猪戊型肝炎病毒血清学流行病学的调查研究

Investigation on serological epidemiology of porcine hepatitis E virus

摘要

目的 了解贵州省玉屏县猪戊型肝炎病毒（HEV）的流行情况，为该病的防控提供科学依据。 方法 从玉屏县4个乡镇（街道）的11个猪场随机采集血清样品241份，采用ELISA方法检测血清HEV IgG抗体，并统计不同乡镇（街道）、养殖模式、生长发育阶段及性别猪群HEV抗体阳性率。 结果 6个猪场中共有47份血清样品为HEV抗体阳性，平均场阳性率和样品阳性率分别为54.55%、19.50%。不同乡镇（街道）的场阳性率和样品阳性率分别为33.33%~66.67%和14.06%~23.73%；大型养殖场和散养场猪群HEV抗体阳性率均显著高于中小型养殖场（P＜0.05），分别为26.76%、23.58%和4.69%。不同发育阶段猪群HEV抗体阳性率差异显著（P＜0.05），其中繁殖母猪和仔猪的阳性率最高，分别为31.25%和22.73%，保育猪和育肥猪的阳性率分别为10.34%和13.58%。公猪和母猪HEV抗体阳性率差异不显著（P＞0.05），分别为15.78%和21.21%。 结论 HEV在玉屏县的猪群中广泛流行，且其感染率与猪群的发育阶段和养殖模式密切相关。未来可根据上述风险因素制定相应的防控措施，以有效控制HEV的传播。

Abstract

Objectives The prevalence of porcine hepatitis E virus (HEV) in Yuping County, Guizhou Province was investigated to provide a scientific basis for the prevention and control of porcine HEV. Methods 241 samples of serum were randomly collected from 11 pig farms across four townships or streets in Yuping County, Guizhou Province. ELISA was used to detect IgG antibodies in serum. The positive rate of HEV antibody in pig herds of different townships (streets), modes of breeding, stages of growth and development, and genders was statistically analyzed. Results 47 samples of serum from 6 pig farms were positive for HEV antibodies, with an average positive rate of farm and sample of 54.55% and 19.50%, respectively. The positive rate of farm and sample in different townships (streets) was 33.33%-66.67% and 14.06%-23.73%, respectively. The positive rate of HEV antibodies in large-scale farms (26.76%) and backyard farms (23.58%) was significantly higher than that in small- and medium-scale farms (4.69%) (P < 0.05). There was a significant difference in the positive rate of HEV antibodies among pig populations at different stages of development (P<0.05), with the highest positive rate observed in breeding sows and piglets, at 31.25% and 22.73%, respectively. The positive rate in nursery pigs and fattening pigs was 10.34% and 13.58%, respectively. No significant difference (P > 0.05) was found between boars (15.78%) and sows (21.21%). Conclusions HEV is widely prevalent in pig populations in Yuping County, Guizhou Province, and its infection rate is closely related to the stage of development and the mode of farming in the pig population. The corresponding measures of prevention and control for HEV in the future can be developed based on the risky factors mentioned above to effectively control the spread of HEV.

关键词

猪 / 戊型肝炎病毒 / 血清学调查 / 风险因素 / 场阳性率

Key words

pigs / hepatitis E virus (HEV) / serological investigation / risky factors / positive rate of farm

戊型肝炎病毒（hepatitis E virus, HEV）是一种可通过消化道传播的单股正链RNA病毒，能够引发急性病毒性肝炎，对公共卫生构成重大威胁^[1]。根据其基因组特征，HEV可分为8个基因型（HEV-1至HEV-8）。其中，HEV-1和HEV-2仅感染人类，而HEV-3和HEV-4具有更广泛的宿主范围，能够感染人类、猪和兔等多种哺乳动物^[2]。猪作为HEV的重要宿主，在病毒传播过程中扮演重要角色。HEV-3和HEV-4可通过直接接触或食用被感染的肉类传播给人类。因此，监测猪群HEV流行情况对预防和控制该病毒在人群中的传播具有重要意义^[3]。

