2023－2024年贵州省息烽县禽流感的监测与分析

Monitoring and analysis of avian influenza in Xifeng County in Guizhou Province from 2023 to 2024

摘要

目的 为了解贵州省息烽县禽流感免疫效果和病原污染情况，评估疫情发生风险。 方法 采用血凝与血凝抑制试验和荧光定量PCR试验，对2023－2024年在11个乡（镇、街道）种畜场、规模养殖场和散养户采集的3 785份血清样本进行高致病性禽流感H5、H7亚型免疫抗体检测，家禽销售商户采集的523份病原学样本进行H5、H7、H9亚型病原核酸检测，并按照不同病种、不同年份、不同样本来源进行结果统计和分析。 结果 2023－2024年家禽高致病性禽流感H5、H7亚型免疫抗体合格率均达到农业农村部（70%以上）规定的要求，免疫抗体合格率由高到低依次是种畜场、规模场和散养户，2023年免疫抗体合格率分别比2024年高0.78、0.58百分点。样本中未检测到H5、H7亚型核酸阳性样本，存在不同程度的H9亚型污染，2023年H9亚型核酸阳性检出率比2024年低1.4百分点。 结论 息烽县家禽高致病性禽流感免疫效果较好，但是存在低致病性禽流感H9亚型污染。建议持续开展强制免疫、免疫抗体检测，加大病原学监测频率，及时预警预报和应急处置。

Abstract

Objectives The immunization effect and pathogen contamination of avian influenza in Xifeng County was investigated and the risk of epidemic occurrence was assessed. Methods Hemagglutination and hemagglutination inhibition test and fluorescence quantitative PCR assay were used to detect the immune antibodies against highly pathogenic avian influenza H5 and H7 subtypes in 3 785 samples of serum collected from 11 township (town, street) livestock breeding stations, large-scale farms, and free-range households from 2023 to 2024. The nucleic acids of H5, H7 and H9 subtypes in 523 samples collected from poultry sales merchants were detected for H5, H7, and H9 subtype pathogenic nucleic acid. The results were statistically analyzed based on the types, years, and sample sources of diseases. Results The qualified rate of immune antibodies against highly pathogenic avian influenza H5 and H7 subtypes from 2023 to 2024 in poultry met the requirements set by the Ministry of Agriculture and Rural Affairs (over 70%). The qualified rate of immune antibodies ranked from high to low was in the order of livestock breeding stations, large-scale farms, and free-range households. The qualified rate of immune antibodies against highly pathogenic avian influenza H5 and H7 subtype in 2023 was 0.78% and 0.58% higher than that in 2024, respectively. No positive samples of H5 and H7 subtype were detected in the samples, but there was contamination of H9 subtype to varying degrees. The positive detection rate of H9 subtype nucleic acid in 2023 was 1.4 % lower than that in 2024. Conclusions The immunization effect of highly pathogenic avian influenza in poultry in Xifeng County is good, but there is contamination of low pathogenic avian influenza H9 subtype. It is recommended to continue the mandatory immunization and immune antibody detection, increase the frequency of monitoring pathogen, and provide timely measures including warning and emergency response.

关键词

禽流感 / 核酸阳性检出率 / 抗体检测 / 免疫合格率

Key words

avian influenza / positive detection rate of nucleic acid / antibody detection / qualified rate of immunization

禽流感是禽流感病毒引起的呼吸道传染性疫病，该病主要通过接触传播和呼吸道传播^[1]，可以感染鸡、火鸡、鸭、鹅、鹌鹑、雉鸡、鹧鸪、鸵鸟、孔雀等多种禽类，多种野鸟也可感染发病^[2]。根据表面的糖蛋白HA和NA，其被分为16个HA亚型和9个NA亚型^[3]。按照禽流感病毒致病性的不同，分为高致病性禽流感、低致病性禽流感和无致病性禽流感^[4]。低致病性禽流感包括H9、H10、H11等亚型禽流感^[5]，对家禽影响小，通常不会引起大面积的死亡，但是会引起家禽产蛋率下降、料肉比上升等。高致病性禽流感由H5亚型和H7亚型禽流感感染引起^[6]，家禽和野鸟感染后出现大面积死亡，同时还能感染人并致人死亡，是严重危害家禽产业和人类健康的烈性传染病之一。

