1例犬细小病毒病的诊断与治疗

摘要

针对前来就诊的发生呕吐、腹泻的犬进行有效诊治，采用临床检查、血常规检查、传染病试纸检测、犬细小病毒PCR检测方法进行诊断，并结合诊断结果进行综合性治疗。该患犬诊断为犬细小病毒感染。通过抗病毒、抗菌、对症治疗、营养支持进行系统治疗，患犬7 d后康复出院。犬细小病毒病因其高致死率，对养犬业危害很大，预防本病发生的最好方法是疫苗免疫，养殖者及宠主应加强疫苗免疫和饲养场所的清洁消毒，降低犬的感染率，减少经济损失，为类似病例的研究和诊治提供参考。

Graphical abstract

关键词

犬细小病毒病 / 肠炎型 / 诊断 / 治疗 / 疫苗免疫

犬细小病毒病是1种由犬细小病毒（canine parvovirus，CPV）引起的犬的急性、烈性、高致死性传染病^[1]，主要侵害幼犬，以剧烈呕吐、出血性肠炎、白细胞减少和心肌炎为主要特征。自1978年首次报道以来，CPV在全球范围内迅速传播，并不断演化出新的变异株（如CPV-2a、2b、2c），导致传统疫苗的免疫保护效果受到挑战^[2]。该病发病急、死亡率高（未治疗病例可达70%~90%），对犬只健康构成严重威胁，也给宠物诊疗行业带来巨大挑战。

犬细小病毒（CPV）属于细小病毒科，是一种无囊膜的单链DNA病毒，具有极强的环境抵抗力，可在污染物上存活数月甚至数年。CPV主要通过粪-口途径传播，病犬的粪便、呕吐物及污染物均可成为传染源。近年来，分子流行病学研究表明，CPV-2c变异株在全球范围内的流行率逐渐上升，部分毒株甚至表现出对现有疫苗的免疫逃逸能力^[3]。此外，CPV不仅感染家犬，还可传播至狐狸、狼等野生动物，形成跨物种传播链，进一步加剧了该病的防控难度。

CPV感染后，病毒主要侵袭快速分裂的细胞，如肠道上皮细胞、淋巴组织和心肌细胞。根据临床症状，CPV感染可分为肠炎型和心肌炎型2种类型。肠炎型最常见，表现为剧烈呕吐、血便、严重脱水及白细胞减少，病理学检查可见小肠绒毛萎缩、出血性坏死性肠炎。心肌炎型多发于幼犬，常导致急性心力衰竭，死亡率极高，幸存犬可能遗留慢性心肌损伤^[3]。CPV的致病机制涉及病毒直接损伤和宿主免疫反应的共同作用。病毒侵入肠道后，破坏肠黏膜屏障，导致细菌易位和内毒素血症，进而引发全身性炎症反应综合征。此外，CPV感染可显著抑制骨髓造血功能，导致中性粒细胞减少，增加继发感染风险^[4]。

目前，CPV的诊断主要依靠临床检查、实验室检测和分子生物学技术相结合的方式。快速检测试纸（ELISA）操作简便，适合临床初筛，但可能出现假阴性。聚合酶链式反应（PCR）具有高灵敏度和特异性，可区分CPV变异株，是确诊的金标准^[5]。通过血常规与生化分析，典型病例可见白细胞减少（尤其是中性粒细胞）、低蛋白血症和电解质紊乱^[6]。近年来，新型诊断技术如CRISPR-Cas检测和微流控芯片逐渐应用于CPV的快速诊断，提高了检测效率和准确性^[7]。尽管CPV的诊断与治疗已有较多研究，但在临床实践中，不同病例的预后仍存在较大差异。部分患犬因就诊延迟、继发感染或耐药菌感染导致治疗失败。

