羊口疮病是由痘病毒科、副痘病毒属的羊口疮病毒导致的疾病,绵羊和山羊均可感染,且3~6月龄的羊发生此病的风险更高,气候多变的春季、秋季是该病的高发季,但是若仅出现单纯的羊口疮病,死亡率较低,一旦出现混合感染的情况,死亡率可增加20%~50%
[1]。目前,养羊业的发展朝着集约化、规模化方向转变,导致羊只的饲养数量增加、密度增大,在一定程度上使得羊口疮病的发生有日趋增加的趋势,给养殖户造成严重的经济损失,甚至影响人类的健康,威胁公共卫生安全。因此,为了保证养羊业高质量、可持续的发展,践行绿色发展理念,做好该病的科学诊断以及日常防控至关重要。
1 诊断技术
1.1 临床症状诊断
当羊患口疮病后,口唇、蹄部以及外阴部出现相关症状。有一些红色的小斑点出现在口角、嘴唇旁边,逐渐转变为小颗粒、充满液体的脓疱,最终出现破裂并形成硬壳,若病情进一步严重,口唇部由于肉芽组织过度生长而导致出现肿块以及大面积溃疡,严重影响羊只的正常采食。病羊口腔有灰白色的水泡,随着病情发展,口腔内的水泡出现化脓或者溃疡的现象,溃烂部位呈紫色或者黑红色。蹄叉、蹄冠等部位出现水疱,随着病情的发展,水疱会发展为脓疱,当脓疱破裂后会形成溃疡面,若未得到及时治疗,可能导致蹄壳脱落。阴唇、阴蒂等部位出现脓疱、溃疡以及疮疤,外阴部病变导致不能正常交配而影响繁殖性能,并且会出现妊娠母羊流产、难产等情况
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在养殖过程中,由于羊口疮与口蹄疫、羊痘、溃疡性皮炎等疾病有相似的临床症状,稍有不慎可能出现误诊的情况,因此临床症状仅可作为基层养殖中的初步判断,若要确诊,则需进行专业的实验室诊断。
1.2 实验室诊断
1)分子生物诊断。聚合酶链式反应技术(PCR)作为传统的分子生物诊断技术,第一步是检测出所有的副痘病毒,可以基于口疮病毒的保守基因
B2L或者
F1L进行检测;第二步是区分副痘病毒的种类,此时需要DNA测序技术。以口疮病毒的
F1L基因序列设计合成引物所构建的口疮病毒的PCR检测方法,可以扩增出390 bp的目的基因片段,但不能扩增出羊痘病毒、山羊病毒性关节炎病毒的目的条带,PCR技术可以检测出羊口疮病毒
[1]。PCR技术具有测定成本相对较低、特异性较高、操作简便等优点,但存在敏感性偏低、容易污染、试验时间长、结果假阴性、无法定量等弊端,适用于不需要定量的基层或者大型养殖场
[1]。
实时荧光定量PCR技术(qPCR)是对淬灭荧光基团和报告荧光基团用TaqMan探针进行标记,序列与目标序列上下游引物之间的一段DNA模板完全互补,每扩增1条DNA链,就会有1个TaqMan探针被水解,这样淬灭荧光基团和报告荧光基团就会被分离出来并得到释放的荧光信号,同步积累荧光信号和增加PCR产物。qPCR技术具有特异性强、灵敏度高、PCR后续无需处理、节约时间和成本等优势,且由于自动化程度较高,可以避免在试验过程中出现污染。但是也存在试验结果受酶活性的影响较大、淬灭不彻底、检测结果很难判断实际的扩增特性。适用于设施条件较好、工作人员专业素质较强的规模化养殖场,不适用于条件较差的养殖场。
叠氮溴化丙锭结合PCR技术(PMA-PCR)是将叠氮溴化丙锭技术与PCR技术结合起来的一项技术,死亡病原体的细胞膜完整性被破坏而导致病原体的DNA处于游离状态,这时PMA就可以与病原体的DNA发生反应;由于活病原体的细胞膜是完整的,故PMA不能穿透,因此在试验过程中可以通过适当的PMA浓度和适当的曝光时间将活病毒和失活的病毒进行区分,并且也可以区分口蹄疫病毒、山羊痘病毒和绵羊痘病毒
[1]。该方法具有可以区分活菌和死菌的特点,但是在操作过程中会受到较多因素的影响,无法区分完整细胞膜和无代谢活性的死菌等。适用于实验室测定,不适合基层养殖场。
2)血清学诊断。酶联免疫吸附实验(ELISA)的原理为在固相载体表面结合抗原或者抗体,利用抗原抗体特异性结合的特点使特定底物发生显色反应,从而获得免疫分析的结果,目前国内外主要针对F1L和B2L 2个蛋白建立间接ELISA法。该方法具有可同时检测大量样品、试验条件要求不高、特异性强、成本低、仪器简单等优势,适用于现场检验;但是其特异性和灵敏性有待提高。
琼脂扩散试验为在琼脂凝胶中利用兔抗羊口疮高免血清与羊口疮病毒(即可溶性抗原与抗体)发生1种沉淀反应,而不与山羊痘病毒、口蹄疫病毒的抗原发生交叉反应。该方法可用于定性检测,也可用于半定量检测,适用于基层养殖场,但是可能存在假阴性的结果
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2 预防措施
2.1 免疫接种
