雷公藤内酯通过miR-142-3p靶向HMGA2对高糖诱导的肾小管上皮细胞损伤和炎症反应的影响

摘要

目的:探讨雷公藤内酯(TP)通过miR-142-3p靶向高迁移率族蛋白A2(HMGA2)对高糖(HG)诱导的肾小管上皮细胞(TEC)损伤和炎症反应的影响。方法:采用双荧光素酶报告基因实验验证miR-142-3p与HMGA2的靶向关系。取HK-2细胞分为对照组(正常培养),HG组(30 mmol/L葡萄糖诱导细胞24 h),L-TP、H-TP组(HG+100、200μg/mL TP处理),TP+anti-NC组(HG+200μg/mL TP+转染anti-NC处理),TP+anti-miR-142-3p组(HG+200μg/mL TP+转染anti-miR-142-3p处理)。RT-qPCR法检测miR-142-3p、HMGA2 mRNA的表达;MTT法检测细胞增殖活性;FITC/PI双染法检测细胞凋亡;ELISA法检测细胞上清中IL-6、TNF-α、TGF-β的含量;Western blot法检测细胞中HMGA2、Bax蛋白的表达。结果:miR-142-3p和HMGA2存在靶向关系。HG组细胞增殖活性、miR-142-3p表达低于对照组;细胞凋亡率,IL-6、TNF-α、TGF-β含量,HMGA2 mRNA和蛋白、Bax蛋白表达水平高于对照组(P<0.05)。L-TP组、H-TP组细胞增殖活性、miR-142-3p表达高于HG组;细胞凋亡率,IL-6、TNF-α、TGF-β含量,HMGA2 mRNA和蛋白、Bax蛋白表达水平低于HG组;H-TP组以上指标的变化更明显(P<0.05)。TP+anti-miR-142-3p组细胞增殖活性、miR-142-3p表达低于H-TP组和TP+anti-NC组,细胞凋亡率,IL-6、TNF-α、TGF-β含量,HMGA2 mRNA和蛋白、Bax蛋白表达水平高于H-TP组和TP+anti-NC组(P<0.05)。结论:TP可上调miR-142-3p表达,抑制HMGA2表达,进而减少高糖诱导的TEC损伤和炎症反应。

关键词

雷公藤内酯 / miR-142-3p / 高迁移率族蛋白A2 / 高糖 / HK-2细胞 / 炎症反应