流感病毒抗原荧光免疫层析双质控检测方法的建立

摘要

目的:以β-actin蛋白为内参，建立流感病毒抗原荧光免疫层析双质控检测方法。方法:使用荧光微球标记流感病毒单克隆抗体、β-actin单克隆抗体，将配对流感病毒单克隆抗体、β-actin单克隆抗体和羊抗鼠IgG多克隆抗体依次包被在硝酸纤维素膜上，分别作为检测线、内参线、质控线，试纸条组装后进行检测。优化样品垫处理液配方和喷球量后，考察试纸条线性范围、准确度、精密性，并与江苏硕世流感病毒抗原检测试剂盒（铂金法）进行方法学比对，通过ROC曲线计算试纸条敏感度、特异度、阳性和阴性预测值。结果:结合垫最佳喷球量为8μL/cm;甲、乙型流感病毒线性范围分别为2.50×10～3～320.00×10～3和6.25×10～5～800.00×10～5 TCID₅₀/L;批内、批间变异系数均小于15%;与新型冠状病毒等其他呼吸道病毒无交叉反应；与江苏硕世流感病毒抗原检测试剂盒平行检测临床样本，二者检测阳性预测值可达98%,自制试纸条检测敏感度达到90.63%。结论:建立了高敏感度的流感病毒抗原荧光免疫层析双质控检测方法。

关键词

流感病毒 / β-actin / 免疫层析 / 抗原检测