪场感染了PCV2和PRRSV。

2.3 实验室诊断

采用实时荧光PCR/RT-PCR对病死猪的4份组织、1份粪便、1份环境棉拭子进行PCV2、PCV3、RRSV、PRRSV （Nsp2 1559-1680变异株）、CSFV、FMDV、ASFV检测，结果显示：PCV2全部阳性，2份组织CSFV阳性，4份组织PRRSV阳性，其余病原为阴性（表1），病原检测结果见图3。

2.4 病因分析

根据现场流行病学调查情况、育肥猪只发病的临床症状、剖解病理变化及实验室检测，确诊该场发育猪只发病死亡的原因是PRRSV+PCV2+CSFV的混合或继发感染。出现感染是由于该场引种检测疫病较少，只检测非洲猪瘟，并且未按科学的疫苗程序进行免疫接种，环境卫生差、养殖外围未见防鼠虫等生物安全防护措施，管理不到位导致猪场巨大的经济损失。

3 讨 论

3.1 加强生物安全隔离

通过观察猪只是否有食欲不振、消瘦、腹泻、咳嗽、呼吸困难、皮炎与肾病综合征等多种临床症状，找出有临床症状的猪只，将其隔离治疗，并对养殖场进行彻底的带猪消毒以切断PRRSV、CSFV、PCV2的传播，对病死猪走污道进行无害化处理。同时，封闭猪群，控制人流物流，防止其他健康猪群感染^[7]。

3.2 药物治疗

由于PRRSV、CSFV、PCV2为病毒性、传染性疫病，无特效药，但根据PRRSV病毒主要在猪肺泡巨噬细胞（PAM）中进行复制和具有抗体依赖性增强作用（ADE），而泰万菌素、替米考星的碱性特性能改变肺泡巨噬细胞的pH环境，阻断病毒与细胞受体的结合；同时，还能显著提高干扰素-γ水平和防止继发其他细菌性疾病，增强NK细胞活性，帮助受损的免疫系统恢复功能，提升猪群抗病力。

针对此次疫情，建议隔离消毒无害化处理后，在该场猪的饲料中添加替米考星（1.5 kg/ t）+板蓝根多糖，在饮水中添加电解多维；针对PRRSV推荐选用与本场毒株相匹配的疫苗，以增强免疫针对性；对于CSFV建议采用猪瘟耐热保护剂活疫苗，该疫苗具备良好的稳定性与免疫效果；PCV2防控则应使用灭活疫苗。

为确保疫苗接种效果，建立完善的免疫保护屏障，建议在猪只65日龄时，分别进行PRRS、CSF及PCV2疫苗的再次接种，巩固免疫记忆，提升机体对相应病原的抵抗力。

3.3 加强和完善疫病预防控制措施

根据王翠等^[1]对柳州市猪主要病毒性传染病的流行病学调查与分析，PCV2和PRRSV有普遍感染和上升趋势，为了更好地防控生猪疫病，做法如下：

一是猪场在引种时需进行检测严格把关，禁止引进CSFV、PCV2和 PRRSV抗体和病原的阳性猪群，完善猪场管理措施，定期监测CSFV、PCV2和 PRRSV等抗体和病原，实施批次生产、全进全出机制，加强饲养管理和饲养员分流管理，杜绝窜舍，消毒剂要多类别的、科学的交替使用，采用空气过滤系统，制定好灭蚊、蝇、鼠方案并实施到位，将净道与污道分开，及时淘汰不合格猪群和对病死猪走污道进行无害化处理等措施^[2]。

二是猪场选择疫苗时要综合考虑安全性、稳定性和交叉保护性，有条件的情况下建议猪场对阳性病料进行基因测序，科学选择与流行毒株匹配的疫苗进行免疫，加强饲养管理和生物安全防控。

4 结 论

综上所述，该场猪只发病原因可能是新购进猪只未科学免疫疫苗，造成猪群体内PRRS、CSF、PCV2免疫保护性抗体较低，PRRS、PCV2为免疫抑制性疫病，具有隐性带毒、潜伏期长、危害性大、消灭困难、易复发等特点，一般只表现为轻微的呼吸道症状不易引起养殖人员的重视。

同时，猪群发病时正值季节交替、气候多变，养殖环境差，防鼠防虫措施不到位等原因造成猪群多重应激，使机体免疫力和抵抗力下降，进而引发猪PRRSV、CSFV、PCV2的感染。因此，为了更好地预防和控制PRRSV、CSFV、PCV2 的发生与流行，猪场需严格控制引种，建立“检测－免疫－监测－流调－消毒－扑杀和无害化处理”模式的关键防控流程，加强生物安全管理和饲养管理，防止生猪疫病的发生与流行，将猪场的损失降至最低^[1,6]。

参考文献

[1] 王翠,吴先华,梁竞臻,2020—2023年广西柳州市猪主要病毒性传染病的流行病学调查与分析[J].畜牧兽医杂志,2024,43(5):69-76.

[2] 李博.四种消毒剂场景化消杀效果研究[D].长沙:湖南农业大学,2022.

[3] 杨汉春.猪场蓝耳病的流行现状与防控对策[J].兽医导刊,2021(1):7.

[4] 罗丽华.2018-2019年陕西省屠宰生猪中猪瘟病毒和猪圆环病毒2型检测与基因分析[D].杨凌:西北农林科技大学,2019.

[5] 陈忠伟,何文娜,何颖, 2016—2019年广西玉林市部分猪场主要病毒性疫病监测[J].中国动物检疫,2021,38(4):20-28.

[6] 王翠,廖海珍,卢军,广西柳州市猪圆环病2型病原检测及ORF2基因序列遗传变异分析[J/OL].中国动物传染病学报,1-12[2025-03-20].

[7] 李思雨,王翠,马涛,猪圆环病毒2型PCR检测方法建立及检测限探讨[J].中国猪业,2024,19(6):76-82.

基金资助

广西农业科技项目(Z2023005)

柳州市科技计划项目（2024NZ0401B002自）