miR-140-3p靶向BRD9对肺腺癌肿瘤免疫微环境的影响

摘要

目的:探讨miR-140-3p靶向含溴结构域蛋白9（BRD9）对肺腺癌肿瘤免疫微环境的影响。方法:基于TCGA数据库比较正常肺组织和肺腺癌组织中miR-140-3p和BRD9 mRNA的表达水平。将miR-NC（对照）和miR-140-3p mimics（过表达）转入肺腺癌HCC44细胞,RT-qPCR和Western blot检测BRD9的表达。双荧光素酶报告基因实验验证miR-140-3p与BRD9的靶向关系。基于TCGA数据库,根据miR-140-3p和BRD9的表达水平的中位数将所有样本分为高、低表达组,比较组间基质得分、免疫得分和ESTIMATE综合得分以及不同免疫细胞的富集评分,并采用Spearman相关性分析评估免疫细胞富集评分与miR-140-3p和BRD9表达的关系。将转染miR-140-3p mimics的HCC44细胞与CD8⁺T细胞共培养,采用流式细胞仪,ELISA和CCK-8实验评估CD8⁺T细胞的活化情况及其杀伤力。结果:肺腺癌组织中miR-140-3p表达下调,BRD9 mRNA表达上调（P<0.05）。miR-140-3p mimics抑制HCC44细胞BRD9的表达（P<0.05）。双荧光素酶报告基因实验证实BRD9是miR-140-3p的靶基因（P<0.001）。miR-140-3p高表达组和BRD9低表达组患者有较高的基质得分、免疫得分、ESTIMATE综合得分和CD8⁺T细胞富集评分（P<0.05）,且CD8⁺T细胞富集评分与miR-140-3p和BRD9的表达相关（r_S=0.091和-0.157,P<0.05）。过表达miR-140-3p可促进CD8⁺T细胞的活化并增加其杀伤力（P<0.05）。结论:miR-140-3p可靶向BRD9增强肺腺癌细胞的肿瘤免疫反应。

关键词

miR-140-3p / 肺腺癌 / 含溴结构域蛋白9 / 肿瘤免疫微环境 / HCC44细胞