不同来源间充质干细胞外泌体对口腔鳞状细胞癌血管生成的影响

摘要

目的:探讨不同来源间充质干细胞外泌体(Exo)对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)功能及口腔鳞状细胞癌裸鼠移植瘤新生血管形成的影响。方法:收集正常口腔黏膜、口腔白斑及口腔鳞状细胞癌组织,分离间充质干细胞后,采用外泌体提取试剂盒获得N-Exo、OLK-Exo和Ca-Exo。HUVEC分别用PBS(Control组)、N-Exo、OLK-Exo和Ca-Exo处理(Exo终浓度均为100μg/mL)24 h,采用CCK-8检测细胞增殖能力,划痕实验检测迁移能力,Transwell实验检测侵袭能力,管腔形成实验检测总管长、分支点数和管段数,Western blot法检测血管生成相关蛋白VEGFA、VEGFR2、CD31的表达。24只裸鼠随机分为4组,每组6只,于右侧腋下皮下注射人舌鳞状细胞癌CaL27细胞1×10～7个/只,7 d后于瘤体周围皮下注射PBS、N-Exo、OLK-Exo或Ca-Exo(100μg/次),每周1次,共2次。末次给药7 d后,处死裸鼠,统计肿瘤表面新生血管数,免疫组化法检测CD31标记的微血管密度(MVD)。结果:与Control组比较,Ca-Exo组和OLK-Exo组细胞增殖率不同程度升高,划痕愈合率及侵袭细胞数增加,总管长、分支点数及管段数均增加,且Ca-Exo组高于OLK-Exo组(P<0.05);OLK-Exo组VEGFA、VEGFR2及CD31蛋白表达水平均升高,Ca-Exo组VEGFR2及CD31蛋白表达水平升高(P<0.05),且CD31蛋白表达水平高于OLK-Exo组(P<0.05)。与Control组和N-Exo组相比,OLK-Exo组和Ca-Exo组裸鼠移植瘤表面新生血管数、MVD增加(P<0.05)。结论:OLK-Exo和Ca-Exo可促进血管生成,Ca-Exo作用更显著。

关键词

间充质干细胞 / 外泌体 / 人脐静脉内皮细胞 / 血管生成 / 口腔鳞状细胞癌