ZnSO₄通过干扰PRRSV的生命周期阶段抑制PRRSV的增殖

摘要

[目的]本文旨在探究硫酸锌（Zinc sulfate,ZnSO₄）抑制猪繁殖与呼吸综合征病毒（Porcine respiratory and reproductive syndrome virus,PRRSV）复制的作用，明确Zn²⁺载体槲皮素（Quercetin,QR）增强Zn抗PRRSV感染的作用，为进一步将ZnSO₄联合QR作为潜在预防和治疗PRRSV感染的有效策略提供理论支持。[方法]利用细胞培养半数感染量(Cell culture infective dose 50%,CCID₅₀)的方法检测ZnSO₄和ZnCl₂对PRRSV滴度的影响。利用实时荧光定量PCR（Quantitative Real-time PCR,qRT-PCR）和蛋白印迹（Western blot,WB）检测ZnSO₄处理Marc-145和PAMs细胞后，PRRSV N基因和N蛋白表达量的变化。利用qRT-PCR检测ZnSO₄预处理24 h后，在4℃和37℃处理下PRRSV N基因表达量的变化。同时，利用qRT-PCR检测ZnSO₄处理不同时间，培养基上清中PRRSV N基因表达量的变化。利用qRT-PCR和WB检测ZnSO₄、QR以及两者联合处理，PRRSV N基因和N蛋白表达量的变化。[结果]CCID₅₀结果表明：ZnSO₄和ZnCl₂均可显著降低PRRSV滴度。在Marc-145和PAMs上，不同浓度ZnSO₄处理，均可显著抑制PRRSV N基因和N蛋白表达，且抑制作用呈明显的剂量-效应关系。不同浓度ZnSO₄预处理24 h，在4℃和37℃处理2 h后，均可显著降低PRRSV N基因表达，且呈明显的剂量-效应关系。100μmol·L^-1ZnSO₄处理，在不同时间段，可显著抑制上清中PRRSV N基因的表达。ZnSO₄联合QR处理结果表明，ZnSO₄联合QR可显著抑制PRRSV N基因和N蛋白的表达。[结论]ZnSO₄能显著抑制PRRSV的复制，它不仅可以阻止PRRSV的黏附和进入，而且可以抑制PRRSV的复制和干扰PRRSV的释放。此外，QR可以增强ZnSO₄抗PRRSV感染的作用。本研究为进一步明确ZnSO₄抗PRRSV感染的分子机制奠定了理论基础。

关键词

硫酸锌 / 猪繁殖与呼吸综合征病毒 / 抗病毒 / 槲皮素