3,3′-二吲哚甲烷通过诱导铁死亡抑制紫杉醇耐药非小细胞肺癌A549/T细胞增殖

摘要

目的:探讨3,3′-二吲哚甲烷(3,3′-diindolylmethane, DIM)对紫杉醇耐药非小细胞肺癌A549/T细胞的影响及其潜在机制。方法:采用蛋白免疫印迹法检测人正常呼吸道上皮BEAS-2b细胞、人非小细胞肺癌A549细胞、人紫杉醇耐药非小细胞肺癌A549/T细胞、人大细胞肺癌H460细胞中转铁蛋白受体(transferrin receptor, TFRC)、溶质载体家族7成员11(solute carrier family 7 member 11,SLC7A11)、谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)表达，筛选最适细胞。采用不同浓度DIM(0、20、40、80、160μmol/L)处理A549及A549/T细胞，CCK-8法检测细胞活力，蛋白免疫印迹法检测A549/T细胞中TFRC、SLC7A11、GPX4蛋白表达，筛选DIM最适作用浓度。另取A549/T细胞，分为对照组，用含10%胎牛血清的高糖培养基培养24 h; Erastin组，10μmol/L Erastin处理12 h; DIM组，80μmol/L DIM处理24 h; DIM+Erastin组，先10μmol/L Erastin预处理12 h,再80μmol/L DIM处理24 h; CCK-8法检测细胞活力，蛋白免疫印迹法检测TFRC、SLC7A11和GPX4蛋白表达。结果:与BEAS-2b细胞相比，A549细胞中TFRC、SLC7A11表达明显增加(P<0.05),A549/T细胞中TFRC、SLC7A11、GPX4蛋白表达明显增加(P<0.05),H460细胞中TFRC、SLC7A11和GPX4表达差异均无统计学意义(P>0.05)。在A549/T细胞中，与0μmol/L组相比，80μmol/L DIM组TFRC、SLC7A11、GPX4蛋白表达变化最明显(P均<0.05);在A549细胞中，与0μmol/L组相比，20、40、80、160μmol/L DIM组细胞活力均明显降低(P均<0.05);在A549/T细胞中，与0μmol/L DIM组相比，80、160μmol/L DIM组细胞活力明显降低(P均<0.05)。与对照组、DIM组及Erastin组相比，DIM+Erastin组A549/T细胞中TFRC表达水平明显升高(P均<0.05),SLC7A11、GPX4表达水平明显降低(P均<0.05),细胞活力明显下降(P均<0.05)。结论:DIM可能通过诱导铁死亡抑制紫杉醇耐药非小细胞肺癌A549/T细胞增殖，铁死亡诱导剂可增强DIM抗癌效应。

关键词

3,3′-二吲哚甲烷 / 紫杉醇耐药非小细胞肺癌 / 非小细胞肺癌 / 铁死亡 / 肿瘤耐药 / A549/T细胞