表达PEDV RBD结构域的重组仙台病毒构建及其免疫原性评价

魏丽萍; 李嘉睿; 潘朔楠; 施开创; 陈振海; 牟春晓

doi:10.16872/j.cnki.1671-4652.2026.01.007

扬州大学学报（农业与生命科学版） ›› 2026, Vol. 47 ›› Issue (1) : 55 -64. DOI: 10.16872/j.cnki.1671-4652.2026.01.007

表达PEDV RBD结构域的重组仙台病毒构建及其免疫原性评价

魏丽萍, 李嘉睿, 潘朔楠, 施开创, 陈振海, 牟春晓

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摘要

为构建表达猪流行性腹泻病毒（porcine epidemic diarrhea virus, PEDV） RBD结构域的重组仙台病毒（SeV）,并进行免疫原性评价，本研究通过序列优化将PEDV S基因RBD结构域（氨基酸507-757位）设计成为包含4对分子内二硫键的RBD（8C）,并构建至仙台病毒载体后获得重组质粒[pBeloBAC-SeV-PE-RBD（8C）-3Flag]。经病毒拯救与生物学特性鉴定后免疫小鼠，评估其血清和支气管肺泡灌洗液中PEDV特异性IgG和IgA的抗体水平、血清中和抗体效价以及组织中T淋巴细胞增殖能力与亚群激活比例。结果表明：重组仙台病毒能特异性表达RBD（8C）蛋白，且与野生型仙台病毒有一致的生长曲线；免疫小鼠后，重组仙台病毒能有效刺激小鼠产生特异性抗体和中和抗体，且能显著促进PEDV特异性T淋巴细胞增殖并能提高脾脏和淋巴结中CD4⁺和CD8⁺T细胞的比例。综上，该重组病毒能同时诱导小鼠产生特异性体液免疫、细胞免疫及黏膜免疫反应，该研究为PEDV疫苗的研发和优化提供了一定的试验依据。