鸡毒支原体病(mycoplasma gallisepticum,MG)是由鸡毒支原体感染引起的慢性呼吸道传染病,又称鸡败血支原体病,具有致病率高、传染性强、传播范围广的特点。鸡群受环境应激、饲养管理不当等因素影响致免疫力下降时,病原可通过飞沫水平传播或种蛋垂直传播侵入机体引发疾病。该病原具有独特免疫逃逸机制,易导致鸡群持续感染、隐性带毒及繁殖障碍,发病初期症状隐匿、易延误诊治,造成严重经济损失。因此,需构建科学防控体系,坚持 “早发现、早诊断、早治疗”,保障养禽业健康发展。
1 发病原因
鸡毒支原体是一类介于细菌和病毒之间的原核生物,无细胞壁,其表面由细胞膜包裹,形态呈细小球杆状。鸡毒支原体病传播的方式主要有垂直传播和水平传播两种,其中垂直传播是雏鸡早期感染的重要途径:由于鸡只具有特殊的生理结构,鸡毒支原体可定植于母鸡呼吸道黏膜,进而侵入卵巢传递给雏鸡,导致雏鸡出壳后即成为隐性感染者;水平传播则是通过飞沫传播实现,病鸡呼吸道分泌物形成的气溶胶可污染周围环境,健康鸡接触被污染环境和污染物后,病原经呼吸道侵入机体,这些因素为支原体的传播扩散提供了有利条件,最终诱发鸡毒支原体病
[1]。
近年来,相关研究发现鸡毒支原体的致病机制更为复杂,主要体现在两个方面:一方面,鸡毒支原体可分泌磷脂酶A、过氧化氢等毒性物质,这些物质可直接破坏鸡呼吸道上皮细胞的细胞膜完整性,导致上皮细胞坏死、脱落,同时释放炎症因子,引发呼吸道黏膜充血、水肿;另一方面,最新研究证实该病原具有独特的免疫逃逸机制,其表面抗原可发生相位变异,能够逃避宿主抗体的识别与攻击,且能侵入巨噬细胞内繁殖,从而导致患鸡发生持续感染
[2]。
2 临床症状
雏鸡感染MG后症状呈阶段性发展:初期食欲减退、精神萎靡、频繁咳嗽、呼吸啰音、流泪、眼睑肿胀、体重增长慢,流黏液性或浆液性鼻液,堵塞鼻孔致张口、伸颈呼吸;中期下部呼吸道积聚炎性渗出物,啰音及呼吸困难加重;后期鼻腔鼻窦渗出物导致眼睑肿胀,个别雏鸡单侧或双侧失明
[3]。成年鸡感染MG后生产性能下降,表现为蛋壳质量变差、产蛋量、受精率及孵化率降低,部分种蛋可孵出病雏、弱雏。病情严重时继发感染肺炎、心包炎、肝被膜炎等。
3 病理变化
鸡毒支原体病的病理变化主要集中于呼吸道,剖检可见鼻腔内充满黏液性或干酪样分泌物,气管壁明显水肿,呼吸道黏膜充血水肿、上皮肥厚增生。肺组织有大量单核细胞与异嗜性细胞浸润;肝脏、脾脏异常肿大且质地变硬,表面附着大量纤维素性渗出物;关节腔积液显著增多,内含大量异嗜性细胞,进而致关节肿胀。
4 诊断方法
4.1 病原分离鉴定
无菌采集患鸡气管、肺等组织病料,处理后制作成混悬液,接种于支原体专用琼脂培养基进行恒温培养,培养72 h后观察培养基上的菌落形态,若出现典型的“煎蛋”状菌落
[4],可将菌落挑取出来重新接种,经过纯化培养后获得鸡毒支原体纯培养物,接着将纯培养物进行离心处理,取离心后底部沉淀物制作成涂片,随即使用姬姆萨染色液对涂片进行染色,染色完成后进行显微镜镜检,若镜下观察到蓝紫色或紫红色细颗粒状或丝状结构,则可初步断定该患鸡感染了鸡毒支原体病
[5]。
4.2 血清学检查
1)血清凝集试验。无菌条件下采集患鸡鸡翅下的静脉血,向采集的静脉血中滴入备好的染色抗原,随后将新鲜血液与染色抗原进行充分混合,混合后静置2 min,根据混合液的性状判断检测结果;若混合液中出现蓝紫色凝块则可判定为阳性,表示该患鸡感染鸡毒支原体;混合液无任何变化,保持均匀状态,则可定为阴性,表示未检测到鸡毒支原体感染。
2)平板凝集试验。无菌条件下采集鸡翅下静脉血,将采集到的静脉血用磷酸盐缓冲盐水进行二倍系列稀释处理,随即将稀释后的血清与抗原按1∶1的比例混匀,静置2 min后则可判断检测结果,该检测方法经济实惠、敏感性高,常用于大型养鸡场的规模化筛查与诊断。
4.3 分子生物学检测
目前,常用于诊断鸡毒支原体病的分子生物学检测方法主要有环介导等温扩增技术(LAMP)、聚合酶链式反应(PCR)以及核酸探针技术等
[6]。其中,环介导等温扩增技术在鸡毒支原体病诊断中已得到初步应用,该技术无需依赖精密PCR仪,在65 ℃恒温条件下即可实现核酸扩增,检测时间仅需1~2 h,敏感性与PCR相当,且结果可通过显色反应直观判断,适合规模化养殖场现场诊断。该技术操作简便、成本低廉,具有广阔的应用前景。PCR技术具有灵敏度高、特异性强的特点,可广泛应用于支原体的检测与诊断;而核酸探针技术的检测物质较为单一,且敏感性较低,目前主要用于实验室精准鉴定,在临床推广应用中存在一定局限性。
5 鉴别诊断
