羊脑炎型李氏杆菌病是由单核细胞增生性李氏杆菌引起的一种中枢神经系统感染性疾病,致病性强,宿主范围广。该病全球分布,在寒冷潮湿季节及饲料保存不当时易暴发,严重威胁反刍动物健康,给畜牧业造成重大经济损失。羊群感染后常出现典型神经症状,病死率高,若未及时诊治,可引发大规模死亡。多种毒力因子可突破宿主免疫屏障,侵入中枢神经系统,引发脑炎。因此,系统研究羊脑炎型李氏杆菌病的病原学特性、流行病学规律、临床诊断及综合防控策略,对精准防治及畜牧业可持续发展具有重要意义。
1 病原学特征
李氏杆菌是一种革兰氏阳性、兼性厌氧的短杆菌,隶属于厚壁菌门李氏杆菌科,菌体呈杆状(0.5~2.0) μm×0.5 μm,具周生鞭毛。该菌可在pH 5.6~9.6环境中生存,并耐受10%盐浓度,具备较强的环境适应性和存活能力
[1]。即便经过巴氏消毒处理,该菌仍难以被彻底清除,同时在酸性、碱性及高盐环境下也能保持较长的生存时间,于65 ℃条件下持续加热30~40 min可实现灭菌。该病菌对部分消毒剂较为敏感,如2%氢氧化钠、10%煤焦油皂溶液及2%福尔马林作用20 min以上均能有效杀菌。
其致病性由多种毒力因子介导,包括溶血素O、磷脂酶C及整合素等。其中,溶血素O可破坏宿主溶酶体,促进细菌在巨噬细胞内存活与增殖;整合素可介导宿主细胞侵染。李氏杆菌可通过污染的饲料、水源及动物分泌物传播,并能在宿主体内形成生物膜,进而提高抗逆性和耐药性。
2 流行病学特征
2.1 主要宿主及易感因素
李氏杆菌可感染哺乳动物、禽类及人类,反刍动物(如绵羊、奶牛、山羊)尤为易感,妊娠期及免疫低下个体感染风险更高。羊群暴发病例中,感染率达30%~50%,病死率为20%~30%。该菌为第二大食源性致病菌,仅次于沙门氏菌
[2]。寒冷潮湿环境(<10 ℃,湿度>80%)、霉变饲料及高密度饲养(>10只/m²)均促进其传播。妊娠后期母羊感染率较非妊娠羊高4倍,初生羔羊病死率高达50%。
2.2 传播途径
李氏杆菌主要经口传播,大部分病例与摄入受污染饲料或水源有关,尤其是pH>5.0的青贮饲料易促进其繁殖。垂直传播多见于妊娠母羊,可经胎盘感染胎儿,导致流产、死胎或弱仔,流产率达20%~30%。此外,病羊的尿液、乳汁及粪便可排出病原,通过接触或环境污染传播。该菌在潮湿环境中可存活6个月以上,在4 ℃低温下可存活数年,显著增加环境传播风险。
2.3 流行特点
羊李氏杆菌病呈散发性流行,主要发生于冬春季节(1-4月),低温(<10 ℃)、高湿(>80%)环境以及霉变的青贮饲料,均会增加该病经口传播的风险。高密度饲养(>10只/m²)及卫生不良可促进病原传播。羔羊因免疫力低下,高度易感,病死率可达50%以上。皮肤损伤、口腔黏膜破损或异食癖也会增加感染风险。
3 临床症状
3.1 羔 羊
羔羊感染脑炎型李氏杆菌病后进展迅速,未及时治疗可在24~72 h内死亡。临床表现为急性脑膜炎,初期精神沉郁、食欲下降、体温升高(40~41 ℃),并伴随共济失调和轻微震颤。病情加重时,肌肉僵硬(尤以头颈部明显),吞咽困难,部分病例伴磨牙、流涎。后期可出现兴奋奔跑、步态不稳、原地转圈等神经症状,严重者倒地痉挛、四肢划水,最终因昏迷和呼吸衰竭死亡。
