新生小鼠原代心肌细胞分离及培养方法的改进

罗洁; 曹梦菲; 付可威; 吕书梅; 袁伟

doi:10.13312/j.issn.1671-7783.y240093

江苏大学学报(医学版) ›› 2025, Vol. 35 ›› Issue (02) : 161 -165. DOI: 10.13312/j.issn.1671-7783.y240093

新生小鼠原代心肌细胞分离及培养方法的改进

罗洁, 曹梦菲, 付可威, 吕书梅, 袁伟

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摘要

目的:改进原代乳小鼠心肌细胞的分离及培养方法，稳定获得高活性以及高纯度的原代乳小鼠心肌细胞。方法:取1～3日龄新生乳小鼠心脏，采用胰蛋白酶联合Ⅱ型胶原酶两步消化法，通过差速贴壁分离纯化心肌细胞，体外培养于含10%马血清的改良DMEM。在倒置相差显微镜下观察心肌细胞形态学特征及搏动规律，台盼蓝染色检测心肌细胞存活率，利用肌钙蛋白T(cTnT)免疫荧光染色鉴定心肌细胞。结果:原代乳小鼠心肌细胞分离培养24 h后基本贴壁，并出现自发性搏动，第4天聚合成簇，呈同步性搏动；细胞存活率平均为90.63%,心肌细胞纯度平均为93.17%。结论:本实验采用改良分离及培养方法能够稳定获得高活性以及高纯度的原代乳小鼠心肌细胞。