刺芒柄花素对变应性鼻炎小鼠鼻黏膜组织铁死亡和NLRP3炎症小体活化的影响

摘要

目的:探讨刺芒柄花素对变应性鼻炎小鼠鼻黏膜组织铁死亡和核苷酸结合结构域富含亮氨酸重复序列和含热蛋白结构域受体3（NLRP3）炎症小体活化的影响及其作用机制。方法:60只雄性Balb/c小鼠分为正常对照组，模型组，刺芒柄花素低、高剂量组，刺芒柄花素+EX527组，每组12只。除正常对照组外，其余各组小鼠均以卵清蛋白（OVA）为致敏原构建变应性鼻炎模型。通过行为学观察小鼠鼻部症状（抓鼻、打喷嚏）;ELISA法检测血清中OVA特异性IgE（OVA-sIgE）和组胺水平。观察小鼠鼻黏膜组织形态学变化并计数嗜酸性粒细胞、杯状细胞与肥大细胞。采用相应试剂盒检测鼻黏膜组织中活性氧（ROS）、谷胱甘肽（GSH）、丙二醛（MDA）和Fe²⁺水平；qRT-PCR法检测谷胱甘肽过氧化物酶4（GPX4）和溶质载体家族7成员11（SLC7A11） mRNA的表达；Western blot法检测沉默信息调节因子1（SIRT1）、NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白（ASC）、活化的半胱氨酸蛋白酶1（Cleaved Caspase-1）、活化的白细胞介素（IL）-1β（Cleaved IL-1β）、IL-18、GPX4和SLC7A11蛋白的表达；免疫共沉淀检测NLRP3乙酰化水平。结果:与模型组比较，刺芒柄花素低、高剂量组小鼠抓鼻和打喷嚏次数减少，血清OVA-sIgE和组胺含量降低，鼻黏膜受损程度减轻，嗜酸性粒细胞、肥大细胞和杯状细胞数减少（P<0.05）;小鼠鼻黏膜组织中ROS、MDA和Fe²⁺水平降低，GSH水平以及GPX4和SLC7A11 mRNA和蛋白表达水平升高（P<0.05）;小鼠鼻黏膜组织中SIRT1、NLRP3、ASC、Cleaved Caspase-1、Cleaved IL-1β、IL-18蛋白表达以及NLRP3乙酰化水平降低（P<0.05）。SIRT1抑制剂EX527减弱刺芒柄花素对变应性鼻炎小鼠鼻黏膜组织铁死亡和NLRP3炎症小体活化的抑制作用。结论:刺芒柄花素可能通过调控SIRT1蛋白抑制变应性鼻炎小鼠鼻黏膜组织铁死亡和NLRP3炎症小体活化。

关键词

刺芒柄花素 / 变应性鼻炎 / 沉默信息调节因子1 / 核苷酸结合结构域富含亮氨酸重复序列和含热蛋白结构域受体3 / 铁死亡 / 小鼠