鼠抗人DCP单克隆抗体的类型转换与表达

摘要

为建立抗体类型转换和表达体系，以最新制备的1株IgM类抗体——鼠抗人DCP单克隆抗体7C2为研究对象，首先从7C2杂交瘤细胞中克隆IgM轻重链可变区，再将IgM可变区序列与鼠IgG1恒定区序列融合克隆至真核表达载体，并转入293细胞系中。利用蛋白质免疫印迹技术，成功检测到IgG1抗体在细胞内的表达并分泌至培养上清。在进一步优化密码子、宿主细胞和信号肽等影响抗体表达的因素后，建立了双质粒瞬转和基于双顺反子表达方式的稳转表达体系，可用于将鼠源IgM类抗体转换为IgG类抗体并进行表达。该研究为拓展非IgG类抗体的应用范围提供重要途径，同时为提高重组抗体在真核体系中的表达效率提供参考。

关键词

单克隆抗体 / 基因工程 / 抗体类型转换 / 表达条件优化