TRB1通过调控内质网-线粒体接触点对脑出血大鼠血脑屏障的影响

摘要

目的:探究端粒相关蛋白1(TRB1)通过调控内质网-线粒体接触点(MERCS)对脑出血(ICH)大鼠血脑屏障(BBB)的影响。方法:30只大鼠随机分为对照组、ICH组与过表达TRB1组,每组10只。ICH组大鼠通过硬脑膜外注射0.15 U/mL的胶原酶溶液0.5 mL进行造模;对照组大鼠按照ICH造模方法操作但不注射胶原酶;过表达TRB1组大鼠造模后2 h,沿尾静脉远心端缓慢注射50μL TRB1过表达慢病毒(滴度≥10～8 TU/mL)。采用RT-qPCR法检测脑组织TRB1 mRNA水平,伊文思蓝染色检测大鼠BBB渗透性,TUNEL染色检测脑细胞凋亡情况,尼氏染色检测海马组织CA1、CA3和DG区神经元存活情况,Western blot检测脑组织Mfn1和Mfn2蛋白表达水平,透射电镜检测脑组织中MERCS数量及超微结构。结果:与对照组相比,ICH组大鼠脑组织中TRB1 mRNA水平降低,BBB渗透性增加,脑细胞凋亡指数增加,海马CA1区、CA3区与DG区神经元存活数量降低,Mfn1和Mfn2蛋白表达水平降低,MERCS数量减少(P均<0.05);与ICH组相比,过表达TRB1组大鼠脑组织中TRB1 mRNA水平增加,BBB渗透性降低,脑细胞凋亡指数减少,海马CA1区、CA3区与DG区神经元存活数量增加,Mfn1和Mfn2蛋白水平增加,MERCS数量增加(P均<0.05)。结论:过表达TRB1可能通过增加MERCS,改善ICH大鼠的BBB。

关键词

脑出血 / 血脑屏障 / TRB1 / 内质网-线粒体接触 / 大鼠