严氏温阳化瘀利水方改善慢性心衰大鼠心脏功能的作用及可能机制

摘要

目的:明确严氏温阳化瘀利水方（YWHLF）对慢性心力衰竭（CHF）大鼠心脏功能的改善作用并探讨其可能机制。方法:通过腹主动脉缩窄术（AAC）制备CHF大鼠，分别给予低剂量（18.2 mg/g）和高剂量（36.3 mg/g）YWHLF灌胃8周后，通过多普勒超声心动图检测血流动力学指标，HE染色分析心肌组织病理，TUNEL染色检测心肌细胞凋亡，ELISA测定大鼠血浆中B型利钠肽（BNP）、活性氧（ROS）、丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）以及肌钙蛋白T（cTnT）含量，蛋白质印迹检测心肌组织中核因子E2相关因子2（NRF2）、血红素氧合酶-1（HO-1）和醌氧化还原酶1（NQO1）蛋白表达。用3%和8%体积浓度的YWHLF以及5μmol/L的NRF2蛋白抑制剂ML385预处理H9c2细胞1 h,再经氧糖剥夺（OGD）处理24 h, CCK-8检测细胞增殖活性，蛋白质印迹检测NRF2蛋白在细胞核内表达。通过荧光素酶实验分析YWHLF对H9c2细胞中NRF2蛋白与抗氧化反应元件（ARE）结合的影响。结果:YWHLF能有效提高CHF大鼠左心室收缩压（LVSP）和左心室内压最大上升（或下降）速率(±dp/dt_max),降低左心室舒张末期压（LVEDP）,减少心肌组织炎性细胞浸润和心肌细胞凋亡，降低血浆BNP、ROS、MDA和cTnT并上调SOD含量，上调心肌组织中NRF2、HO-1和NQO1蛋白表达，且高剂量药物效果明显优于低剂量。细胞实验结果表明，YWHLF预处理能有效促进OGD条件下H9c2细胞的增殖并增加NRF2蛋白在细胞核内表达，且高剂量效果明显优于低剂量，ML385能够逆转YWHLF的上述作用。YWHLF能有效增强H9c2细胞内NRF2蛋白与ARE的结合。结论:YWHLF能通过激活NRF2信号通路抑制缺血引起的心肌损伤从而改善CHF大鼠的心功能。

关键词

慢性心力衰竭 / 心肌细胞损伤 / 核因子E2相关因子2(NRF2) / 严氏温阳化瘀利水方 / 腹主动脉缩窄术