3.2 成年羊
成年羊感染脑炎型李氏杆菌病后,表现为精神沉郁、食欲减退及反刍减少,体温升高(41 ℃以上)。可在部分病例的口腔或皮肤创伤部位检测到病原体,并伴随咀嚼缓慢、吞咽困难及流涎等症状。随着病程进展,病羊出现共济失调、步态不稳、原地转圈等神经症状,部分个体表现为头抵墙、不自主摇头,视力减弱甚至失明。后期可见角弓反张、四肢抽搐、全身肌肉痉挛,最终死于呼吸衰竭,病死率可达50%以上。
3.3 母 羊
妊娠母羊感染脑炎型李氏杆菌病后,除典型神经症状外,流产最为常见,流产率达20%~30%。部分母羊在妊娠后期(临产前3周内)突发流产,早期无明显症状。流产胎羊多已发育完全,但体型瘦弱,病变不明显。母羊流产后胎衣通常在3 d内排出,少数继发子宫炎。部分病例在流产前后短期内出现精神沉郁、食欲下降、体温升高,个别伴步态不稳或反应迟钝。无严重并发症者可顺利恢复,不影响下次繁殖性能。
4 病理剖检特征
李氏杆菌病的剖检特征主要涉及中枢神经系统和重要脏器病变。中枢神经系统中脑干病变最典型,表现为脑膜充血、水肿,脑实质软化并散在出血点,镜检可见坏死性脑炎及单核细胞、淋巴细胞袖套样浸润,部分病例伴脑室扩张及脑脊液增多
[2]。其他脏器方面,羔羊皮肤苍白、皮下水肿,肝脏肿大伴灰黄色坏死灶(1~3 mm),部分肺部充血、肺泡内浆液渗出。成年病羊肝、脾有散在性坏死灶,肠道可见充血及坏死性小肠炎,流产母羊子宫黏膜充血、水肿,胎衣滞留或继发子宫炎。
5 临床诊断
5.1 镜 检
镜检是羊李氏杆菌病实验室初筛的重要方法,可通过涂片染色快速判断病原特征。取病羊脑干、脑膜、脾脏、肝脏、血液或流产胎羊肝脏,研磨匀浆后制备涂片。革兰染色显示革兰阳性短杆菌,呈单个、成对或短链状排列,长0.5~2.0 μm,部分呈刷状排列。姬姆萨染色或美蓝染色可辅助观察,1 000倍油镜下,菌体染色均匀,部分具周身鞭毛,提示有运动能力
[3]。
5.2 细菌分离培养
细菌分离培养是确诊羊李氏杆菌病的关键实验室手段。取病羊脑干、脑膜、脾脏、肝脏、血液或流产胎羊肝脏、胃内容物,在无菌条件下研磨匀浆后直接接种或经4 ℃增菌处理。常用羊血琼脂培养,37 ℃培养24~48 h,典型菌落呈小型、灰白色、半透明,直径1~2 mm,具β溶血特性。PALCAM琼脂培养基上菌落呈黑绿色,有指示作用。李氏杆菌可在4 ℃低温生长,但对高温(>45 ℃)敏感。
5.3 运动性检查
运动性检查是鉴别李氏杆菌的重要实验室方法。采用血清葡萄糖甘油肉汤纯培养物,在0.2%~0.4%半固体培养基中垂直穿刺接种。接种后于20 ℃培养72 h,低温有助于运动特性显现。观察细菌沿穿刺线生长并向周围扩散,形成典型“倒挂伞”状运动,表明其室温下高度运动性。37 ℃培养时运动性减弱或消失,这一特性可用于鉴别其他非运动性细菌。
6 防控措施
6.1 预防措施
1)饲养管理优化。科学饲养管理可有效预防羊李氏杆菌病,主要包括饲料控制、环境优化和免疫增强。饲料管理方面,应严格控制青贮饲料发酵质量,pH值低于4.5,避免饲喂霉变或腐败饲料,确保存放区通风干燥,同时定期检测霉菌毒素及病原微生物。环境控制方面,羊舍保持干燥清洁,定期消毒(2%氢氧化钠或1%过氧乙酸),冬春季加强保温通风
