LncRNA DNAH17-AS1在胃癌中的表达及意义

摘要

目的:研究长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)动力蛋白轴丝重链17的反义链1(dynein axonemal heavy chain 17-antisense strand 1,DNAH17-AS1)在胃癌组织中的表达水平和临床意义，以及对胃癌细胞生物学功能的影响和可能机制。方法:采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测组织标本(108例胃癌组织及其相应的癌旁组织)、血浆标本(胃癌患者和健康体检者各25例)中lncRNA DNAH17-AS1相对表达；分析lncRNA DNAH17-AS1表达与胃癌患者临床病理特征的相关性。将胃癌AGS、HGC-27细胞分别分成si-NC对照组和siRNA敲减组，采用脂质体转染方法，分别转染si-NC和si-DNAH17-AS1,通过细胞计数、平板克隆形成实验及Transwell实验分别检测胃癌AGS、HGC-27细胞增殖、克隆、迁移及侵袭；采用qRT-PCR和蛋白质印迹法分别检测胃癌细胞中相关基因mRNA和蛋白相对表达水平。结果:与癌旁组织相比，lncRNA DNAH17-AS1在胃癌组织中相对表达量明显增加(P<0.001);胃癌组织中lncRNA DNAH17-AS1相对表达量与患者TNM分期及淋巴结转移相关(P<0.05);DNAH17-AS1高表达组患者5年生存率较低表达组明显降低(P<0.05);胃癌患者血浆中lncRNA DNAH17-AS1相对表达量较健康体检者明显增加(P<0.01);血浆DNAH17-AS1检测胃癌的ROC曲线下面积为0.721(P<0.01)。与si-NC对照组比较，siRNA敲减组胃癌AGS、HGC-27细胞增殖、克隆、迁移及侵袭明显降低(P均<0.001),E-cad mRNA和蛋白相对表达明显增加(P<0.01),而N-cad、Slug、Snail、ZEB1、MMP9、β-catenin mRNA和蛋白相对表达明显降低(P<0.05或P<0.01)。结论:LncRNA DNAH17-AS1在胃癌患者癌组织及血浆中呈高表达，且与患者不良预后相关；降低DNAH17-AS1表达可抑制胃癌细胞增殖、克隆、侵袭及迁移，其作用机制可能与调控上皮间充质转化相关分子表达有关。

关键词

胃癌 / 长链非编码RNA(lncRNA) / DNAH17-AS1 / 上皮间充质转化(EMT)