鸡毒支原体病与鸡传染性鼻炎、鸡传染性喉气管炎、鸡传染性支气管炎等疾病的临床症状极为相似,易发生误诊,为确保临床诊断的可靠性和准确性,诊断时需严格鉴别,具体要点如下:
1)鸡传染性鼻炎。主要表现为水样鼻汁、眼睑粘连、流泪不止等症状,该病发病急、病程短,常规药物治疗后可在2周内治愈,与鸡毒支原体病慢性病程、症状渐进加重的特点有明显区别。
2)鸡传染性喉气管炎。症状为甩头咳嗽、伸脖怪叫、鸡冠发绀、呼吸困难。剖检后其病变组织主要集中于患鸡喉头、气管上部,与鸡毒支原体病主要累及全呼吸道及气囊的病理特征可明确区分。
3)鸡传染性支气管炎。该病传染性强、传播速度快,多发生于3月龄以下的雏鸡,死亡率高达30%。该病与霉形体病发生混合感染,会显著提高患鸡死亡率,鉴别时可结合病理变化及检测结果区分。
6 防控措施
6.1 加强饲养管理
加强饲养管理是预防鸡毒支原体病的基础,可降低鸡群应激,减少发病。应做好舍内通风换气,避免有害气体刺激呼吸道;根据季节变化调控温湿度,冬季可借鉴北方“梯度通风+保温联动”模式,用智能通风设备控制风速在0.3 m/s以下,搭配恒温系统,将昼夜温差控制在3 ℃内,避免冷应激诱发感染;需制定科学消毒计划,进鸡前25 d进行2次熏蒸消毒和1次喷雾消毒,进鸡后每3~4 d轮换使用过氧乙酸与季铵盐类消毒剂带鸡消毒,阻断粪污堆积滋生的细菌传播。同时,根据鸡只生长阶段合理搭配饲料,保证营养供给,选择干燥通风处贮存饲料,做好防潮措施,避免饲料因受潮而发生霉变诱发鸡群免疫抑制,降低支原体感染风险。
6.2 优化免疫程序
疫苗接种是预防鸡毒支原体病最有效的手段,常用疫苗有灭活苗(β-丙内酯灭活苗)与弱毒苗(减毒株F、ts-11、MG6/85)
[7]。其中,β-丙内酯灭活疫苗主要适用于幼龄鸡与产蛋鸡,采用皮下注射,幼龄鸡与产蛋鸡接种剂量均为0.2 mL/羽,该疫苗具有安全性高、稳定性好等优点,但免疫保护效果存在一定局限性,无法提供长期高效的免疫保护。减毒株F弱毒苗免疫保护效力强、作用时间久,可通过滴眼方式接种,但其毒力较野毒株弱,存在毒力反强致病风险;ts-11弱毒苗的毒力相对更弱,主要通过点眼给药,能降低规模化养殖场鸡毒支原体感染率;MG6/85株可通过喷雾的方式接种,能有效抵抗鸡毒支原体强毒株的攻击。免疫接种后需定期进行抗体水平监测,采用ELISA法检测血清中特异性抗体效价:首免后21 d抗体效价≥1∶32为免疫合格,二免后抗体效价≥1∶64为免疫合格,不达标应及时补免。
7 治疗方案
7.1 西医疗法
对患鸡毒支原体病的鸡只进行西医治疗时,可将泰乐菌素与适量清水混合,配制成0.05%的泰乐菌素饮水溶液,供鸡群自由饮用,连续饮用3~5 d即可达到较好的治疗效果
[8];另一种方式为饲料添加给药,在鸡饲料中添加500 mg/kg的泰乐菌素,将泰乐菌素与饲料搅拌均匀后饲喂鸡群,连续饲喂3~5 d,治疗效果显著。
7.2 中医疗法
中医治疗鸡毒支原体病,应遵循“清热宣肺、止咳平喘、清热解毒”的原则,具体方案如下:方案一,取麻黄50 g、黄芩50 g、穿心莲50 g、鱼腥草100 g、板蓝根50 g,将上述药物混合后研磨成粉末,按药物与饲料1∶10的比例混匀,随即连续饲喂3~5 d。该方剂具有清热解毒、宣肺止咳的功效,适用于鸡毒支原体病单纯感染病例,治愈率可达70%~80%,能有效缓解频繁咳嗽、呼吸困难等症状。方案二,取麻黄30 g、炙甘草30 g、石膏150 g、杏仁30 g、知母50 g、贝母50 g、桔梗30 g,混合后研磨成粉末,药物与饲料按3∶100比例混匀后连续饲喂5~7 d。适用于病情较重、呼吸道啰音明显的患鸡,治愈率可达75%~85%
[9]。
7.3 中西医结合治疗
中西医结合治疗鸡毒支原体病,可提高治愈率且降低复发率,适合慢性感染与混合感染鸡群。具体方案:方案一,替米考星按20 mg/kg体重每日1次自由饮水,配合中药方剂一,按1∶10比例混饲,连续治疗5 d,治愈率达90%以上,比单一疗法提高10%~15%,且复发率低于5%。方案二,泰万菌素按15 mg/kg体重每日1次自由饮水,搭配麻杏石甘口服液0.5 mL/(只·d)灌服,连续治疗5~7 d,对耐药菌株感染治愈率达85%以上,适合规模化养殖场推广应用。
8 结 语
综上所述,鸡毒支原体病的病程隐匿,易继发混合感染。养殖生产中应强化饲养管理,规范免疫接种流程,发病后采取中西医结合方案对症防控与治疗,以此提高疫病治愈率,减少养殖生产损失。后续仍需深入探究病原免疫逃逸机制,研发高效疫苗与疗法,不断完善防控体系,为养禽业可持续发展提供支撑。