芍药花扣囊复膜酵母发酵液对H₂O₂诱导的细胞衰老模型抗衰老作用

摘要

为探究芍药花扣囊复膜酵母发酵液对细胞衰老的改善作用及其潜在机制，利用扣囊复膜酵母发酵制备芍药花发酵液，利用WST细胞毒性检测试剂盒评估发酵液对NIH3T3细胞活力的影响；利用DCFH-DA荧光探针检测细胞内活性氧（ROS）含量；采用罗丹明123 （RH123）荧光探针测定线粒体膜电位（MMP）;利用碘化丙啶（PI）荧光染色评估细胞核损伤情况；采用AO/EB荧光染色法和Annexin V-PI/FITC流式细胞术分析细胞凋亡情况；采用PI单染色法结合流式细胞仪分析细胞周期分布；利用分子对接技术研究芍药花活性成分与抗衰老靶点蛋白（SIRT1和酪氨酸酶）的相互作用。结果表明：芍药花扣囊复膜酵母发酵液在小于800μg·mL^-1浓度下对NIH3T3细胞无显著细胞毒性。在H₂O₂诱导的细胞衰老模型中，发酵液能显著改善细胞形态，降低细胞内ROS含量，保护线粒体膜电位，减少细胞核损伤，降低细胞凋亡率，并逆转细胞周期阻滞。分子对接结果显示，芍药花中苯甲酰氧化芍药苷与SIRT1和酪氨酸酶的结合能力最强，分别为-52.16和-46.55 kJ·mol^-1,表明其具有显著的抗衰老潜力。综上，芍药花扣囊复膜酵母发酵液在细胞保护和抗衰老方面有多重作用，其抗衰老活性可能与发酵过程中活性成分的增加有关，特别是没食子酸和苯甲酰氧化芍药苷等成分。

关键词

芍药花 / 扣囊复膜酵母发酵 / 抗衰老 / 细胞衰老模型 / 分子对接