葛根素对肺腺癌A549细胞增殖和TOPK活性的抑制作用

摘要

目的:研究葛根素对肺腺癌A549细胞增殖的影响及可能机制。方法:采用微尺度热泳实验检测葛根素与TOPK的结合情况；体外激酶实验检测葛根素对TOPK活力的影响。采用MTT法检测0、25、50、100、200μmol/L葛根素处理24 h A549细胞活力，软琼脂克隆形成实验检测0、25、50、100μmol/L葛根素处理A549细胞后14 d克隆形成数。Western blot法检测细胞TOPK、Histones H3和ERK1/2的磷酸化水平。A549细胞分为2组，慢病毒感染shTOPK或shMock后，用100μmol/L葛根素处理24 h,同上方法检测细胞活力及细胞中TOPK、Histone H3、ERK1/2蛋白的磷酸化水平。结果:葛根素能结合TOPK并抑制其活性。随着葛根素浓度的增加，细胞活力减弱，克隆形成数减少，TOPK、Histone H3、ERK1/2蛋白磷酸化水平呈降低的趋势(P<0.05)。与shMock组相比，shTOPK组细胞活力下降，TOPK、Histone H3和ERK1/2蛋白磷酸化水平降低(P<0.05)。结论:葛根素可能通过直接靶向结合TOPK并抑制其活性，从而抑制A549细胞增殖。

关键词

葛根素 / TOPK / A549细胞 / 裸鼠 / 肺腺癌 / 细胞增殖