牛病毒性腹泻病毒和牛肠道病毒二重PCR检测方法的建立及病原学分析

摘要

[目的]为牛病毒性腹泻病毒（BVDV）和牛肠道病毒（BEV）的早期诊断及防控提供技术支持。[方法]在靶向BVDV和BEV 5’-UTR保守区，各设计1对特异性引物，建立1种能同时检测BVDV和BEV的二重PCR方法，运用该方法对2024-2025年采自河南、四川以及河北等地牛场患腹泻牛的50份粪便样品进行检测并进行遗传进化分析，评估该方法的特异性和灵敏度。[结果]该方法能同时扩增BVDV的223 bp和BEV的96 bp，而对其他的常见牛病原核酸扩增均为阴性。BVDV和BEV的最低检测值分别为815 copies/μL和783 copies/μL。在50份粪便样品中，BVDV和BEV的检出率分别为68%、42%，二者混合感染率为24%。测序获得12株BVDV和12株BEV的5′-UTR序列。遗传分析显示，获得的12株BVDV均属于BVDV-1m亚型。12株BEV中，有10株属于BEV-F种，余下2株属于BEV-E种。[结论]成功建立1种BVDV和BEV二重PCR检测方法，且我国部分省份牛场中主要流行的是BVDV-1m亚型和BEF-F种。

关键词

牛病毒性腹泻病毒 / 牛肠道病毒 / 二重PCR / 遗传进化