LncRNA SNHG11通过上调LIN28A表达促进胰腺癌细胞干性

摘要

目的:探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)核仁小分子RNA宿主基因11(small nucleolar RNA host gene 11,SNHG11)对胰腺癌细胞增殖和干性的影响及其可能的机制。方法:通过TCGA和GTEx数据库分析SNHG11在泛癌和对应癌旁组织、胰腺癌和胰腺组织中的表达；通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测SNHG11在胰腺癌PANC1、PaTu8988、MIApaca-2细胞中的表达；在胰腺癌PANC1和PaTu8988细胞中分别转染pcDNA3.1、pcDNA3.1-SNHG11质粒，在胰腺癌PANC1和MIApaca-2细胞中分别转染sh-EGFP、sh-SNHG11质粒，qRT-PCR检测质粒转染效率，CCK-8法检测细胞增殖率，克隆形成实验检测细胞克隆数及大小，qRT-PCR及蛋白免疫印迹法分别检测干性指标NANOG同源框蛋白(NANOG homeobox protein, NANOG)、Y染色体性别决定区相关HMG盒基因2(sex determining region of Y-chromosome related HMG-box2,SOX2)、八聚体结合转录因子4(octamer binding transcription factor 4,OCT4)、细胞癌基因myc(cellular oncogene myc, c-myc)和LIN28同源物A(LIN28 homolog A,LIN28A)mRNA和蛋白相对表达水平，干细胞成球实验检测干细胞成球数量及直径变化；RNA免疫沉淀实验检测SNHG11和LIN28A结合情况。共转染pcDNA3.1-SNHG11+sh-LIN28A或sh-SNHG11+3×Flag-LIN28A,qRT-PCR检测干性指标NANOG、SOX2、OCT4、c-myc mRNA相对表达水平，干细胞成球实验检测干细胞成球数量和直径变化。结果:LncRNA SNHG11在多种恶性肿瘤中高表达，包括胰腺癌。SNHG11在胰腺癌细胞中相对表达量从低到高依次为胰腺癌PaTu8988、PANC1、MIApaca-2细胞(P均<0.05)。上调SNHG11表达，胰腺癌细胞增殖和干性能力明显增强，下调则与之相反(P均<0.05)。SNHG11可以与LIN28A结合。过表达SNHG11致胰腺癌细胞干性能力明显增强，干扰LIN28A致胰腺癌细胞干性能力明显降低，在过表达SNHG11的胰腺癌细胞中下调LIN28A表达，胰腺癌细胞的干性促进能力明显被抑制(P均<0.05);与之相反，干扰SNHG11致胰腺癌细胞干性能力明显降低，过表达LIN28A致胰腺癌细胞干性能力明显增强，在低表达SNHG11的胰腺癌细胞中上调LIN28A表达，可明显逆转胰腺癌细胞的干性抑制作用(P均<0.05)。结论:LncRNA SNHG11可能通过上调LIN28A表达，促进胰腺癌细胞的增殖能力并增强其干性能力。

关键词

长链非编码RNA(lncRNA) / 核仁小分子RNA宿主基因11(SNHG11) / LIN28A / 干性 / 胰腺癌