HucMSC-sEVs通过抑制肾小管上皮细胞坏死性凋亡缓解糖尿病肾病大鼠肾损伤

薛玲玲; 金灿; 钱晖

doi:10.13312/j.issn.1671-7783.y250040

江苏大学学报(医学版) ›› 2026, Vol. 36 ›› Issue (1) : 36 -43. DOI: 10.13312/j.issn.1671-7783.y250040

HucMSC-sEVs通过抑制肾小管上皮细胞坏死性凋亡缓解糖尿病肾病大鼠肾损伤

薛玲玲, 金灿, 钱晖

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摘要

目的:探究人脐带间充质干细胞源小细胞外囊泡(human umbilical cord mesenchymal stem cell-derived small extracellular vesicles, HucMSC-sEVs)对糖尿病肾病(diabetic kidney disease, DKD)大鼠肾损伤的干预作用，并研究其潜在的作用机制。方法:分离培养HucMSCs,从其培养上清液中提取HucMSC-sEVs。高脂联合链脲佐菌素(streptozocin, STZ)构建DKD大鼠模型，监测大鼠空腹血糖水平，造模成功后，将大鼠随机分为DKD组和HucMSC-sEVs组，以正常大鼠为对照组。造模8周后通过大鼠尾静脉注射HucMSC-sEVs, 24周后收集肾组织。HE染色检测肾组织病变程度，Masson染色观察肾组织纤维样改变；采用qRT-PCR、蛋白质印迹法和免疫组织化学染色等方法检测p-RIPK1/RIPK1,p-RIPK3/RIPK3和p-MLKL/MLKL等坏死性凋亡标志蛋白的表达水平。对大鼠肾小管上皮细胞NRK-52E进行高糖以及HucMSC-sEVs处理，透射电子显微镜观察NRK-52E细胞坏死现象，蛋白质印迹法和qRT-PCR法检测p-RIPK1/RIPK1,p-RIPK3/RIPK3和p-MLKL/MLKL等坏死性凋亡标志蛋白的表达水平。结果:与对照组相比，DKD组大鼠肾小球基底膜明显增厚，间质发生纤维样的改变，坏死性凋亡标志蛋白表达明显增加；经过HucMSC-sEVs治疗后，大鼠肾组织病理损伤和纤维化程度显著缓解，坏死性凋亡标志蛋白表达明显降低。在体外实验中，高糖处理NRK-52E细胞后，细胞呈现线粒体嵴断裂消失、内质网扩张等坏死现象，坏死性凋亡标志蛋白p-RIPK1/RIPK1,p-RIPK3/RIPK3和p-MLKL/MLKL表达水平显著增加，HucMSC-sEVs处理后细胞坏死程度显著降低，坏死性凋亡标志蛋白表达水平明显降低。结论:HucMSC-sEVs能保护肾功能延缓大鼠的DKD进展，其发挥作用的机制可能与抑制肾小管上皮细胞坏死性凋亡有关。