贵州省息烽县是传统的农业大县，家禽产业是畜牧业的支柱产业，2024年出栏生态家禽1 178.6万羽。近年来，息烽县大力发展肉鸡养殖产业，引进四川德康等养殖企业，采用“公司+家庭农场”等模式发展壮大肉鸡产业，提出将在近2年内打造年出栏2 000万羽肉鸡的发展目标。为了持续保障肉鸡产业的快速、稳定、健康发展，本试验全面评估息烽县2023－2024年禽流感免疫效果和病原污染情况，采用血凝与血凝抑制试验和荧光定量RT-PCR试验，对采集的血清样本和病原学样本分别开展免疫效果评估和病原核酸检测，以期为禽流感科学防控提供基础数据。

1 材料与方法

1.1 样本采集

疫苗免疫情况：家禽免疫高致病性禽流感（H5+H7）三价灭活疫苗。

采样动物：主要为蛋鸡或肉鸡。

样本类型：①血清样本。家禽免疫21 d后使用无菌真空采血管采集家禽翅静脉血液样本，室温放置血液凝固后带回兽医实验室3 500 r/min离心4 min，将上层血清吸出放置在1.5 mL无菌离心管中，保存在-20 ℃冰箱中备用待检。②病原学样本。养殖场采集家禽喉咙、泄殖腔棉拭子，农贸市场除采集双棉拭子外还需要采集环境样本，样本采集后加入无菌生理盐水2 mL，带回兽医实验室保存在-20 ℃冰箱中备用待检。

样本采集范围和数量：息烽县11个乡（镇、街道）种禽场、规模养殖场、散养户；县城农贸市场家禽屠宰商户。2023－2024年共计采集血清样本3 785份，病原学样本523份。

1.2 主要仪器及检测试剂

高致病性禽流感H5、H7亚型血凝与血凝抑制试验抗原和阳性血清，禽流感病毒H5亚型实时荧光RT-PCR检测试剂盒，禽流感病毒H9亚型荧光RT-PCR检测试剂盒均购自哈尔滨国生生物科技股份有限公司；禽流感病毒H7亚型实时荧光RT-PCR检测试剂盒购自北京森康生物技术开发有限公司；荧光定量PCR仪购自美国应用生物系统公司，微量振荡仪购自山东三体仪器有限公司，移液器购自赛默飞世尔科技公司。

1.3 检测方法

参照血凝试验验证抗原效价，配置抗原溶液。按照GB/T 18936－2025《高致病性禽流感诊断技术》推荐的血凝抑制试验检测高致病性禽流感病毒H5和H7亚型抗体，统计抗体阳性率。禽流感病毒H5亚型、H7亚型、H9亚型病原学检测参照试剂盒说明书开展检测，检测结束后在荧光定量PCR仪中读取CT检测数值，按照说明书判断检测结果。

1.4 数据分析

按照不同年份、不同样本来源（种畜场、规模场、散养户）分析高致病性禽流感H5、H7亚型免疫抗体阳性率，以及病原学检测阳性率。

2 结果与分析

2.1 不同年份H5型免疫抗体合格率

由表1可知，2023－2024年全县共计检测3 785份血清样本，高致病性禽流感H5亚型平均抗体合格率为91.94%。

按照不同年份分类统计，2023平均抗体合格率比2024年高0.78百分点。按照不同的采样群体分类，种禽场的抗体合格率高于规模养殖场和散养户，散养户的抗体合格率最低，其中种禽场的平均抗体合格率比规模养殖场和散养户分别高4.01、10.48百分点。2023年和2024年种禽场、规模化养殖场和散养户抗体合格率均大于农业农村部要求（≥70%），表明不同年份、不同种群的H5亚型禽流感免疫效果较好。

2.2 不同年份H7型免疫抗体合格率

由表2可知，2023－2024年全县共计检测3 785份血清样本，高致病性禽流感H7亚型平均抗体合格率为90.75%。按照不同年份分类统计，2023年平均抗体合格率比2024年高0.58百分点。按照不同采样群体分类，种禽场的抗体合格率高于规模养殖场和散养户，散养户的抗体合格率最低。其中，2023－2024年种禽场的平均抗体合格率比规模养殖场和散养户分别高3.41、10.31百分点。2023年和2024年种禽场、规模化养殖场和散养户抗体合格率均大于农业农村部要求（≥70%），表明不同年份、不同种群的H7亚型禽流感免疫效果较好。