研究表明，我国猪群中HEV的感染情况较严重，但不同地区的感染率存在较大差异。王树鹏等^[4]对内蒙古包头地区（2018－2020年）猪群中HEV流行情况进行调查，结果显示该地区猪群HEV总抗体阳性率为78.49%；赵婵娟等^[5]通过聚合酶链式反应（PCR）调查我国西南部分地区（2022－2024年）猪HEV感染情况，发现被检测样品HEV核酸阳性率为0.58%。唐建华等^[6]研究发现，拉萨－林芝公路沿线藏猪HEV抗体阳性率为41.32%。近年来，贵州省玉屏县生猪养殖业发展迅速，猪HEV的流行严重威胁猪场工作人员、屠宰加工人员及消费者的健康。为了解贵州省玉屏县猪群中HEV的流行情况，本研究采用ELISA方法检测玉屏县部分乡镇（街道）猪群中HEV IgG抗体水平，初步评估HEV的流行情况，旨在为该病的防控提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 样品来源

2024年4月－2025年6月，从玉屏县大龙街道、田坪镇、朱家场镇和亚鱼乡的11个猪场中共采集241份猪血清样品，其中散养场（n=5）、中小型养殖场（n=3）和大型养殖场（n=3）来源血清样品数量分别为71、64、106份。从猪只前腔静脉采集静脉血样品3~5 mL/头，置于凝血管内，待血清析出后将上清移至新的离心管内，标记相关信息后保存于-20 ℃，待检。

1.2 HEV IgG抗体检测

HEV-免疫球蛋白G（IgG）抗体双夹心酶联免疫检测（ELISA）试剂盒购于上海荣盛生物药业有限公司。根据试剂盒说明书对血清样品进行处理和检测，每次试验均设置3个阴性对照孔和3个阳性对照孔。在阴性对照（OD_{450 nm}≤0.1）和阳性对照（OD_{450 nm}≥0.8）结果均符合标准的前提下，设定临界值=阴性对照OD_{450 nm}+0.12。若样品OD_{450 nm}＜临界值，则判定为HEV IgG抗体阴性；若OD_{450 nm}＞临界值，则判定为HEV IgG抗体阳性。

1.3 数据处理

使用Excel 2010软件对检测数据进行整理和统计分析，采用SPSS 22.0软件进行卡方检验，以分析不同组别（包括乡镇、养殖模式、性别和发育阶段）之间猪HEV抗体阳性率差异是否具有统计学意义。以“P＜0.05”表示各组间HEV抗体阳性率差异显著。

2 结果与分析

2.1 猪HEV血清抗体检测结果

由表1可知，6个猪场中有47份血清样品为HEV IgG抗体阳性，平均场阳性率和样品阳性率分别为54.55%、19.50%。其中，大龙街道、田坪镇、朱家场镇和亚鱼乡猪群HEV血清抗体场阳性率分别为33.33%、66.67%、50.0%和66.67%，经卡方检验发现玉屏县不同乡镇猪HEV场阳性率差异不显著（x²=0.910，P=0.823＞0.05）。大龙街道、田坪镇、朱家场镇和亚鱼乡猪群HEV血清抗体样品阳性率分别为14.06%、23.73%、22.0%和19.12%，经卡方检验发现不同乡镇样品阳性率差异不显著（x²=2.09，P=0.505＞0.05）。

2.2 养殖模式和季节对猪HEV血清抗体阳性率的影响

为进一步调查不同养殖模式和采样季节对玉屏县猪HEV流行情况的影响，根据养殖模式将被调查猪场分为散养场（n=5）、中小型养殖场（n=3）和大型养殖场（n=3）。检测结果如表2所示，散养场、中小型养殖场和大型养殖场猪群中HEV抗体阳性率分别为26.76%、4.69%和23.58%；不同养殖模式下猪HEV感染率存在显著差异（x²=12.453，P=0.002＜0.05），其中散养场和大型养殖场猪HEV抗体阳性率均显著高于中小型养殖场（P＜0.05）。本研究采集的血清样品主要集中在春防（4－5月）和秋防（9－10月），结果显示春防和秋防来源血清样品的HEV阳性率差异不显著（x²=0.402 3，P=0.525 8＞0.05），分别为20.74%和17.92%