因此，本研究深入总结并分析1例典型患犬病例的诊疗过程，优化治疗方案，提高CPV的临床治愈率，以期为相关宠物诊疗提供参考。

1 发病情况

拉布拉多犬，雄性，4岁，体重32 kg，未接种疫苗。主诉：患犬频繁呕吐，腹泻，食欲不振，精神状态较差，遂来就诊。

2 临床诊断

2.1 主要设备和药品

兽用全自动血液细胞分析仪BC-5000 Vet、动物专用免疫分析仪vetXpert、实时荧光定量PCR仪Vetgenies 8，均购于深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司。

传染病快速检测试纸条购于深圳市科捷实业发展有限公司，犬细小病毒单克隆抗体注射液购于哈尔滨元亨生物药业有限公司，赛瑞宁（枸橼酸马罗匹坦）注射液购于法瑞瓦公司法国生产厂，氨苄西林购于河北远征药业有限公司，酚磺乙胺购于河南海天生物科技有限公司。

2.2 症状观察

患犬在临诊过程中多次呕吐，粪便呈水样且带血，食欲废绝，精神极差，不愿站立，体温升高至40 ℃，说明病情迅速恶化。

2.3 实验室检查

1）血常规检查。采集患犬静脉血进行血常规项目检查。由表1可知，白细胞总数、中性粒细胞数目、淋巴细胞数目均低于参考值，说明患犬有病毒感染的可能。红细胞数目、血红蛋白浓度低于参考值，说明患犬存在脱水。

2）C反应蛋白（CRP）检测。采集患犬静脉血并分离血清，取血清10 μL滴入荧光定量检测卡，孵育3 min，将检测卡插入免疫分析仪，开始检测。由表2可知，CRP检测结果为118.97 mg/L，远高于参考范围，说明患犬存在明显炎症。

3）传染病试纸检测。用无菌棉签取患犬直肠中的粪便，将粪便样本放入稀释液静置2 min，取适量稀释液滴加在快速检测试纸条加样孔中，5~10 min后观察结果。由图1可见，患犬细小病毒（CPV）阳性，犬冠状病毒（CCV）阴性。

4）PCR检测。PCR检测灵敏度高，特异性强,能够快速、有效地诊断犬只感染情况^[8]。用直肠拭子采集样本，按照核酸提取试剂盒说明提取核酸，并进行犬细小病毒荧光定量PCR检测，记录Ct值。由表3可知，Ct值为25.16，处于0～36之间，为阳性，确诊该犬细小病毒感染。

综上，综合患犬的临床症状和实验室检查结果，确诊该犬为肠炎型犬细小病毒病。

3 治疗措施

治疗以禁食禁水、抗病毒、对症治疗、营养支持、监测体温和白细胞数目为原则。

1）禁食禁水。为了减轻胃肠道负担，对患犬禁食禁水，呕吐症状缓解后，逐渐给予少量清淡易消化的食物。

2）抗病毒。肌肉注射犬细小病毒单克隆抗体注射液0.5 mL/kg，1次/d。

3）止吐。赛瑞宁（枸橼酸马罗匹坦）注射液0.1 mL/kg，1次/d。

4）止血。采取静脉输液，300 mL 5%葡萄糖溶液+10 mL酚磺乙胺+10 mL维生素C。

5）营养支持。300 mL 5%葡萄糖溶液+20 mL10%葡萄糖溶液+10 mL ATP+10 mL辅酶A。

6)抗感染。300 mL生理盐水+5 g氨苄西林。

7）胃肠道保护。300 mL生理盐水+120 mg奥美拉唑。

经3 d治疗，患犬体温正常，便血颜色变淡，呕吐次数减少，但白细胞数目仍然低于正常值。继续抗病毒对症治疗，第5天开始有食欲，尝试喂少量流质食物，精神状态明显好转，白细胞数目趋于正常，停止抗病毒治疗。第6天输液量减少，喂食少量泡软的狗粮，无呕吐腹泻，精神状态良好，活动增加。第7天停止治疗，继续观察饮食和排便情况，无异常，细小病毒试纸检测转阴，遂出院，7 d后回访患犬健康。

