家兔BMP2基因的克隆及其对毛乳头细胞增殖的影响

摘要

为探究家兔骨形成蛋白2 (BMP2)基因对毛囊生长发育的影响，通过分子克隆获取家兔BMP2基因的编码序列，采用生物信息学对BMP2编码序列的生物学特性进行初步分析；并通过构建BMP2过表达载体和设计干扰序列，在毛乳头细胞(DPC)中过表达和敲低BMP2,利用qRT-PCR技术分析BMP2基因对毛囊发育相关基因(SFRP1、SFRP2、STAT1、CTNNB1、BCL2、HOXC13、EGF) mRNA表达的影响；通过CCK-8检测BMP2基因对DPC细胞增殖的影响。结果表明：家兔BMP2基因CDS全长为1 188 bp,编码395个氨基酸；在DPC细胞中过表达BMP2后，SFRP1、SFRP2、STAT1基因表达量极显著提高，CTNNB1、BCL2、HOXC13基因表达量极显著下降，EGF基因表达量显著下降；siRNA-3敲低BMP2基因的表达后，SFRP1基因表达量显著下降，SFRP2、STAT1基因表达量极显著下降，CTNNB1、BCL2基因表达量极显著提高，HOXC13、EGF基因表达量显著提高。此外，BMP2能显著抑制DPC细胞增殖。综上，BMP2对动物毛囊发育具有重要的调控作用，能影响毛囊发育相关基因的表达，并抑制DPC细胞增殖。

关键词

家兔 / 骨形成蛋白2基因 / 毛乳头细胞 / 基因表达

基金资助

国家现代农业产业技术体系建设专项(CARS-43-A-1); 国家自然科学基金资助项目(32102529、32072724)