丙泊酚对氧糖剥夺/复糖复氧海马神经元H22细胞损伤及Notch1信号通路的影响

摘要

目的:探讨丙泊酚对氧糖剥夺/复糖复氧(OGD/R)诱导的海马神经元HT22细胞损伤以及Notch1信号通路的影响。方法:H22细胞分为6组:正常对照组(不处理)、模型组(OGD 2 h、复糖复氧24 h)、L-PPF组(15μmol/L丙泊酚+OGD/R)、H-PPF组(45μmol/L丙泊酚+OGD/R)、激动剂组[8 mmol/L丙戊酸(VPA)+OGD/R]、H-PPF+激动剂组(45μmol/L丙泊酚+8 mmol/L VPA+OGD/R)。后5组在给予相应药物处理2 h后进行OGD/R干预。分别采用双荧光染色法、TUNEL法检测细胞活力和细胞凋亡，罗丹明123荧光染色法、二氢乙啶荧光探针法检测线粒体膜电位、细胞中ROS水平，ELISA法检测乳酸脱氢酶(LDH)漏出量、细胞中4-羟基壬烯醛(4-HNE)、超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)水平，BODIPY 581/591 C11荧光探针检测细胞内脂质过氧化水平，Ferro Orange荧光探针法检测细胞中铁离子含量，RT-qPCR法检测细胞中铁代谢相关蛋白转铁蛋白受体(TFR)、二价铁金属转运体1(DMT1)、铁调节蛋白2(IRP2)以及谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4) mRNA的表达，Western blot法检测细胞中Notch1、分子发状分裂相关增强子1(HES-1)以及Notch配体齿状蛋白1(Jagged1)的表达。结果:与正常对照组相比，模型组细胞活力和线粒体膜电位降低，凋亡率升高，LDH漏出量、4-HNE水平、MDA水平、ROS含量和脂质过氧化水平升高，SOD水平降低，铁离子含量，TFR、DMT1、IRP2 mRNA的表达升高，GPX4 mRNA的表达降低，Notch1、HES-1、Jagged1蛋白的表达升高(P<0.05);与模型组相比，L-PPF组、H-PPF组上述指标的变化均发生逆转(P<0.05);与H-PPF组相比，H-PPF+激动剂组再次发生逆转(P<0.05)。结论:丙泊酚能抑制氧化应激，减少铁离子含量，减轻OGD/R后神经元损伤，其机制可能与调控Notch1信号通路有关。

关键词

丙泊酚 / 氧糖剥夺/复糖复氧 / 铁代谢 / Notch1 / 海马神经元