高表达miR-135a的骨髓间充质干细胞来源的外泌体对细菌性脑膜炎新生大鼠神经损伤及FOXO1表达的影响

摘要

目的:探讨高表达miR-135a的骨髓间充质干细胞来源外泌体(BMSC Exo-miR-135a)对细菌性脑膜炎(BM)新生大鼠神经损伤及FOXO1表达的影响。方法:分离大鼠BMSC,用脂质体3000将miR-135 mimic或miR-NC转染48 h后,密度梯度离心法分离外泌体,得BMSC Exo-miR-135a和Exo-miR-NC。60只新生大鼠随机分为对照、BM、Exo-miR-NC和Exo-miR-135a组,每组15只。BM、Exo-miR-NC和Exo-miR-135a组小脑延髓池内注射B族链球菌(GBS),6 h后分别向侧脑室内注射生理盐水、Exo-miR-NC和Exo-miR-135a。GBS注射24 h后,Loeffler评分法进行神经行为学评估,收集脑脊液进行GBS菌落、白细胞计数,ELISA法检测TNF-α、IL-1β和IL-6含量(n=15);EB实验检测血脑屏障通透性(n=5),HE、Nissl和TUNEL染色评估脑组织病理学改变(n=5);RT-qPCR检测脑组织中miR-135a和FOXO1 mRNA表达,Western blot法检测FOXO1蛋白的表达(n=5)。结果:与对照组比较,BM组大鼠Loeffler评分降低;脑脊液中GBS菌落计数、白细胞计数和炎症因子含量,EB渗漏量,脑含水量增加,脑组织Nissl小体数量和miR-135a表达降低,HE评分、细胞凋亡率及FOXO1表达增加(P<0.05)。与BM组相比,Exo-miR-NC和Exo-miR-135a处理可逆转上述指标变化(P<0.05),Exo-miR-135a组变化更显著(P<0.05)。结论:BMSC Exo-miR-135a可能通过靶向FOXO1减轻炎症反应和细胞凋亡,对BM新生大鼠发挥神经保护作用。

关键词

骨髓间充质干细胞 / 外泌体 / miR-135a / FOXO1 / 细菌性脑膜炎 / 神经损伤