GETV E1蛋白单克隆抗体制备及抗原表位鉴定

黄艳梅; 孟慧; 朱立麒; 牟春晓; 陈振海

doi:10.16872/j.cnki.1671-4652.2025.01.006

扬州大学学报（农业与生命科学版） ›› 2025, Vol. 46 ›› Issue (01) : 44 -51. DOI: 10.16872/j.cnki.1671-4652.2025.01.006

GETV E1蛋白单克隆抗体制备及抗原表位鉴定

黄艳梅, 孟慧, 朱立麒, 牟春晓, 陈振海

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摘要

为制备针对盖塔病毒（Getah virus, GETV） E1蛋白的单克隆抗体，将GETV E1基因的亲水区片段（31～182位氨基酸区域）构建至pCold-TF原核表达载体中。经表达、纯化，制备TF-E1重组蛋白，并以其为免疫原免疫小鼠，借助杂交瘤技术，成功获得1株针对GETV E1蛋白的单克隆抗体。对获得的E1单抗进行生物学特性鉴定，结果表明：制备的E1蛋白单抗适用于间接免疫荧光和Western blot鉴定。同时，通过截短表达E1蛋白，进一步明确了E1蛋白单克隆抗体识别的抗原表位为⁷³RPDYQC⁷⁸,将此抗原表位与GenBank已上传的GETV毒株序列进行比对，发现该序列在GETV毒株中高度保守。综上，GETV E1蛋白单克隆抗体的成功制备，可为GETV的研究提供免疫学工具。