LncRNA H19对苯并[a]芘诱导的人支气管上皮细胞上皮-间质转化的影响

摘要

目的:探讨长链非编码RNA H19对苯并[a]芘(Bap)诱导的人支气管上皮细胞恶性转化启动和进展阶段上皮-间质转化(EMT)的影响。方法:人支气管上皮样细胞16HBE用16μmol/L BaP染毒24 h×40次构建恶性转化细胞模型16HBE-T40。16HBE-T40细胞感染负载shH19的慢病毒(滴度为1×10～8 TU/mL),得到恶性转化进展阶段稳定敲低H19的细胞株16HBE-T40-shH19。16HBE细胞感染负载shH19的慢病毒后进行BaP染毒处理,得到恶性转化启动阶段稳定敲低H19的细胞株16HBE-shH19-T40。采用实时荧光定量PCR测定4种细胞中H19的表达情况,通过划痕实验、Transwell小室侵袭和迁移实验、平板克隆形成实验检测细胞的迁移、侵袭和克隆形成能力,采用Western blot法检测细胞中EMT相关蛋白E-cadherin、N-cadherin、Vimentin的表达情况。结果:与16HBE比较,16HBE-T40细胞划痕闭合率、迁移细胞数、侵袭细胞数、克隆形成数均增加,细胞中E-cadherin蛋白表达下调,N-cadherin、Vimentin蛋白表达上调(P<0.05)。与16HBE-T40比较,16HBE-shH19-T40和16HBE-T40-shH19细胞划痕闭合率、迁移细胞数、侵袭细胞数、克隆形成数均降低,细胞中E-cadherin蛋白表达上调,N-cadherin、Vimentin蛋白表达下调(P<0.05);16HBE-shH19-T40变化更显著(P<0.05)。结论:H19可能促进BaP诱导的人支气管上皮细胞的EMT和恶性转化,且对细胞恶性转化启动阶段EMT的影响更大。

关键词

长链非编码RNA H19 / 苯并[a]芘 / 上皮-间质转化 / 人支气管上皮细胞