[4]。免疫监测方面,由于无特异性疫苗,可补充维生素A、E及微量元素,以提高免疫力。同时定期进行驱虫管理,以提升整体免疫力。建议在羔羊50日龄和90日龄时分别进行1次驱虫,可选择皮下注射伊维菌素,每只羊2 mL,以降低寄生虫负担并增强机体抵抗力。
2)加强生物安全措施。加强生物安全措施是预防羊李氏杆菌病的关键策略,可通过病羊隔离、引种管理及健康监测降低病原传播风险,从而减少发病率,提高养殖效益。首先,针对疑似病例应立即隔离于专用隔离区,避免与健康羊接触,专人管理,接触人员须穿戴防护装备并消毒。处理病羊使用一次性或专用器械,死亡病例深埋(≥2 m)或焚烧。其次,新购羊隔离观察30 d,经血清学和病原学检测健康后才可入群,隔离期监测体温、食欲及粪便,并消毒运输工具。最后,针对高风险羊群每季度进行血清学检测,建立健康档案,结合流行病学调查、临床症状和实验室检测,确保早发现、早隔离、早治疗,降低羊李氏杆菌病风险。
3)合理控制饲养密度。合理控制饲养密度可降低羊李氏杆菌病风险,减少应激反应,提高羊群健康水平。羊舍应提供充足空间,建议绵羊1.5~2.5 m²/只,山羊2.2~3.0 m²/只,以减少拥挤与竞争
[5]。密度过大会导致争斗、践踏和皮肤损伤,增加病原侵入风险,应合理分群,避免不同年龄和体况的羊只混养。其次,密度过高也会提高湿度与氨气浓度,利于病原繁殖,须保持通风,相对湿度50%~60%,并定期清理粪污,以减少病原积累。
6.2 治疗策略
1)西药治疗。西药治疗是羊李氏杆菌病的主要干预手段,需结合早期诊断、合理选药及支持疗法,提高治愈率并降低病死率。针对患病羊治疗方案为地塞米松磷酸钠(0.1 mg/kg)、磺胺六甲氧嘧啶钠(25 mg/kg)及复合维生素B(0.5 mL/kg)肌内注射,1次/d,疗程5~7 d,以控制炎症和感染
[6]。若病羊出现神经症状可采取肌内注射250 mg/只氯丙嗪以缓解症状。出现眼部异常时,可使用5%葡萄糖溶液滴眼,2~3次/d。除此之外,苯巴比妥注射也十分有效,苯巴比妥注射液按每5~10千克体重1 mL(0.1 g),与等量的注射用水混合肌肉注射,4~6次/d,每次间隔2 h以上
[7]。
2)中药治疗。中药治疗可作为羊李氏杆菌病的辅助疗法,具有清热解毒、活血化瘀及提高机体免疫力的作用,有助于缓解临床症状并促进康复。中医认为该病属湿热毒邪侵袭,治疗应以清热解毒、凉血化瘀为主。推荐使用黄连10 g、板蓝根15 g、蒲公英20 g、金银花15 g、连翘10 g、赤芍10 g,煎煮取汁,每次200~300 mL,2次/d,连用5~7 d,以降低炎症损伤,提高抗生素治疗效果。其次,患羊若出现眼部异常,可用硼砂、白矾、防风、荆芥各6 g,郁金3 g煎煮所得药液,每天2次冲洗眼部,连续3~5 d。
7 结 语
羊脑炎型李氏杆菌病对于反刍动物尤其是绵羊的养殖危害极大,并且李氏杆菌引起的疾病为人畜共患病,对于人们的安全具有重要的隐患。当发现患病羊只时,需要及时将该病羊进行隔离并治疗,有效减少该病的发生。