2.3 发育阶段和性别对猪HEV血清抗体阳性率的影响

根据猪的发育阶段，将被调查的猪群分为仔猪（n=22）、保育猪（n=58）、育肥猪（n=81）和繁殖母猪（n=80）。调查结果如表3所示，不同发育阶段猪群的HEV抗体阳性率存在显著差异（x²=11.66，P＜0.05），仔猪、保育猪、育肥猪和繁殖母猪HEV抗体阳性率分别为22.73%、10.34%、13.58%和31.25%，其中繁殖母猪HEV抗体阳性率显著高于保育猪和育肥猪（P＜0.05）。根据性别将被调查猪群分为公猪和母猪，结果发现二者之间HEV感染率分别为15.78%、21.21%，差异不显著（x²=0.818 5，P=0.370＞0.05）。

3 讨 论

HEV感染可引起自限性肝炎，是严重威胁公共卫生的重要病原之一^[5]。HEV能够感染多种宿主，其中猪是HEV的易感动物之一。大多数猪感染HEV后不表现出明显的临床症状，但可以通过粪便、尿液和乳汁向外排毒，因此，猪场工作人员或消费者可能通过直接接触或食用被HEV污染（感染）的粪便、尿液或肉制品而感染该病。目前，对于HEV的检测主要包括血清学检测和分子生物学技术，其中ELISA检测HEV IgG抗体是初步评估HEV流行情况的常用方法^[6-8]。

本研究采用ELISA技术对玉屏县猪群中HEV血清IgG抗体进行检测，以初步评估该地区猪群HEV流行情况。结果显示，该地区猪HEV抗体场阳性率和样品阳性率分别为54.55%、19.50%。其中，被调查的4个乡镇（街道）场阳性率和样品阳性率分别为33.33%~66.67%和14.06%~23.73%，表明HEV在被调查的乡镇（街道）广泛流行。然而，本研究所调查的猪场和采集血清样品数量相对较少，未来需采集更多样品以全面地评估该地区猪群HEV的流行特征。

进一步分析养殖模式对猪HEV流行情况的影响发现，中小型养殖场猪HEV抗体阳性率显著低于散养户和大型养殖场。一方面，散养场由于饲养管理水平相对较低，猪群可能接触其他HEV易感动物（如犬、猫和鼠），从而增加感染风险；另一方面，大型养殖场虽然饲养管理水平较高，但多采取自繁自养模式，且养殖密度较大。由于HEV主要通过“粪－口”途径进行水平传播及垂直传播，且该病在猪群中通常不表现明显的临床症状，容易被忽视，故大型养殖场中猪群的HEV感染风险相对较高。相比之下，中小型养殖场多采用代养模式，外购仔猪育肥后出售，养殖周期较短，HEV在猪群中大规模流行的潜在风险相对较低。

分析不同发育阶段猪群的HEV感染率差异可见，繁殖母猪的HEV抗体阳性率最高，仔猪次之，而保育猪最低，这与陈冰清等^[2]研究结果一致。HEV可通过水平传播感染其他易感动物，因此猪群随着年龄增长接触HEV的几率增加，从而导致HEV抗体阳性率逐渐升高。此外，HEV还可以通过垂直传播由妊娠母猪传染给胎儿，哺乳期仔猪可通过吮吸含HEV的乳汁而被感染^[11]。因此，在养殖过程中，应定期监测猪群HEV流行情况，对检测出HEV抗体或核酸阳性的猪群及时进行淘汰处理。同时，加强粪污清理和环境消毒，以有效防控该病的发生，降低其对猪群健康和公共卫生的潜在威胁。

值得注意的是，本研究存在一些局限性。首先，调查猪场的数量相对较少，虽然不同乡镇或养殖模式猪场的场阳性率差异存在较大差异，但其尚未达到统计学显著水平，未来需要纳入更多猪场来全面分析潜在的风险因素。其次，本研究仅通过ELISA方法检测了猪群血清中的HEV IgG抗体水平，未能全面反映该地区猪群HEV的真实流行情况。未来可结合检测HEV IgM抗体水平或采用分子生物学技术（如RT-PCR）检测HEV RNA核酸，以更准确地评估该病原在猪群中的实际流行情况，从而为疾病的防控和净化提供依据。

参考文献

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