巨噬细胞来源的瘦素促进Th17分化参与心肌炎性损伤

摘要

目的:探究瘦素（Leptin）与辅助性T细胞17（T helper 17,Th17）在心肌炎性损伤过程中的作用。方法:采用柯萨奇病毒B3（coxsackievirus B3,CVB3）构建病毒性心肌炎（viral myocarditis, VMC）模型；将小鼠分为对照组和VMC组，通过HE染色检测心肌炎性浸润情况，流式细胞术（FACS）检测脾脏组织Th17的表达，定量实时PCR（qRT-PCR）检测心脏组织中IL-17A mRNA的表达，酶联免疫吸附试验（ELISA）检测外周血血清中IL-17A的含量。分离正常以及db/db（Leptin受体缺陷）小鼠脾脏组织中初始CD4⁺T细胞，分为对照组、Th17组以及Leptin+Th17组，分化培养后检测Th17细胞比例和培养上清液中IL-17A含量。最后，运用氯膦酸盐脂质体去除巨噬细胞（macrophage, Mφ）后构建VMC小鼠模型，分为对照组、VMC组和VMC+脂质体组，检测脾脏和腹腔巨噬细胞比例、心肌炎性浸润情况、心脏组织中Leptin mRNA表达以及外周血中Leptin和IL-17A含量。结果:与对照组相比，VMC组心肌炎性浸润增加，脾脏Th17比例上调，心脏组织IL-17A mRNA表达和血清IL-17A含量明显增加（P<0.05）。体外分离正常小鼠CD4⁺T细胞后，Leptin+Th17组Th17比例及培养上清液IL-17A含量较Th17组显著增加（P<0.05）,而Lepr^-/-CD4⁺T细胞中两组Th17比例、IL-17A含量无明显差异。体内敲除巨噬细胞后，VMC+脂质体组小鼠脾脏与腹腔巨噬细胞（CD11b⁺F4/80⁺）比例较VMC组明显减低，心肌炎性浸润缓解，心脏组织Leptin mRNA表达、脾脏组织Th17比例及外周血Leptin和IL-17A含量较VMC组显著减低。结论:巨噬细胞来源的Leptin通过调控Th17分化参与心肌炎性损伤发生。

关键词

巨噬细胞 / 瘦素 / 病毒性心肌炎 / Th17