4 讨 论

4.1 诊断分析

肠炎型犬细小病毒病和犬冠状病毒病、犬瘟热的临床症状比较相似，仅依据临床症状很难分辨。通过快速检测试纸条检测排除了犬冠状病毒感染，对患犬进行犬细小病毒PCR检测，结果为阳性，结合患犬频繁呕吐、粪便呈水样且带血并未出现心力衰竭、呼吸困难等心肌炎的临床症状，确诊该犬患肠炎型细小病毒病。

4.2 药物治疗

因细小病毒感染会导致肠绒毛变短、脱落，甚至引发组织坏死，因此，在患病早期对患犬禁食禁水非常重要，可减轻肠道负担，利于修复，同时可缓解呕吐腹泻的症状。药物治疗以抗病毒和对症治疗为主^[9]，对于病毒性疾病，犬细小病毒单克隆抗体，特异性好，针对性强，临床应用效果好。便血对动物机体的损害较大，及时止血也是治疗该病的关键，患病早期应大量应用酚磺乙胺或安络血，加速血凝，减少出血。随着病程发展和治疗中抗生素的持续应用，由于肠道壁功能受抑制，内源性维生素K的合成可能减少或停止。同时，消化道出血会导致血浆中多种凝血因子的流失。因此，在止血治疗中及时补充维生素K以促进血浆凝血因子的合成显得尤为重要。新型止吐药枸橼酸马罗匹坦在治疗犬猫急性呕吐效果显著，可快速止吐^[10]。

近几年，中医药在犬细小病毒病的治疗中也有研究和应用。汤里平等^[14]用苦参止痢颗粒（主要成分为苦参、白芍和木香等）治疗犬细小病毒水平感染的犬，发现苦参止痢颗粒能有效控制炎症和保护肠黏膜，特别是对于治疗犬细小病毒病引起的血便，比西药治疗效果更显著。梁宁^[15]采用中西药结合的方法对2例犬细小病毒自然感染的犬进行治疗，采用白头翁15 g、乌梅15 g、黄连5 g、黄檗5 g、诃子10 g、郁金10 g，用水煎服；口服云南白药胶囊和诺氟沙星胶囊，连用3～5 d。治疗到第5天，所有病症全部消失，2头犬完全康复。

4.3 疫苗免疫

CPV对于物理化学的抵抗力较强，在65 ℃条件下，仍能保持感染特性，即使温度降低，CPV的感染性也不会发生明显变化。在pH 3～9的条件下，CPV能够保持60 min的感染特性^[16]，未免疫犬只极易感染，因此目前预防犬细小病毒病最好的方法是疫苗免疫。

目前广泛使用的犬细小病毒疫苗是CPV弱毒活疫苗（live attenuated vaccine，MLV），该疫苗被国际犬类疫苗接种指南推荐为预防病毒感染的核心疫苗^[17]，通过在宿主体内复制从而诱导强大、持久的免疫力，其特点是免疫早发和免疫时间长，在接种13～15 d后几乎能诱导所有犬产生抗CPV的保护性抗体。比如目前广泛使用的硕腾公司美国林肯厂(Zoetis Inc., Lincoln, USA)生产的卫佳伍，就是弱毒活疫苗，该疫苗含犬细小病毒NL-35-D株、犬瘟热病毒N-CDV株、犬腺病毒2型Manhattan致弱株、犬副流感病毒NL-CPI-5株，可同时预防4种传染病，免疫效果较好。该疫苗在使用时需避开母源抗体的干扰，在6周龄以上首免，21 d后二免，再过21 d三免，此后每年加强免疫1次，可起到较好的免疫保护作用。

犬细小病毒病因其高致死率，对养犬业危害很大，预防本病发生的最好方法是疫苗免疫。但在临床和生产中也存在免疫失败的现象，这就要求养殖者和临床兽医应注意接种疫苗的注意事项，不可在6周龄前接种疫苗，以免疫苗被母源抗体中和；疫苗的贮存温度是2～8 ℃，在疫苗运输过程中也应冷藏，防止其失活；应在动物健康状态下接种疫苗，接种疫苗1周内不能洗澡；按照疫苗免疫程序定期加强免疫。

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