尿酸人工抗原的合成及多克隆抗体的制备

摘要

针对小分子尿酸不具备免疫原性、难以用免疫法直接检测的问题，将尿酸用琥珀酸酐修饰，得到修饰后的尿酸半抗原，再将尿酸半抗原与牛血清蛋白和卵清蛋白偶联制得尿酸人工抗原及包被抗原，用尿酸人工抗原免疫小鼠，制备得到尿酸多克隆抗体.通过Fourier变换红外光谱法和质谱法对尿酸半抗原进行表征，通过紫外分光光度法和聚丙烯酰胺凝胶电泳法对人工抗原及包被抗原进行表征，通过间接竞争酶联免疫吸附实验(ELISA)测定抗体的效价、灵敏度和特异性.结果表明：多抗血清的效价均在1∶25 600以上，且1～4号小鼠抗体的灵敏度分别为10.337,8.426,16.457,21.177μg/mL;该抗体与尿酸的结构类似物的交叉反应率均小于1%.可见，该实验免疫制备的尿酸多克隆抗体获得了较高的效价、较高的灵敏度及较强的特异性，为尿酸的免疫检测提供了实验依据.

关键词

尿酸 / 半抗原 / 人工抗原 / 多克隆抗体