修饰氯喹脂质体的制备及其对外泌体分泌的影响

摘要

为探讨阳离子材料与细胞穿膜肽（cell-penetrating peptides, CPPs）修饰氯喹脂质体（chloroquine liposomes, CQ-Lips）对细胞外泌体分泌的影响，采用冻融循环法制备由大豆卵磷脂、胆固醇、DOTAP、DOPC及TAT肽组成的修饰型CQ-Lips。通过CCK-8法分别评估阳离子材料不同电荷参数[DOTAP/DOPC为（5∶0）～（1∶4）]、浓度梯度(7.5、15、30 mmol·L^-1)及TAT修饰浓度（1%～9%）对细胞活性的影响，并利用Western blot定量分析不同修饰组对外泌体分泌量的调控作用，确定最优修饰参数。结果表明：阳离子材料呈现浓度依赖性细胞毒性，30 mmol·L^-1组存活率显著降低（P<0.01）,而相同浓度(15 mmol·L^-1)不同电荷比组间差异无统计学意义；TAT修饰浓度>5%时细胞活性显著下降（P<0.01）;阳离子材料(15 mmol·L^-1, DOTAP/DOPC为5∶0)联合5%TAT共修饰组促外泌体分泌效果显著优于单一修饰组（P<0.05）。综上，该研究成功构建基于TAT与阳离子材料协同修饰的CQ-Lips新型递送体系，其通过优化电荷参数与穿膜肽比例显著增强外泌体分泌功能，为外泌体高效制备技术的开发提供重要试验依据。

关键词

脂质体 / 外泌体产量 / 氯喹 / 阳离子衍生物 / 细胞穿膜肽