MiR-138-5p对慢性压迫性损伤大鼠神经病理性疼痛的作用及可能机制

摘要

目的:探讨miR-138-5p对慢性压迫性损伤(CCI)大鼠神经病理性疼痛的作用及可能机制。方法:采用双荧光素酶报告实验验证miR-138-5p与肿瘤坏死因子诱导蛋白1(Tnfaip1)的靶向关系。大鼠分为假手术组、模型组(CCI)、阴性对照组(CCI+转染模拟物阴性对照)、miR-138-5p组(CCI+转染miR-138-5p模拟物)和阳性对照组(CCI+加巴喷丁)，每组45只。每组各取10只大鼠，于CCI术后第0、3、7、14、21天，测量机械缩爪阈值(PWT)和缩爪潜伏期(PWL);余35只在上述5个时间点各处死7只，取背根神经节组织，采用RT-qPCR检测miR-138-5p，采用ELISA法检测IL-6、TNF-α含量(仅检测第0、7、14天)。分离正常大鼠背根神经节卫星胶质细胞，分为空白对照组、LPS组(1 mg/L LPS处理2 h)、阴性对照组、miR-138-5p组和miR-138-5p+Tnfaip1组，后3组分别转染相应质粒后再用LPS处理2 h。分别采用RT-qPCR和Western blot法检测miR-138-5p和Tnfaip1、核NF-κB蛋白的表达，ELISA法检测IL-6、TNF-α分泌量，双染法检测细胞凋亡率。结果:双荧光素酶报告实验证实miR-138-5p和Tnfaip1存在靶向关系。与假手术组相比，模型组PWT和PWL降低，背根神经节组织中miR-138-5p表达水平降低，IL-6和TNF-α含量升高(P<0.05);与模型组相比，miR-138-5p组PWT和PWL升高，IL-6和TNF-α含量降低(P<0.05)。体外细胞实验表明，与空白对照组相比，LPS组miR-138-5p表达水平降低，IL-6和TNF-α分泌量增加，细胞凋亡率升高，Tnfaip1、核NF-κB p65蛋白表达水平升高(P<0.05);与LPS组相比，miR-138-5p组上述指标的变化发生逆转，而miR-138-5p+Tnfaip1组上述逆转作用减弱(P<0.05)。结论:miR-138-5p可能通过靶向抑制Tnfaip1介导的NF-κB信号通路减轻CCI大鼠神经病理性疼痛。

关键词

神经病理性疼痛 / 慢性压迫性损伤 / miR-138-5p / 肿瘤坏死因子诱导蛋白1 / NF-κB信号通路 / 大鼠