2.3 H5、H7、H9亚型核酸阳性率

由表3可知，2023－2024年对采集的523份病原学样本开展禽流感H5、H7、H9亚型病原核酸检测，未检测到H5、H7亚型核酸阳性样本。2023年H9亚型核酸阳性检出率比2024年阳性检出率低1.4百分点。说明息烽县H5和H7亚型高致病性禽流感发生风险较低，但是需要关注低致病性禽流感H9亚型的发病情况。

3 讨 论

高致病性禽流感发病率高、发病急、传播快、死亡快，是全世界重点关注的人畜共患传染病之一^[7]。在全球范围内每年都有大量的家禽因感染高致病性禽流感而被扑杀，造成巨大的经济损失，一旦发生高致病性禽流感将影响该地区的禽类及其产品贸易^[8]。针对高致病性禽流感的防控措施主要是采取家禽疫苗免疫、野鸟监测排查等。

本试验对息烽县2023－2024年禽流感免疫效果和病原污染情况进行分析评估，结果显示息烽县家禽高致病性禽流感H5亚型和H7亚型平均抗体合格率在90%以上，整体免疫效果较好。2023年高致病性禽流感H5亚型、H7亚型平均抗体合格率比2024年略高，种禽场的抗体合格率高于规模养殖场和散养户，散养户的抗体合格率最低。分析原因主要为种禽场和规模养殖场管理规范、免疫频次高，散养户主要集中在每年的春秋两防开展集中免疫，且散养户主要为放养模式，存在养殖户防控意识不高、补栏免疫不及时等问题，导致免疫抗体合格率相对较低。

在病原学核酸检测结果中，没有检测到H5亚型和H7亚型核酸阳性样本，但是H9亚型核酸阳性率较高，提示要注意低致病性禽流感的流行情况。统计贵阳市动物疫病预防控制中心兽医实验室检测数据，对核酸阳性样本进行溯源，发现检测到的阳性样本主要集中在农贸市场家禽屠宰销售商户，而且鸭、鹅的核酸检出率比鸡的检出率高3倍左右。笔者认为主要原因是商户活禽来源复杂，鸡、鸭、鹅混合笼养，病毒交叉感染，还存在商户防控意识淡薄、清洗消毒不及时等，形成了病毒交汇的“大熔炉”，导致核酸检出率较高。本试验只是对息烽县2023－2024年禽流感免疫和病原污染情况进行监测与统计分析，数据量较小，年份跨度短，后期将持续做好高致病性禽流感的免疫效果分析和病原监测，为家禽产业高质量发展保驾护航。

禽流感的防控仍然是以预防为主、防重于治^[9]，持续实施好强制免疫政策，稳步推进规模化养殖场“先打后补”，加强免疫抗体监测评估和病原学监测力度，及时预警预报。种禽场和规模养殖场要根据家禽种类、生产周期、疫苗毒株等情况，及时开展免疫抗体监测，调整免疫方案，优化免疫程序，提高群体免疫抗体水平。加强饲养管理，坚持自繁自养和全进全出^[10]，提高生物安全措施，做好长期规划，开展好疫病净化和无疫小区建设。散养户要加强宣传，让老百姓了解禽流感对家禽和人的危害，提高防控意识和疫苗免疫密度，及时开展补栏免疫^[11]。活禽交易市场和屠宰场要加强检疫监督，应督促商户开展清洗消毒，及时处理病死禽和粪便，规范无害化处理流程。加强病原学监测频次，发现异常及时启动应急预案，及时有效处置。

参考文献

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基金资助

贵州省第八批千层次创新型人才培养项目（筑科合同-GCC-〔2024〕022）

贵州省科技计划项目“种鸡场多血清型耐药人畜共患致病菌的净化及防控技术研究”（黔科合支撑〔2024〕一般086）

贵阳市人才创新创业资助项目“蛋鸡禽流感部分血清型流行病学调查”(筑人才办合同字〔2015〕31号)