Kv1.3抑制剂玛格斑蝎毒素对肾损伤模型小鼠M1型巨噬细胞极化及肾脏炎症和损伤的影响

摘要

目的:观察电压门控钾离子通道亚型（voltage-gated potassium channel isoform, Kv）1.3抑制剂玛格斑蝎毒素（margatoxin, MgTx）对单侧输尿管梗阻（unilateral ureteral obstruction, UUO）小鼠巨噬细胞（macrophage, M_?）极化及肾脏炎症和损伤的影响。方法:将48只雄性C57BL/6J小鼠随机均分为4组：假手术（Sham）组、Sham+MgTx组、UUO组、UUO+MgTx组，每组12只；Sham组行单纯开腹及关腹手术，术后每日腹腔注射生理盐水，Sham+MgTx组行开腹及关腹手术，术后每日腹腔注射MgTx, UUO组行UUO手术，术后每日腹腔注射生理盐水，UUO+MgTx组行UUO手术，术后每日腹腔注射MgTx。分别于术后第3天、第7天每组麻醉6只小鼠，眼球采血留取外周血，然后立即处死小鼠并收集肾组织；采用HE染色评估肾脏损伤程度；蛋白免疫印迹法检测肾组织中Kv1.3及转化生子因子-β1（TGF-β1）、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）表达；流式细胞术分析外周血单核细胞的改变及肾组织中M_?极化情况；qRT-PCR检测肾组织M1型及M2型M_?标志物相关mRNA相对表达量。结果:与Sham组相比，UUO组可见明显的肾损伤及炎症反应，Kv1.3、TGF-β1、α-SMA相对表达水平明显升高（P<0.001）;与UUO组相比，UUO+MgTx组肾损伤明显减轻，Kv1.3、TGF-β1、α-SMA相对表达水平明显降低（P<0.001）。此外，与Sham组相比，UUO组外周血单核细胞及肾组织中M1型M_?比例明显升高（P<0.01）,M1型M_?标志物相关mRNA相对表达量明显升高（P<0.01）,M2型M_?标志物相关mRNA相对表达量明显降低（P<0.01）;与UUO组相比，UUO+MgTx组外周血单核细胞比例及肾组织中M1型M_?比例明显降低（P<0.01）,M1型M_?标志物mRNA相对表达量显著降低（P<0.01）,M2型M_?标志物mRNA水平显著升高（P<0.01）。结论:Kv1.3抑制剂MgTx可抑制UUO小鼠M_?向M1极化，减轻肾脏炎症和损伤。

关键词

电压门控钾离子通道亚型1.3 / 玛格斑蝎毒素 / 巨噬细胞 / 极化 / 肾脏损伤 / 单侧输尿管梗阻