黄连素通过Nrf2/HO-1通路对过氧化氢诱导的人晶状体上皮细胞-B3损伤的影响

摘要

目的:探讨黄连素通过核因子E2相关因子2/血红素加氧酶-1(Nrf2/HO-1)信号通路对过氧化氢造成的人晶状体上皮细胞-B3(HLE-B3)损伤的影响。方法:取对数生长期HLE-B3细胞分为对照组，氧化损伤组，低、中和高剂量黄连素组，各剂量黄连素组细胞分别用含50、100和200μmol/L黄连素的培养基100μL培养24 h,之后换用含300μmol/L过氧化氢的培养基100μL培养24 h,氧化损伤组用仅含300μmol/L过氧化氢的培养基、对照组仅更换新鲜培养基培养24 h。MTT法检测细胞增殖活性，Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率，ELISA法检测丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平，免疫荧光法检测活性氧(ROS)水平，qRT-PCR法和Western blot法检测Nrf2、HO-1、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、环氧合酶-2(COX-2) mRNA和蛋白相对表达量。结果:与对照组比较，氧化损伤组细胞增殖活性，SOD和GSH-Px活性，Nrf2和HO-1 mRNA和蛋白相对表达量降低；细胞凋亡率，MDA含量，ROS水平，iNOS、COX-2 mRNA和蛋白相对表达量升高(P<0.05)。与氧化损伤组比较，低、中和高剂量黄连素组细胞增殖活性，SOD和GSH-Px活性，Nrf2和HO-1 mRNA和蛋白相对表达量升高；细胞凋亡率，MDA含量，ROS水平，iNOS、COX-2 mRNA和蛋白相对表达量降低，且高剂量黄连素作用最强(P<0.05)。结论:黄连素可抑制过氧化氢造成的HLE-B3细胞凋亡，促进增殖活性，降低氧化应激反应，其可能是通过激活Nrf2/HO-1通路发挥作用。

关键词

过氧化氢 / 人晶状体上皮细胞-B3 / 黄连素 / Nrf2/HO-1通路