通过接种羊传染性脓疱皮炎活疫苗(10头份/瓶)来有效预防羊口疮病的发生,免疫期为3个月;各品种、各年龄阶段的绵羊、山羊均可接种。按照每只羊使用0.2 mL的剂量以下唇黏膜划痕接种的方式进行接种,在使用时用稀释液进行稀释;在羊口疮病流行的一些养殖场,按照每只羊使用0.2 mL的剂量以股内侧划痕接种的方式进行接种
[4]。对于特殊阶段的羊群,则需另外安排,新生羔羊需要在断奶后进行接种;妊娠母羊需要在母羊分娩前1个月进行接种。为了确保接种后的效果,需要做好疫苗的保存(-15 ℃以下保存,有效期为10个月)、运输、稀释等环节,同时也要严格按照使用说明书的要求进行,避免由于接种问题导致未达到预期的效果。
2.2 加强卫生消毒
由于羊口疮病属于传染病,做好卫生消毒工作可以有效预防该病的发生,并且也能有效遏制进一步传播和扩散。一是保证圈舍的清洁卫生,每日及时将羊只排泄的粪尿、脱落的皮毛等进行彻底的清扫,避免长期堆放造成病原微生物的滋生;二是对圈舍内部坚持每周1次的消毒,当该病的高发季或者发生过该病的养殖场则需要增加消毒频次,在喷雾器中添加2%~4%氢氧化钠溶液、(1∶1 800)~(1∶3 000)百毒杀溶液、10%漂白粉溶液、4%福尔马林溶液等消毒液,以喷洒的方式对地面、墙面、围栏等进行消毒,对于饮水池、饲料槽,需要在消毒之后使用清水冲洗干净后使用;三是圈舍外部的运动场每个月消毒2次,在喷雾器中加入4%氢氧化钠溶液、3%过氧乙酸溶液等消毒液,通过喷洒的方式进行消毒;四是在圈舍门口设置消毒室,工作人员在进出圈舍时均要通过紫外线消毒的方式进行消毒,在场区门口设置消毒池,并在池内加入4%氢氧化钠溶液、3%过氧乙酸溶液对进出车辆进行消毒
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2.3 加强管理
一是加强隔离饲养,发现可疑羊只应立即将其进行单独隔离饲养,避免造成该病的传播,并将其原来生活的圈舍进行彻底的消毒,同时同圈舍内的羊只不能转群,直到风险解除后再进行转群。二是改善饲养管理措施,工作人员不断学习先进、科学的饲养管理技术,保证羊只营养摄入的充足以及生活环境的舒适,从而提高羊只的免疫力和抵抗力,降低羊口疮病的发生率。三是保护羊只皮肤和黏膜的安全,羊口疮病主要对羊只的皮肤和黏膜造成伤害,因此要严禁圈舍内存在铁钉、铁丝、破碎的玻璃渣等异物,严禁饲喂羊只尖锐或者带刺的饲草料,确保羊只皮肤和黏膜不受外部因素的伤害
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3 治疗方案
3.1 局部治疗
局部治疗是羊口疮病治疗的重要环节之一。为了暴露病灶,需要使用清水对患处进行全面、彻底的清洗,使用消毒的手术刀清除病灶处的硬痂;对病灶处使用0.1%高锰酸钾溶液进行清洗并使用灭菌的纱布将水分吸干;将红霉素软膏、紫药水、碘甘油等药物涂抹至患处,每天涂抹1次,连用3 d。
3.2 全身治疗
1)西药治疗。按照每千克体重使用3~5 mg剂量的注射用头孢噻夫钠(1.0 g/支)以肌内注射的方式进行治疗,每日用药1次,连用3 d,适合治疗出现细菌感染的羊只。按照每只羊使用5~10 mL黄芪多糖注射液(10 mL∶0.1 g)以皮下或者肌内注射的方式进行治疗,每日用药1次,连用3 d,适合治疗出现病毒感染的羊只。5 mL羊痘一针灵(规格为10 mL/瓶)+2~4 mL地塞米松磷酸钠注射液(1 mL∶2 mg)混合后以肌肉注射的方式进行治疗,每日用药1次,连用3 d
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2)中药治疗。滑石120 g、熟石膏120 g、青黛60 g、薄荷60 g、黄柏60 g、煅硼砂20 g,共计440 g,称取、研磨成粉末后等分为5份,每份为88 g,取1份进行冲调、冷却后进行一次性灌服(每只患病羊的剂量),1次/d,连用5 d
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4 结 语
羊口疮病是危害肉羊养殖业的常见传染性疾病之一,不仅危害羊只健康,而且会威胁人类健康,造成公共卫生安全问题,因此做好该病的准确诊断以及科学防控具有重要意义。养殖者应提高对羊口疮病的重视程度,通过科学的诊断手段及时判断羊只情况后采取相应的治疗措施,并在养殖过程中通过免疫接种、加强卫生消毒、加强管理等措施来预防该病的发生,为羊只创造1个良好的生长环境。随着科学技术的不断发展和需求的不断增多,分子技术、血清学技术等作为先进的分析工具,除了在畜禽疾病诊断中具有广阔的应用前景,还有望在畜禽健康管理、疾病预防、新药开发等领域发挥越来越重要的作用。然而,为了充分发挥其潜力,仍需要不断解决标准化、检测成本等方面的挑战,从而推动现代诊断技术在实际养殖中的应用。